Отправить статью по E-mail 
Кандидоз: проблема поиска новых этиотропных препаратов среди продуктов органического синтеза
- Авторы: Новикова В.В.1, Гейн В.Л.1, Бобровская О.В.1, Пулина Н.А.1, Игидов Н.М.1, Рудакова И.П.1
-
Учреждения:
- Пермская государственная фармацевтическая академия Министерства здравоохранения Российской Федерации
- Выпуск: Том 5, № 1 (2023)
- Страницы: 10-19
- Раздел: Фармацевтические науки
- URL: https://journals.eco-vector.com/PharmForm/article/view/409374
- DOI: https://doi.org/10.17816/phf409374
- ID: 409374
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Проведен скрининг 1043 соединений – продуктов органического синтеза на противогрибковую активность на типовом штамме C. albicans NCTC 885-653 в планктонной культуре. В результате углубленных исследований высоко активных веществ на типовых и клинических штаммах Candida spp., в том числе в условиях биопленкообразования, выявлено 3 соединения-лидера, являющихся представителями новых химических рядов, не описанных ранее, имеющих высокую противогрибковую активность (МПК50 - 1,0-2,0; МПК90 - 7,8-31,2), более эффективных, чем препарат сравнения флуконазол. Предложена методология поиска соединений с ПГА среди продуктов органического синтеза, базирующаяся на применении теоретических, физико-химических, биологических методов. Разработан подход исследования антифунгальной активности у новых соединений с применением микробиологических методов, включающий скрининг на типовых штаммах дрожжевых грибов, углубленные исследования на клинических изолятах для определения кумулятивных показателей чувствительности популяции микроорганизмов, изучение ПГА соединений в условиях биопленкообразования.
Ключевые слова
Полный текст
СОКРАЩЕНИЯ:
МПК – Минимальная подавляющая концентрация; ПГА – противогрибковая активность.
ВВЕДЕНИЕ
Грибковые инфекции, включающие поверхностные и глубокие микозы, являются распространённой патологией и важной составляющей инфекционной заболеваемости [1–5]. Так по данным исследователей смертность от микозов достигает 1,3–1,5 млн случаев в год, и сравнима с летальностью от туберкулеза, ВИЧ-инфекции [1, 6]. К высокой частоте этой группы заболеваний приводят предрасполагающие факторы, такие как использование гормональных контрацептивов, антибиотикотерапия, метаболические нарушения, врожденные и приобретенные иммунодефициты. Кроме того, росту данной группы инфекций способствует прогрессирующая устойчивость к используемым противогрибковым препаратам [7–11]. Патология, вызываемая грибковой флорой, обусловлена двумя морфологическими группами микромицетов – нитчатыми грибами и дрожжами. Основным патогеном в случае поражения, вызванного дрожжевыми грибами, являются грибы рода Candida, и в частности – C. albicans [10–13].
Поиск новых органических соединений, обладающих противогрибковой активностью, которые могут быть в последствии рекомендованы в качестве субстанций для создания оригинальных препаратов, является важным направлением фармации и медицины, привлекающим различных исследователей [14–23].
Целью настоящей работы является разработка методологии поиска соединений с противогрибковой активностью – потенциальных лекарственных средств для лечения микозов.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Исследовали продукты органического синтеза, полученные сотрудниками ФГБОУ ВО ПГФА: осуществлен скрининг 1043 соединений, распределенных на 11 групп, 68 рядов; эталонные (типовые) штаммы дрожжевых грибов рода Candida: C. albicans NCTC 885-653, C. tropicalis РКПГY-1513/784, C. krusei РКПГY-1472/310, C. glabrata РКПГY-1485/47, полученные из Российской коллекции патогенных грибов (г. Санкт-Петербург); а также клинические штаммы Candida spp., выделенные от пациентов клиник г. Перми – 79 изолятов, в том числе: C. albicans – 72 штамма, C. non-albicans – 7 штаммов (C. krusei – 5, C. tropicalis – 1, C. glabrata – 1). Для оценки свойств исследуемых штаммов Candida spp. была изучена устойчивость к 5 наиболее часто используемым антифунгальным препаратам, выявлено 38 изолятов, устойчивых к 2 и более антимикотикам, из них 16 устойчивых к 3 и более антимикотикам, 8 – к 4 и более антимикотикам.
Для изучения ПГА использовали микрометод двукратных серийных разведений [24] с использование среды Сабуро. Микробная нагрузка в опыте составила около 2–5 × 105 КОЕ/мл [25–27]. Положительным контролем служила питательная среда с внесенной исследуемой культурой. Отрицательный контроль – интактная питательная среда. Посевы выдерживали в термостате при температуре 35 ± 2 °C 22–24 часа. Оценку полученных результатов проводили визуально. За МПК (MIC) принимали минимальную концентрацию вещества, при которой отсутствовал видимый рост тест-штамма. Исследования осуществляли в двух повторах. Соединения с МПК 125–1000 мкг/мл, оценивались как имеющие низкую антифунгальную активность; 15,6–62,5 мкг/мл – среднюю ПГА. Вещества с МПК 7,8 мкг/мл и менее считались перспективными для углубленного исследования [24].
Острая токсичность (ЛД50, мг/кг) соединений оценивалась путем внутрибрюшинного и перорального введения изучаемых веществ [24]. ЛД50 рассчитывали согласно требованиям государственного фармакологического комитета по изучению общетоксического действия биологически активных веществ [28].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
В ходе скрининга соединений, которые могут обладать противогрибковой активностью, были выявлены девять перспективных химических рядов (МПК 7,8 мкг/мл и менее), которые содержат 27 соединений. При проведении дополнительных исследований этих веществ в отношении типовых штаммов C. non-albicans выявлено 20 соединений с МПК 7,8 мкг/мл и менее в отношении двух и более тест-микроорганизмов. В дальнейшем они были исследованы в отношении 28–40 клинических штаммов Candida spp.в планктоне. Учитывая, что популяция циркулирующих микромицетов является разнородной по чувствительности, были установлены кумулятивные показатели МПК50 и МПК90. Полученные результаты представлены в таблице 1. Кроме того, были получены аналогичные усредненные показатели для флуконазола – препарата, который использовался в качестве сравнения: МПК50 –3,0 мкг/мл, МПК90 –31,2 мкг/мл, доля штаммов с МПК ≤ 2 мг/л – 47,5 %.
Табл. 1. Распределение популяции изученных клинических штаммов Candida spp. по значениям МПК исследованных соединений
Table 1. Population distribution of the studied clinical isolates of Candida spp. according to the MIC values of the studied compounds
Соединение/МПК, мкг/мл | Количество штаммов Candida spp | ||||||||||
3а | 3б | 3в | 3г | 3д | 3е | 3ж | 8а | 11а | 11б | Флуконазол | |
250 | 3 | ||||||||||
125 | 2 | 1 | |||||||||
62,5 | 3 | 6 | 3 | 1 | |||||||
31,2 | 3 | 2 | 4 | 4 | 1 | 7 | 6 | 9 | 6 | ||
15,6 | 6 | 13 | 11 | 14 | 8 | 14 | 10 | 6 | 8 | 2 | 2 |
7,8 | 16 | 11 | 17 | 9 | 19 | 19 | 4 | 5 | 10 | 7 | 3 |
3,9 | 10 | 6 | 11 | 7 | 6 | 6 | 1 | 6 | 4 | 11 | 6 |
2,0 | 3 | 8 | 1 | 5 | 2 | 4 | 1 | 4 | 9 | 5 | |
1,0 | 2 | 1 | 1 | 2 | 3 | 1 | 8 | 6 | |||
0,5 | 1 | 6 | 1 | 1 | 8 | ||||||
0,25 | 3 | 1 | 2 | 2 | |||||||
итого | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
МПК50 | 7,8 | 7,8 | 7,8 | 7,8 | 7,8 | 7,8 | 15,6 | 3,9 | 7,8 | 2,0 | 2,0 |
МПК90 | 15,6 | 15,6 | 15,6 | 15,6 | 15,6 | 15,6 | 125 | 31,2 | 31,2 | 7,8 | 31,2 |
% штаммов с МПК ≤ 2 мкг/мл | 12,5 | 20,0 | 2,5 | 15,0 | 7,5 | 0 | 25 | 42,5 | 15,0 | 50,0 | 52,5 |
Соединение/МПК, мкг/мл | 6а | 6б | 6в | 6г | 6д | 6е | 14а | 14б | 14в | 14г | Флуконазол |
125 | 3 | 5 | 2 | ||||||||
62,5 | 3 | 3 | 3 | 5 | 3 | 1 | 1 | 2 | |||
31,2 | 9 | 4 | 3 | 5 | 5 | 1 | 0 | 4 | 9 | 9 | 6 |
15,6 | 4 | 1 | 2 | 4 | 4 | 1 | 14 | 2 | 4 | 6 | 3 |
7,8 | 2 | 5 | 1 | 0 | 3 | 14 | 21 | 3 | 3 | 2 | 4 |
3,9 | 4 | 3 | 4 | 6 | 3 | 15 | 5 | 7 | 1 | 1 | 6 |
2,0 | 6 | 10 | 6 | 11 | 9 | 3 | 10 | 6 | 3 | 6 | |
1,0 | 3 | 1 | 5 | 1 | 6 | 1 | 12 | 4 | 6 | 5 | |
0,5 | 1 | 7 | 6 | 1 | 3 | 2 | 2 | 5 | |||
0,25 | 5 | 1 | 13 | 9 | 2 | 0 | 1 | ||||
итого | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 28 | 28 | 40 |
МПК50 | 7,8 | 3,9 | 1,0 | 2,0 | 2,0 | 7,8 | 7,8 | 2,0 | 7,8 | 3,9 | 3,9 |
МПК90 | 62,5 | 62,5 | 15,6 | 31,2 | 62,5 | 31,2 | 15,6 | 15,6 | 31,2 | 31,2 | 31,2 |
% штаммов с МПК ≤2 мкг/мл | 37,2 | 47,5 | 70,0 | 57,5 | 50,0 | 3,5 | 0 | 60 | 35,7 | 32,1 | 42,5 |
Установлены 3 соединения-лидера: соединение 6в – серебряная соль пиразол-3-карбоксамида с МПК50 – 1,0 мг/л, МПК90 – 15,6 мкг/мл, долей штаммов с МПК ≤ 2 мкг/мл – 70,0 %; соединение 11б – дибромпроизводное 4,5-дгидрофуран-3-карбоновой кислоты с МПК50 – 2,0 мкг/ л, МПК90 – 7,8 мкг/мл, долей штаммов с МПК ≤ 2 мкг/мл – 50,0 %; соединение 14б – бромированный (гет)ариламид 4-(гет)арил-2,4-диоксобутановых кислот с МПК50 – 2,0 мкг/мл, МПК90 – 15,6 мкг/мл, долей штаммов с МПК ≤ 2 мкг/мл – 60,0 %.
Результаты определения острой токсичности и отношение МПК к токсичности (ЛД50) изучаемых соединений представлены в таблице 2. Изученные соединения имеют низкую острую токсичность и относятся к 4 классу опасности [29–31]. Диапазон отношения МПК к токсичности у этих веществ составил 0,007–0,015, что свидетельствует об их высокой фармакологической эффективности. Оптимальным отношением МПК/ЛД50 обладают соединения 14б и 11б, данный показатель в 3,5 раза ниже аналогичного значения флуконазола.
Табл. 2. Острая токсичность и отношение МПК к острой токсичности соединений-лидеров
Table 2. Acute toxicity and ratio of mic to acute toxicity of leading compounds
Соединение | ЛД50, мг/кг | МПК/ЛД50 |
6в | >1000 | 0,015 |
11б | >1100 | 0,007 |
14б | 2190 (1300–3000), внутрибрюшинно | 0,007 |
Флуконазол | 1273* | 0,024 |
* – литературные данные [32].
При сравнении активности лидирующих соединений в отношении клинических штаммов Candida spp., устойчивых к двум или более антимикотикам, было обнаружено, что соединение 6в является более эффективным в ингибировании роста этих штаммов, чем флуконазол в 44,4–100 % случаев (рис. 1.). Аналогичные результаты были получены при изучении антифунгального действия исследуемых соединений на клинические штаммы Candida non-albicans, которые являются серьезной проблемой в практике здравоохранения: соединение 6в оказало наиболее сильное воздействие на рост этих микромицетов.
Рис. 1. Эффективность соединений-лидеров в отношении антимикотикорезистентных штаммов Candida spp. и Candida non-albicans в сопоставлении с флуконазолом, %
Fig. 1. Efficacy of the leading compounds against antimycotic-resistant strains of Candida spp. and Candida non-albicans compared with fluconazole, %
Также была изучена противогрибковая активность трех лидирующих соединений на модели биопленки в отношении высоковирулентных клинических штаммов, обладающих высокой способностью к биопленкообразованию. Анализ результатов показал, что соединение 6в имеет наименьшее значение sMIC50 (подавление 50 % роста популяции микроорганизмов, находящихся в биопленке), соединение 14б – наименьшее значение sMIC80 (угнетение роста 80 % микроорганизмов, присутствующих в биопленке), превышающих эффект флуконазола в 7,1–15,1 раз.
На основе полученных результатов разработана методология поиска соединений с антифунгальной активностью среди продуктов органического синтеза, которая включает использование совокупности теоретических, физико-химических и биологических методов.
Первый этап предполагает выбор биологических и химических объектов исследования. Опираясь на литературные данные о распространенности и этиологической значимости определенного возбудителя микозов (принадлежность к определенному роду), типу строения таллома гриба (дрожжевые, мицелиальные) осуществляется выбор патогена.
Реализация подхода работы с химическими объектами предполагает возможность изменения химической структуры молекул с описанной антифунгальной активностью (как зарегистрированных лекарственных средств-антимикотиков, так и описанных в литературе соединений с ПГА) с целью улучшения фармакокинетических и фармакодинамических свойств, либо получение новых соединений. Во всех случаях рекомендуется базовые принципы:
- Использование данных о связи химической структуры соединений и их антифунгальной активности, что позволит улучшить эффективность соединений за счет введения определенных фармакофорных групп.
- Применение методов компьютерного прогнозирования, таких как QSAR моделирование, которые могут использоваться для предположения наличия антифунгальной активности соединений. При наличии данных о противогрибковой, антибактериальной, антиинфекционной активности соединений, вероятность экспериментального подтверждения ПГА увеличивается. При отсутствии соответствующих прогнозов проведение экспериментальных скрининговых исследований не исключается, если они не были осуществлены в отношении родственных химических структур.
- Применение in silico методов для анализа предполагаемой биологической доступности новых веществ исходя из требований, предъявляемых к биологически активным малым молекулам, опираясь на основные значимые физико-химические параметры (молекулярный вес, липофильность, ТPSA и др.).
Второй этап – получение предполагаемых соединений методами органического синтеза с подтверждением химической структуры.
Третий этап – изучение противогрибковой активности и острой токсичности полученных соединений с использованием предложенного алгоритма:
- Изучение антифунгального эффекта нового вещества с подтвержденной химической структурой в планктонной культуре на тест-штамме C. albicans в двойной повторности. При МПК >7,8 мкг/мл исследования завершить; при МПК ≤7,8 мкг/мл перейти к этапу 2.1.
2.1. Изучение острой токсичности соединения. При принадлежности вещества к 1–2 классу токсичности исследования завершить; при принадлежности к 3–4 классу токсичности перейти к этапу 2.2.
2.2. Изучение ПГА нового соединения в планктонной культуре на других типовых штаммов грибов. При МПК ≤7,8 мкг/мл в отношении не менее 2 штаммов перейти к этапу 3.
3.1. Изучение ПГА в отношении клинических изолятов грибов, резистентных к часто применяемым антимикотикам, для выявления потенциальной значимости нового соединения, а также для определения кумулятивных показателей чувствительности популяции штаммов – МПК50 и МПК90.
3.2. Изучение ПГА на модели биопленки в условиях, приближенных к практической медицине.
3.3. Изучение синергизма с используемыми в медицине антимикотиками. При потенцировании действия применяемых антифунгальных средств можно рекомендовать сочетанное с ними применение данного соединения при лечении лекарственно-устойчивых микозов.
При положительных результатах исследований, а именно п. 3.1, 3.2 – превышение активности препарата сравнения, п. 3.3 – наличие синергизма, перейти к следующему этапу.
- Определение механизма действия методами in silico с использованием молекулярного докинга и экспериментальными методами in vitro.
Четвертый этап. Рекомендация для дальнейших доклинических исследований (изучение хронической токсичности, эмбриотоксичности, ПГА in vivo и др.).
Пятый этап. Выбор методик оценки качества для проведения стандартизации изученного соединения – потенциальной фармацевтической субстанции с антифунгальным эффектом.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Проведен масштабный скрининг 1043 соединений – продуктов органического синтеза на противогрибковую активность на типовом штамме C. albicans NCTC 885-653 в планктонной культуре.
В результате углубленных исследований высоко активных веществ на типовых и клинических штаммах Candida spp., в том числе в условиях биопленкообразования, выявлено 3 соединения-лидера, имеющих высокую противогрибковую активность (МПК50 – 1,0–2,0; МПК90 – 7,8–31,2), более эффективных, чем препарат сравнения флуконазол.
Предложена методология поиска соединений с ПГА среди продуктов органического синтеза, базирующаяся на применении теоретических, физико-химических, биологических методов. Разработан подход исследования антифунгальной активности у новых соединений с применением микробиологических методов, включающий скрининг на типовых штаммах дрожжевых грибов, углубленные исследования на клинических изолятах для определения кумулятивных показателей чувствительности популяции микроорганизмов, изучение ПГА соединений в условиях биопленкообразования.
Работа выполнена в рамках государственного задания ФГБОУ ВО ПГФА (тема № 720000Ф.99.1.БН62АБ05000), 2023 г.
Об авторах
Валентина Васильевна Новикова
Пермская государственная фармацевтическая академия Министерства здравоохранения Российской Федерации
Автор, ответственный за переписку.
Email: vvnperm@yandex.ru
д-р фармацевт. наук, доцент, заведующий кафедрой микробиологии
Россия, ПермьВладимир Леонидович Гейн
Пермская государственная фармацевтическая академия Министерства здравоохранения Российской Федерации
Email: geinvl48@mail.ru
д-р хим. наук, профессор, заведующий кафедрой общей и органической химии
Россия, ПермьОльга Васильевна Бобровская
Пермская государственная фармацевтическая академия Министерства здравоохранения Российской Федерации
Email: bobban@mail.ru
д-р фармацевт. наук, доцент, профессор кафедры фармацевтической химии
Россия, ПермьНаталья Алексеевна Пулина
Пермская государственная фармацевтическая академия Министерства здравоохранения Российской Федерации
Email: pulina.natalya@pfa.ru
д-р фармацевт. наук, профессор, заведующий кафедрой фармацевтической технологии
Россия, ПермьНазим Мусабекович Игидов
Пермская государственная фармацевтическая академия Министерства здравоохранения Российской Федерации
Email: igidov_nazim@mail.ru
д-р фармацевт. наук, профессор кафедры общей и органической химии
Россия, ПермьИрина Павловна Рудакова
Пермская государственная фармацевтическая академия Министерства здравоохранения Российской Федерации
Email: rudakova@pfa.ru
д-р мед. наук, доцент, заведующий кафедрой физиологии
Россия, ПермьСписок литературы
- The burden of serious fungal diseases in Russia / N. Klimko, Y. Kozlova, S. Khostelidi [et al.] // Mycoses. – 2015. T. 58. – C.8–62. doi: 10.1111/myc.12388.
- Denning, D. W. Global burden of recurrent vulvovaginal candidiasis: a systematic review / D. W. Denning, M Kneale., J. D. Sobel, R. Rautemaa-Richardson // The Lancet infectious diseases. – 2018. – V. 18. – №11. – P.:339–347. doi: 10.1016/S1473-3099(18)30103-8.
- A clinico-mycological spectrum of Superficial Mycoses of the scalp in the paediatric population / F. Zeeshan, F. Uddin, B. Khan [et al.] // Journal of Rawalpindi Medical College - 2020/ – V. 24. – №4. – Р.395-399. doi: 10.37939/jrmc.v24i4/1476.
- Кубанов, А. А. Итоги деятельности медицинских организаций, оказывающих медицинскую помощь по профилю дерматовенерология, в 2020 году: работа в условиях пандемии. / А. А Кубанов, Е. В. Богданова // Вестник дерматологии и венерологии. – 2021. – T. 97. – №4. – С. 8–32. doi: 10.25208/vdv1261.
- Tackling the emerging threat of antifungal resistance to human health / M. C. Fisher, А.. Alastruey-Izquierdo, J. Berman [et al.] // Nature Reviews Microbiology. – 2022. – Т. 20. – №9. С.:557-571. doi: 10.1038/s41579-022-00720-1.
- Threats posed by the fungal kingdom to humans, wildlife, and agriculture / M. C. Fisher, S. J. Gurr, C. A. Cuomo [et al.] // ASM Journals. MBio. – 2020. – V.11. – №3. – Р.e00449-20. doi: 10.1128/mBio.00449-20.
- Малова, И. О. Современные особенности клинического течения урогенитального кандидоза и анализ антимикотической чувствительности грибов рода Candida / И. О. Малова, Ю. А. Кузнецова. // Вестник дерматологии и венерологии. – 2015. – №. 2. – С. 68–75.
- Арутюнян, Н. С. Кандидозные вульвовагиниты у женщин в период беременности / Н. С. Арутюнян, А. А. Мкртчян, П. С. Агафонов. // Проблемы медицинской микологии. – 2015. – Т. 17, № 2. – С. 40.
- Biofilms formed by isolates from recurrent vulvovaginal candidiasis patients are heterogeneous and insensitive to fluconazole / L. Sherry, R. Kean, E. McKloud [et al.]. // Antimicrobial agents and chemotherapy. – 2017. – Vol. 61, №. 9. – Р. 01065-17.
- Prevalence of Candida spp. in cervical-vaginal samples and the in vitro susceptibility of isolates / T. M. Brandolt, G. B. Klafke, C.V. Gonçalves [et al] // Brazilian journal of microbiology. – 2017. – V. 48. – №. 1. – С. 145–150.
- Межевитинова, Е. А. Применение флуконазола у женщин репродуктивного возраста с вульвовагинальным кандидозом / Е. А. Межевитинова, П. Р. Абакарова, Ш. М. Погосян. // Медицинский совет. – 2018. – №. 13. DOI: https://doi.org/10.21518/2079-701X-2018-13-96-102
- Новикова, В. В. Анализ видового состава и чувствительности клинических изолятов Сandida spp. к современным антимикотикам / В. В. Новикова, С. Г. Езов, А. И. Селиванова. // Медицинский альманах. – 2017. – Т. 47, № 2. – С. 138–141.
- Новикова, В. В. Видовой состав изолятов Сandida spp., выделенных из различных биоматериалов пациентов г. Перми / В.В. Новикова, Е. В. Косякова, М. В. Логинова // Вестник Пермской государственной фармацевтической академии. Научно-практическая конференция с международным участием «Актуальные проблемы химической безопасности в сфере фармацевтической и медицинской науки и практики», посвященная 50-летию кафедры токсикологической химии: Сборник материалов (14 - 15 декабря 2022 года) / отв. ред. В.Г. Лужанин. – Пермь, ПГФА, 2022. – Т. 29. – С.281–284
- Perfect, J. R. The antifungal pipeline: a reality check / J. R. Perfect. // Nature reviews Drug discovery. – 2017. – Vol. 16, №. 9. – Р. 603.
- A review on antibacterial, antiviral, and antifungal activity of curcumin / S. Zorofchian Moghadamtousi, H. A. Kadir, P. Hassandarvish [et al.] // BioMed research international. – 2014. – Т. 2014.
- Disulphide-reduced psoriasin is a human apoptosis-inducing broad-spectrum fungicide / K. Z. Hein, H. Takahashi, T. Tsumori [et al.]. // Proceedings of the National Academy of Sciences. – 2015. – Т. 112, №. 42. – С. 13039–13044.
- Кошевенко, А. С. Синтез и противогрибковая активность новых хлоридов 2-[(Z)-1-(3, 5-диарил-1, 3, 4-тиадиазол-2 (3 H)-илиден) метил]-3, 5-диарил-1, 3, 4-тиадиазол-3-ия / А. С. Кошевенко, И. П. Яковлев, В. Н. Юсковец [и др.]. // Химико-фармацевтический журнал. – 2017. – Т. 51, №. 6. – С. 18–20.
- Sphingolipids as targets for treatment of fungal infections / R. Rollin-Pinheiro, A. Singh, E. Barreto-Bergter, M. Del Poeta. // Future Medicinal Chemistry. – 2016. – Vol. 8, №. 12. – P. 1469–1484.
- ASP2397: a novel antifungal agent produced by Acremonium persicinum MF-347833 / I. Nakamura, S. Yoshimura, T. Masaki [et al.]. // The Journal of Antibiotics. – 2017. – Vol. 70, №. 1. – P. 45–51.
- Новикова, В.В. Поиск новых антимикотических средств: основные тенденции и проблемы / В.В. Новикова // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». – 2020/ – №1. С.75-81. doi: 10.21626/vestnik/2020-1/09.
- Синтез и противомикробная активность метил-4-арил-2-{4-[(4,6-диметилпиримидин-2-ил)сульфамоил]фениламино}-4-оксобут-2-еноатов и их серебряных солей / В. Л. Гейн, О. В. Бобровская, Е. А. Машкина [и др.]. // Журнал общей химии. – 2020. – Т. 90, № 5. – С. 723-729.
- Новикова, В. В. Противогрибковая активность новых производных 4-(гет)арил-2,4-диоксобутановых кислот / В. В. Новикова, Н. А. Пулина, Ф. В. Собин, К. В. Липатников // Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии. – 2020. – Т. 18, № 3. – С. 225-228. – doi: 10.17816/RCF183225-228.
- Новикова, В. В. Изучение противогрибковой активности нового бромпроизводного 4,5-дигидрофуран-3-карбоновой кислоты на модели биопленки / Новикова В. В., Иванов Д. В., Игидов Н. М. // Экспериментальная и клиническая фармакология. – 2023. – Т. 86. – № 2. - С. 14–17. doi: 10.30906/0869-2092-2023-86-2-14-17.
- Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Научный центр экспертизы средств медицинского применения Минздравсоцразвития России. Том Часть 1. – Москва : Гриф и К, 2012. – 944 с. – ISBN 978-5-8125-1466-3.
- EUCAST Definitive Document EDef 7.3.2: Method for the determination of broth dilution minimum inhibitory concentrations of antifungal agents for yeasts. Available at: sayt.: – URL: https://www.eucast.org/fileadmin/src/media/PDFs/EUCAST_files/AFST/Files/EUCAST_E_Def_7.3.2_Yeast_testing_definitive_revised_2020.pdf. (дата обращения 21.10.2022).
- Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам: клинические рекомендации [Электронный ресурс]. – 2021. – 225 с.: сайт. – URL: http://ww.antibiotic.ru/files/321/clrec-dsma2021.pdf. (дата обращения 24.12.2021).
- Новикова, В. В. Исследование новых продуктов органического синтеза на противогрибковую активность в отношении дрожжевых грибов: обоснование выбора условий испытаний / В. В. Новикова, Е. В. Якимова, А. Д. Горбушина // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2022;(3):105-112.
- Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств : утверждены 25.12.1997. // Вестник фармакопейного комитета. – 1998. – № 1. – С. 27-32.
- Измеров, Н. Ф. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии (справочник) / Н. Ф. Измеров, И. В. Саноцкий, К. К. Сидоров. – Москва : Медицина, 1977. – С. 196–197.
- ГОСТ 32419-2013. Классификация опасности химической продукции. Общие требования: национальный стандарт Российской Федерации : издание официальное : утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 22 ноября 2013 г. № 833-ст : введен впервые: дата введения 2014-08-01 / разработан ФГУП «ВНИЦСМВ». – Москва: Стандартинформ, 2014. – 25 c.
- IOI A. C. Согласованная на глобальном уровне система классификаций опасности и маркировки химической продукции (СГС). – Изд. 6-ое, пересмотр. – Нью-Йорк, Женева: Организация объединенных наций, 2015. – ST/SG 30/Rev. 6.
- National Library of Medicine. ChemIDplus [Электронный ресурс]. Bethesda, 1994.: sajt. – URL: https://chem.nlm.nih.gov/chemidplus/name/fluconazole (дата обращения: 10.10.2021).
Дополнительные файлы
