Email this article 
Candidiasis: the problem of finding new etiotropic drugs among organic synthesis products
- Authors: Novikova V.V.1, Gein V.L.1, Bobrovskaya O.V.1, Pulina N.A.1, Igidov N.M.1, Rudakova I.P.1
-
Affiliations:
- Perm State Pharmaceutical Academy of the Ministry of Health of the Russian Federation
- Issue: Vol 5, No 1 (2023)
- Pages: 10-19
- Section: Pharmaceutical Sciences
- URL: https://journals.eco-vector.com/PharmForm/article/view/409374
- DOI: https://doi.org/10.17816/phf409374
- ID: 409374
Cite item
Full Text
Abstract
1043 compounds - products of organic synthesis were screened for antifungal activity on the type strain C. albicans NCTC 885-653 in planktonic culture. In-depth studies of substances with high activity against typical strains of Candida spp. and clinical isolates to identify lead compounds, including on a biofilm model were done. 3 substances were identified that exhibit high antifungal activity (MIC50 - 1.0-2.0; MIC90 - 7.8-31.2), exceeding the effect of the reference drug fluconazole. Thus, representatives of new chemical groups with antifungal activity were identified. A methodology has been developed for searching for compounds with antifungal activity among products of organic synthesis, based on the use of a combination of theoretical, physicochemical, and biological methods. An algorithm for the early stages of preclinical studies of the presence of antifungal activity in newly synthesized compounds using microbiological methods is proposed. It including screening studies for typical strains of yeast micromycetes, in-depth studies of clinical isolates to study the cumulative indicators of sensitivity of a population of strains, and determination of the antifungal activity of compounds on a biofilm model.
Keywords
Full Text
СОКРАЩЕНИЯ:
МПК – Минимальная подавляющая концентрация; ПГА – противогрибковая активность.
ВВЕДЕНИЕ
Грибковые инфекции, включающие поверхностные и глубокие микозы, являются распространённой патологией и важной составляющей инфекционной заболеваемости [1–5]. Так по данным исследователей смертность от микозов достигает 1,3–1,5 млн случаев в год, и сравнима с летальностью от туберкулеза, ВИЧ-инфекции [1, 6]. К высокой частоте этой группы заболеваний приводят предрасполагающие факторы, такие как использование гормональных контрацептивов, антибиотикотерапия, метаболические нарушения, врожденные и приобретенные иммунодефициты. Кроме того, росту данной группы инфекций способствует прогрессирующая устойчивость к используемым противогрибковым препаратам [7–11]. Патология, вызываемая грибковой флорой, обусловлена двумя морфологическими группами микромицетов – нитчатыми грибами и дрожжами. Основным патогеном в случае поражения, вызванного дрожжевыми грибами, являются грибы рода Candida, и в частности – C. albicans [10–13].
Поиск новых органических соединений, обладающих противогрибковой активностью, которые могут быть в последствии рекомендованы в качестве субстанций для создания оригинальных препаратов, является важным направлением фармации и медицины, привлекающим различных исследователей [14–23].
Целью настоящей работы является разработка методологии поиска соединений с противогрибковой активностью – потенциальных лекарственных средств для лечения микозов.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Исследовали продукты органического синтеза, полученные сотрудниками ФГБОУ ВО ПГФА: осуществлен скрининг 1043 соединений, распределенных на 11 групп, 68 рядов; эталонные (типовые) штаммы дрожжевых грибов рода Candida: C. albicans NCTC 885-653, C. tropicalis РКПГY-1513/784, C. krusei РКПГY-1472/310, C. glabrata РКПГY-1485/47, полученные из Российской коллекции патогенных грибов (г. Санкт-Петербург); а также клинические штаммы Candida spp., выделенные от пациентов клиник г. Перми – 79 изолятов, в том числе: C. albicans – 72 штамма, C. non-albicans – 7 штаммов (C. krusei – 5, C. tropicalis – 1, C. glabrata – 1). Для оценки свойств исследуемых штаммов Candida spp. была изучена устойчивость к 5 наиболее часто используемым антифунгальным препаратам, выявлено 38 изолятов, устойчивых к 2 и более антимикотикам, из них 16 устойчивых к 3 и более антимикотикам, 8 – к 4 и более антимикотикам.
Для изучения ПГА использовали микрометод двукратных серийных разведений [24] с использование среды Сабуро. Микробная нагрузка в опыте составила около 2–5 × 105 КОЕ/мл [25–27]. Положительным контролем служила питательная среда с внесенной исследуемой культурой. Отрицательный контроль – интактная питательная среда. Посевы выдерживали в термостате при температуре 35 ± 2 °C 22–24 часа. Оценку полученных результатов проводили визуально. За МПК (MIC) принимали минимальную концентрацию вещества, при которой отсутствовал видимый рост тест-штамма. Исследования осуществляли в двух повторах. Соединения с МПК 125–1000 мкг/мл, оценивались как имеющие низкую антифунгальную активность; 15,6–62,5 мкг/мл – среднюю ПГА. Вещества с МПК 7,8 мкг/мл и менее считались перспективными для углубленного исследования [24].
Острая токсичность (ЛД50, мг/кг) соединений оценивалась путем внутрибрюшинного и перорального введения изучаемых веществ [24]. ЛД50 рассчитывали согласно требованиям государственного фармакологического комитета по изучению общетоксического действия биологически активных веществ [28].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
В ходе скрининга соединений, которые могут обладать противогрибковой активностью, были выявлены девять перспективных химических рядов (МПК 7,8 мкг/мл и менее), которые содержат 27 соединений. При проведении дополнительных исследований этих веществ в отношении типовых штаммов C. non-albicans выявлено 20 соединений с МПК 7,8 мкг/мл и менее в отношении двух и более тест-микроорганизмов. В дальнейшем они были исследованы в отношении 28–40 клинических штаммов Candida spp.в планктоне. Учитывая, что популяция циркулирующих микромицетов является разнородной по чувствительности, были установлены кумулятивные показатели МПК50 и МПК90. Полученные результаты представлены в таблице 1. Кроме того, были получены аналогичные усредненные показатели для флуконазола – препарата, который использовался в качестве сравнения: МПК50 –3,0 мкг/мл, МПК90 –31,2 мкг/мл, доля штаммов с МПК ≤ 2 мг/л – 47,5 %.
Табл. 1. Распределение популяции изученных клинических штаммов Candida spp. по значениям МПК исследованных соединений
Table 1. Population distribution of the studied clinical isolates of Candida spp. according to the MIC values of the studied compounds
Соединение/МПК, мкг/мл | Количество штаммов Candida spp | ||||||||||
3а | 3б | 3в | 3г | 3д | 3е | 3ж | 8а | 11а | 11б | Флуконазол | |
250 | 3 | ||||||||||
125 | 2 | 1 | |||||||||
62,5 | 3 | 6 | 3 | 1 | |||||||
31,2 | 3 | 2 | 4 | 4 | 1 | 7 | 6 | 9 | 6 | ||
15,6 | 6 | 13 | 11 | 14 | 8 | 14 | 10 | 6 | 8 | 2 | 2 |
7,8 | 16 | 11 | 17 | 9 | 19 | 19 | 4 | 5 | 10 | 7 | 3 |
3,9 | 10 | 6 | 11 | 7 | 6 | 6 | 1 | 6 | 4 | 11 | 6 |
2,0 | 3 | 8 | 1 | 5 | 2 | 4 | 1 | 4 | 9 | 5 | |
1,0 | 2 | 1 | 1 | 2 | 3 | 1 | 8 | 6 | |||
0,5 | 1 | 6 | 1 | 1 | 8 | ||||||
0,25 | 3 | 1 | 2 | 2 | |||||||
итого | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
МПК50 | 7,8 | 7,8 | 7,8 | 7,8 | 7,8 | 7,8 | 15,6 | 3,9 | 7,8 | 2,0 | 2,0 |
МПК90 | 15,6 | 15,6 | 15,6 | 15,6 | 15,6 | 15,6 | 125 | 31,2 | 31,2 | 7,8 | 31,2 |
% штаммов с МПК ≤ 2 мкг/мл | 12,5 | 20,0 | 2,5 | 15,0 | 7,5 | 0 | 25 | 42,5 | 15,0 | 50,0 | 52,5 |
Соединение/МПК, мкг/мл | 6а | 6б | 6в | 6г | 6д | 6е | 14а | 14б | 14в | 14г | Флуконазол |
125 | 3 | 5 | 2 | ||||||||
62,5 | 3 | 3 | 3 | 5 | 3 | 1 | 1 | 2 | |||
31,2 | 9 | 4 | 3 | 5 | 5 | 1 | 0 | 4 | 9 | 9 | 6 |
15,6 | 4 | 1 | 2 | 4 | 4 | 1 | 14 | 2 | 4 | 6 | 3 |
7,8 | 2 | 5 | 1 | 0 | 3 | 14 | 21 | 3 | 3 | 2 | 4 |
3,9 | 4 | 3 | 4 | 6 | 3 | 15 | 5 | 7 | 1 | 1 | 6 |
2,0 | 6 | 10 | 6 | 11 | 9 | 3 | 10 | 6 | 3 | 6 | |
1,0 | 3 | 1 | 5 | 1 | 6 | 1 | 12 | 4 | 6 | 5 | |
0,5 | 1 | 7 | 6 | 1 | 3 | 2 | 2 | 5 | |||
0,25 | 5 | 1 | 13 | 9 | 2 | 0 | 1 | ||||
итого | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 28 | 28 | 40 |
МПК50 | 7,8 | 3,9 | 1,0 | 2,0 | 2,0 | 7,8 | 7,8 | 2,0 | 7,8 | 3,9 | 3,9 |
МПК90 | 62,5 | 62,5 | 15,6 | 31,2 | 62,5 | 31,2 | 15,6 | 15,6 | 31,2 | 31,2 | 31,2 |
% штаммов с МПК ≤2 мкг/мл | 37,2 | 47,5 | 70,0 | 57,5 | 50,0 | 3,5 | 0 | 60 | 35,7 | 32,1 | 42,5 |
Установлены 3 соединения-лидера: соединение 6в – серебряная соль пиразол-3-карбоксамида с МПК50 – 1,0 мг/л, МПК90 – 15,6 мкг/мл, долей штаммов с МПК ≤ 2 мкг/мл – 70,0 %; соединение 11б – дибромпроизводное 4,5-дгидрофуран-3-карбоновой кислоты с МПК50 – 2,0 мкг/ л, МПК90 – 7,8 мкг/мл, долей штаммов с МПК ≤ 2 мкг/мл – 50,0 %; соединение 14б – бромированный (гет)ариламид 4-(гет)арил-2,4-диоксобутановых кислот с МПК50 – 2,0 мкг/мл, МПК90 – 15,6 мкг/мл, долей штаммов с МПК ≤ 2 мкг/мл – 60,0 %.
Результаты определения острой токсичности и отношение МПК к токсичности (ЛД50) изучаемых соединений представлены в таблице 2. Изученные соединения имеют низкую острую токсичность и относятся к 4 классу опасности [29–31]. Диапазон отношения МПК к токсичности у этих веществ составил 0,007–0,015, что свидетельствует об их высокой фармакологической эффективности. Оптимальным отношением МПК/ЛД50 обладают соединения 14б и 11б, данный показатель в 3,5 раза ниже аналогичного значения флуконазола.
Табл. 2. Острая токсичность и отношение МПК к острой токсичности соединений-лидеров
Table 2. Acute toxicity and ratio of mic to acute toxicity of leading compounds
Соединение | ЛД50, мг/кг | МПК/ЛД50 |
6в | >1000 | 0,015 |
11б | >1100 | 0,007 |
14б | 2190 (1300–3000), внутрибрюшинно | 0,007 |
Флуконазол | 1273* | 0,024 |
* – литературные данные [32].
При сравнении активности лидирующих соединений в отношении клинических штаммов Candida spp., устойчивых к двум или более антимикотикам, было обнаружено, что соединение 6в является более эффективным в ингибировании роста этих штаммов, чем флуконазол в 44,4–100 % случаев (рис. 1.). Аналогичные результаты были получены при изучении антифунгального действия исследуемых соединений на клинические штаммы Candida non-albicans, которые являются серьезной проблемой в практике здравоохранения: соединение 6в оказало наиболее сильное воздействие на рост этих микромицетов.
Рис. 1. Эффективность соединений-лидеров в отношении антимикотикорезистентных штаммов Candida spp. и Candida non-albicans в сопоставлении с флуконазолом, %
Fig. 1. Efficacy of the leading compounds against antimycotic-resistant strains of Candida spp. and Candida non-albicans compared with fluconazole, %
Также была изучена противогрибковая активность трех лидирующих соединений на модели биопленки в отношении высоковирулентных клинических штаммов, обладающих высокой способностью к биопленкообразованию. Анализ результатов показал, что соединение 6в имеет наименьшее значение sMIC50 (подавление 50 % роста популяции микроорганизмов, находящихся в биопленке), соединение 14б – наименьшее значение sMIC80 (угнетение роста 80 % микроорганизмов, присутствующих в биопленке), превышающих эффект флуконазола в 7,1–15,1 раз.
На основе полученных результатов разработана методология поиска соединений с антифунгальной активностью среди продуктов органического синтеза, которая включает использование совокупности теоретических, физико-химических и биологических методов.
Первый этап предполагает выбор биологических и химических объектов исследования. Опираясь на литературные данные о распространенности и этиологической значимости определенного возбудителя микозов (принадлежность к определенному роду), типу строения таллома гриба (дрожжевые, мицелиальные) осуществляется выбор патогена.
Реализация подхода работы с химическими объектами предполагает возможность изменения химической структуры молекул с описанной антифунгальной активностью (как зарегистрированных лекарственных средств-антимикотиков, так и описанных в литературе соединений с ПГА) с целью улучшения фармакокинетических и фармакодинамических свойств, либо получение новых соединений. Во всех случаях рекомендуется базовые принципы:
- Использование данных о связи химической структуры соединений и их антифунгальной активности, что позволит улучшить эффективность соединений за счет введения определенных фармакофорных групп.
- Применение методов компьютерного прогнозирования, таких как QSAR моделирование, которые могут использоваться для предположения наличия антифунгальной активности соединений. При наличии данных о противогрибковой, антибактериальной, антиинфекционной активности соединений, вероятность экспериментального подтверждения ПГА увеличивается. При отсутствии соответствующих прогнозов проведение экспериментальных скрининговых исследований не исключается, если они не были осуществлены в отношении родственных химических структур.
- Применение in silico методов для анализа предполагаемой биологической доступности новых веществ исходя из требований, предъявляемых к биологически активным малым молекулам, опираясь на основные значимые физико-химические параметры (молекулярный вес, липофильность, ТPSA и др.).
Второй этап – получение предполагаемых соединений методами органического синтеза с подтверждением химической структуры.
Третий этап – изучение противогрибковой активности и острой токсичности полученных соединений с использованием предложенного алгоритма:
- Изучение антифунгального эффекта нового вещества с подтвержденной химической структурой в планктонной культуре на тест-штамме C. albicans в двойной повторности. При МПК >7,8 мкг/мл исследования завершить; при МПК ≤7,8 мкг/мл перейти к этапу 2.1.
2.1. Изучение острой токсичности соединения. При принадлежности вещества к 1–2 классу токсичности исследования завершить; при принадлежности к 3–4 классу токсичности перейти к этапу 2.2.
2.2. Изучение ПГА нового соединения в планктонной культуре на других типовых штаммов грибов. При МПК ≤7,8 мкг/мл в отношении не менее 2 штаммов перейти к этапу 3.
3.1. Изучение ПГА в отношении клинических изолятов грибов, резистентных к часто применяемым антимикотикам, для выявления потенциальной значимости нового соединения, а также для определения кумулятивных показателей чувствительности популяции штаммов – МПК50 и МПК90.
3.2. Изучение ПГА на модели биопленки в условиях, приближенных к практической медицине.
3.3. Изучение синергизма с используемыми в медицине антимикотиками. При потенцировании действия применяемых антифунгальных средств можно рекомендовать сочетанное с ними применение данного соединения при лечении лекарственно-устойчивых микозов.
При положительных результатах исследований, а именно п. 3.1, 3.2 – превышение активности препарата сравнения, п. 3.3 – наличие синергизма, перейти к следующему этапу.
- Определение механизма действия методами in silico с использованием молекулярного докинга и экспериментальными методами in vitro.
Четвертый этап. Рекомендация для дальнейших доклинических исследований (изучение хронической токсичности, эмбриотоксичности, ПГА in vivo и др.).
Пятый этап. Выбор методик оценки качества для проведения стандартизации изученного соединения – потенциальной фармацевтической субстанции с антифунгальным эффектом.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Проведен масштабный скрининг 1043 соединений – продуктов органического синтеза на противогрибковую активность на типовом штамме C. albicans NCTC 885-653 в планктонной культуре.
В результате углубленных исследований высоко активных веществ на типовых и клинических штаммах Candida spp., в том числе в условиях биопленкообразования, выявлено 3 соединения-лидера, имеющих высокую противогрибковую активность (МПК50 – 1,0–2,0; МПК90 – 7,8–31,2), более эффективных, чем препарат сравнения флуконазол.
Предложена методология поиска соединений с ПГА среди продуктов органического синтеза, базирующаяся на применении теоретических, физико-химических, биологических методов. Разработан подход исследования антифунгальной активности у новых соединений с применением микробиологических методов, включающий скрининг на типовых штаммах дрожжевых грибов, углубленные исследования на клинических изолятах для определения кумулятивных показателей чувствительности популяции микроорганизмов, изучение ПГА соединений в условиях биопленкообразования.
Работа выполнена в рамках государственного задания ФГБОУ ВО ПГФА (тема № 720000Ф.99.1.БН62АБ05000), 2023 г.
About the authors
Valentina V. Novikova
Perm State Pharmaceutical Academy of the Ministry of Health of the Russian Federation
Author for correspondence.
Email: vvnperm@yandex.ru
Doctor of Pharmacy, Associate Professor, Head of the Department of Microbiology
Russian Federation, PermVladimir L. Gein
Perm State Pharmaceutical Academy of the Ministry of Health of the Russian Federation
Email: geinvl48@mail.ru
Doctor of Chemical Sciences, Professor, Head of the Department of General and Organic Chemistry
Russian Federation, PermOlga V. Bobrovskaya
Perm State Pharmaceutical Academy of the Ministry of Health of the Russian Federation
Email: bobban@mail.ru
Doctor of Pharmacy, Associate Professor, Professor of the Department of Pharmaceutical Chemistry
Russian Federation, PermNatalia A. Pulina
Perm State Pharmaceutical Academy of the Ministry of Health of the Russian Federation
Email: pulina.natalya@pfa.ru
Doctor of Pharmacy, Professor, Head of the Department of Pharmaceutical Technology
Russian Federation, PermNazim M. Igidov
Perm State Pharmaceutical Academy of the Ministry of Health of the Russian Federation
Email: igidov_nazim@mail.ru
Doctor of Pharmacy, Professor of the Department of General and Organic Chemistry
Russian Federation, PermIrina P. Rudakova
Perm State Pharmaceutical Academy of the Ministry of Health of the Russian Federation
Email: rudakova@pfa.ru
Doctor of Medical Sciences, Associate Professor, Head of the Department of Physiology
Russian Federation, PermReferences
- The burden of serious fungal diseases in Russia / N. Klimko, Y. Kozlova, S. Khostelidi [et al.] // Mycoses. – 2015. T. 58. – C.8-62. doi: 10.1111/myc.12388.
- Denning, D. W. Global burden of recurrent vulvovaginal candidiasis: a systematic review / D. W. Denning, M Kneale., J. D. Sobel, R. Rautemaa-Richardson // The Lancet infectious diseases. – 2018. – V. 18. – №11. – P.:339-347. doi: 10.1016/S1473-3099(18)30103-8.
- A clinico-mycological spectrum of Superficial Mycoses of the scalp in the paediatric population / F. Zeeshan, F. Uddin, B. Khan [et al.] // Journal of Rawalpindi Medical College - 2020/ – V. 24. – №4. – Р.395-399. doi: 10.37939/jrmc.v24i4/1476.
- Kubanov, A. A. The results of the activities of medical organizations providing medical care in the field of dermatovenereology in 2020: work in a pandemic / A. A. Kubanov, E. V. Bogdanova // Bulletin of Dermatology and Venereology. – 2021. – T. 97, No. 4. – S. 8-32. – doi: 10.25208/vdv1261. (In Russ.).
- Tackling the emerging threat of antifungal resistance to human health / M. C. Fisher, А.. Alastruey-Izquierdo, J. Berman [et al.] // Nature Reviews Microbiology. – 2022. – Т. 20. – №9. С.:557-571. doi: 10.1038/s41579-022-00720-1.
- Threats posed by the fungal kingdom to humans, wildlife, and agriculture / M. C. Fisher, S. J. Gurr, C. A. Cuomo [et al.] // ASM Journals. MBio. – 2020. – V.11. - №3. – Р.e00449-20. doi: 10.1128/mBio.00449-20.
- Malova, I. O. Modern features of the clinical course of urogenital candidiasis and analysis of antimycotic sensitivity of fungi of the genus Candida / I. O. Malova, Yu. A. Kuznetsova // Bulletin of Dermatology and Venereology. – 2015. – No. 2. – S. 68–75. (In Russ.).
- Arutjunjan, N. S. Kandidoznye vul'vovaginity u zhenshhin v period beremennosti / N. S. Arutjunjan, A. A. Mkrtchjan, P. S. Agafonov. // Problemy medicinskoj mikologii. – 2015. – T. 17, № 2. – S. 40. (In Russ.).
- Biofilms formed by isolates from recurrent vulvovaginal candidiasis patients are heterogeneous and insensitive to fluconazole / L. Sherry, R. Kean, E. McKloud [et al.]. // Antimicrobial agents and chemotherapy. – 2017. – Vol. 61, №. 9. – Р. 01065-17.
- Prevalence of Candida spp. in cervical-vaginal samples and the in vitro susceptibility of isolates / T. M. Brandolt, G. B. Klafke, C.V. Gonçalves [et al] // Brazilian journal of microbiology. – 2017. – V. 48. – №. 1. – С. 145–150.
- Mezhevitinova E.A., Abakarova P.R., Pogosyan S.M. Use of fluconazole in women of reproductive age with vulvovaginal candidiasis. Meditsinskiy sovet = Medical Council. 2018;(13):96-102. DOI: https://doi.org/10.21518/2079-701X-2018-13-96-102. (In Russ.).
- Novikova, VV Analysis of the species composition and sensitivity of clinical isolates of Candida spp. to modern antimycotics / V. V. Novikova, S. G. Ezov, A. I. Selivanova // Medical Almanac. – 2017. – No. 2 (47). – S. 138–141. (In Russ.).
- Novikova, V. V. Vidovoj sostav izoljatov Sandida spp., vydelennyh iz razlichnyh biomaterialov pacientov g. Permi / V.V. Novikova, E. V. Kosjakova, M. V. Loginova // Vestnik Permskoj gosudarstvennoj farmacevticheskoj akademii. Nauchno-prakticheskaja konferencija s mezhdunarodnym uchastiem «Aktual'nye problemy himicheskoj bezopasnosti v sfere farmacevticheskoj i medicinskoj nauki i praktiki», posvjashhennaja 50-letiju kafedry toksikologicheskoj himii: Sbornik materialov (14 - 15 dekabrja 2022 goda) / otv. red. V.G. Luzhanin. – Perm', PGFA, 2022. – T. 29. – S.281–284. (In Russ.).
- Perfect, J. R. The antifungal pipeline: a reality check / J. R. Perfect. // Nature reviews Drug discovery. – 2017. – Vol. 16, №. 9. – Р. 603.
- A review on antibacterial, antiviral, and antifungal activity of curcumin / S. Zorofchian Moghadamtousi, H. A. Kadir, P. Hassandarvish [et al.] // BioMed research international. – 2014. – Т. 2014.
- Disulphide-reduced psoriasin is a human apoptosis-inducing broad-spectrum fungicide / K. Z. Hein, H. Takahashi, T. Tsumori [et al.]. // Proceedings of the National Academy of Sciences. – 2015. – Т. 112, №. 42. – С. 13039-13044.
- Koshevenko, A. S. Synthesis and antifungal activity of new chlorides ,4-thiadiazol-3-ium / A. S. Koshevenko, I. P. Yakovlev, V. N. Yuskovets [et al.] // Chemical-pharmaceutical journal. - 2017. - T. 51, No. 6. - S. 18-20. (In Russ.).
- Sphingolipids as targets for treatment of fungal infections / R. Rollin-Pinheiro, A. Singh, E. Barreto-Bergter, M. Del Poeta. // Future Medicinal Chemistry. – 2016. – Vol. 8, №. 12. – P. 1469-1484.
- ASP2397: a novel antifungal agent produced by Acremonium persicinum MF-347833 / I. Nakamura, S. Yoshimura, T. Masaki [et al.]. // The Journal of Antibiotics. – 2017. – Vol. 70, №. 1. – P. 45-51.
- Novikova, V. V. Search for new antimycotic agents: main trends and problems / V. V. Novikova // Kursk Scientific and Practical Bulletin Man and his health. – 2020. – No. 1. – P. 75–81. – doi: 10.21626/vestnik/2020-1/09. (In Russ.).
- Synthesis and antimicrobial activity of methyl 4-aryl-2-{4-[(4,6-dimethylpyrimidin2-yl)sulfamoyl]phenylamino}-4-oxobut-2-enoates and their silver salts / V. L. Gein, O. V. Bobrovskaya, E. A. Mashkina [et al.] // Journal of General Chemistry. – 2020. – T. 90, No. 5. – S. 723-729. – doi: 10.31857/S0044460X20050108. (In Russ.).
- Antifungal activity of new derivatives of 4-(het)aryl-2,4-dioxobutanoic acids / V. V. Novikova, N. A. Pulina, F. V. Sobin, K. V. Lipatnikov // Reviews of clinical pharmacology and drug therapy . – 2020. – T. 18, No. 3. – S. 225-228. – doi: 10.17816/RCF183225-228. (In Russ.).
- Novikova, V. V. Studying the antifungal activity of a new bromo derivative of 4,5-dihydrofuran-3-carboxylic acid on a biofilm model / V. V. Novikova, D. V. Ivanov, N. M. Igidov // Experimental and Clinical Pharmacology. – 2023. – T. 86, No. 2. - S. 14-17. – doi: 10.30906/0869-2092-2023-86-2-14-17. (In Russ.).
- Guidelines for conducting preclinical studies of medicines / Scientific Center for Expertise of Medicinal Products of the Ministry of Health and Social Development of Russia. Volume Part 1. - Moscow: Grif and K, 2012. - 944 p. – ISBN 978-5-8125-1466-3. (In Russ.).
- EUCAST Definitive Document EDef 7.3.2: Method for the determination of broth dilution minimum inhibitory concentrations of antifungal agents for yeasts. Available at: https://www.eucast.org/fileadmin/src/media/PDFs/EUCAST_files/AFST/Files/EUCAST_E_Def_7.3.2_Yeast_testing_definitive_revised_2020.pdf.
- Opredelenie chuvstvitel'nosti mikroorganizmov k antimikrobnym preparatam. Klinicheskie rekomendacii, 2021, 225 s. Rezhim dostupa: http:// ww.antibiotic.ru/files/321/clrec-dsma2021.pdf. (In Russ.).
- Novikova, V.V., Yakimova, E.V., Gorbushina, A.D. Investigation of new products of organic synthesis for antifungal activity against yeast fungi: substantiation of the choice of test conditions. Bulletin of the Voronezh State University. Series: Chemistry. Biology. Pharmacy. - 2022. – No. 3. – P. 105–112. (In Russ.).
- Metodicheskie rekomendacii po izucheniju obshhetoksicheskogo dejstvija farmakologicheskih sredstv : utverzhdeny 25.12.1997. // Vestnik farmakopejnogo komiteta. – 1998. – № 1. – S. 27–32. (In Russ.).
- Izmerov, N. F. Parametry toksikometrii promyshlennyh jadov pri odnokratnom vozdejstvii (spravochnik) / N. F. Izmerov, I. V. Sanockij, K. K. Sidorov. – Moskva : Medicina, 1977. – S. 196-197. (In Russ.).
- GOST 32419-2013. Klassifikacija opasnosti himicheskoj produkcii. Obshhie trebovanija: nacional'nyj standart Rossijskoj Federacii : izdanie oficial'noe : utverzhden i vveden v dejstvie Prikazom Federal'nogo agentstva po tehnicheskomu regulirovaniju i metrologii ot 22 nojabrja 2013 g. № 833-st : vveden vpervye: data vvedenija 2014-08-01 / razrabotan FGUP «VNICSMV». – Moskva: Standartinform, 2014. – 25 c. (In Russ.).
- IOI A. C. Soglasovannaja na global'nom urovne sistema klassifikacij opasnosti i markirovki himicheskoj produkcii (SGS). – Izd. 6-oe, peresmotr. – N'ju-Jork, Zheneva: Organizacija ob#edinennyh nacij, 2015. – ST/SG 30/Rev. 6.
- National Library of Medicine. ChemIDplus. Bethesda, 1994.: sajt. – URL: https://chem.nlm.nih.gov/chemidplus/name/fluconazole
Supplementary files
