Влияние локального и системного введения L-тироксина на скорость регенерации и секрецию цитокинов на модели экспериментальной ожоговой раны
- Авторы: Минченко А.А., Хасанов А.Р., Бунтовская А.С., Полосков А.И., Трандина А.Е., Кокорина А.А., Овасенов К.Б., Мавренков Э.М., Глушаков Р.И.
- Раздел: Оригинальные исследования
- Статья получена: 05.12.2024
- Статья одобрена: 20.06.2025
- Статья опубликована: 30.06.2025
- URL: https://journals.eco-vector.com/RCF/article/view/642593
- DOI: https://doi.org/10.17816/RCF642593
- ID: 642593
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Цель — исследовать системное и топическое влияние L-тироксина на течение раневого процесса на экспериментальной модели глубоких ожоговых ран.
Материалы и методы. В опытах на 74 белых нелинейных крысах-самцах массой 220–257г исследовали влияние медикаментозно измененного тиреоидного статуса и гидрогеля с тироксином в концентрации 10мкг/мл на течение экспериментального термического ожога кожи IIIB степени. Животные были рандомизированы на 3 опытных и 2 группы сравнения: Ia - cистемный гипертиреоз Ib - локальный гипертиреоз, II - cистемный пропилтиоурациловый гипотиреоз, IIIa - положительный контроль (мазь «Левомеколь»), IIIb - интактный контроль. Термический ожог, соответствующий IIIВ степени, наносили в области проксимальной части спины под общим наркозом при помощи термоаппликатора с плоской рабочей частью в форме круга диаметром 20мм. Через 72ч после нанесения ожога рану освобождали от струпа полным его иссечением по границе с неповрежденной кожей с наложением шинирующего кольца, после чего в Ib и IIIa группах аппликацию исследуемых лекарственных средств. На 10-е сутки после нанесения ожога в ран. Площадь ожоговой раны оценивали в динамике с использованием программы Universal Desktop Ruler.
Результаты. Медианы времени 50% эпителизации в группах системного и локального гипертиреоза составили 20 и 21 дней и были достоверно меньше интактного контроля. Медианы времени 75% эпителизации ран во всех экспериментальных группах достоверно отличались от обеих контрольных групп: в группах системного и локального гипертиреоза составила 29,5, 30,2±0,9 и 33,3±0,45 дней соответственно, при этом медиана времени до 75% эпителизации в группе ПТУ-индуцированного гипотиреоза не достигнута. Уровни ИНФ-γ, DEFa1, TGFb1, FGF2 в раневом отделяемом в группе системного гипертиреоза и уровни FGF2 и ИНФ-γ в группе локального гипертиреоза были статистически значимо повышены в сравнении с обеими контрольными группами. В группе ПТУ-индуцированного гипотиреоза, напротив, уровни FGF2 и ИНФ-γ демонстрировали статистически значимое снижение в сравнении с контрольными группами.
Заключение. Системное гипертиреоз и аппликации тироксин-содержащего геля на раневую поверхность приводит к ускорению «естественного течения раневого процесса». Тиреоидные гормоны демонстрируют дозозависимые эффекты в отношении секреции FGF2 и ИНФ-γ.
Ключевые слова
Полный текст
АКТУАЛЬНОСТЬ
Тиреоидные гормоны (ТГ) являются одними из ключевых регуляторов клеточных процессов, включая клеточную пролиферацию и дифференцировку, клеточный метаболизм, при этом реализация данных механизмов осуществляется через геномные и негеномные механизмы [1]. Стимуляция ядерных рецепторов приводит к изменению профилей экспрессии более 100 генов, из которых более половины является тканеспецифичными [2]. Негеномные механизмы реализуются через стимуляцию L-тироксином (Т4), в меньшей степени, через прямым (Т3) и реверсивным (rТ3) трийодтиронином, специфических сайтов связывания, расположенных на интегрине αvβ3 (CD51/CD61), что приводит в дозозависимой манере к активации сигнальных путей митоген-активируемой протеин-киназы (MAPK) с включением сигнального пути RAS/RAF/MEK/ERK, а также фосфатидилинозитол-3-киназами (PI3K) и серин/треониновой протеинкиназы (STK ) [3]. Если для злокачественных новообразований избыточные концентрации ТГ приводят к опухолевой прогрессии за счет негеномно реализуемых эффектов, приводящим к активации клеточной пролиферации, ангиогенеза и инициации иммуномодулирующих эффектов, связанных с изменением секреции про- и противовоспалительных цитокинов [4, 5], то роль ТГ в регенерации и пролиферации как неизмененных, так и поврежденных тканей не достаточно изучена [6]. Совокупность накопленных теоретических данных о внутриклеточных и тканевых эффектах йодотиронинов делает возможным их потенциальное применение в качестве универсальных регуляторов клеточной пролиферации и ангиогенеза для лечения ран кожи различной этиологии [7]. Однако данные о применении гормонов ЩЖ находятся на этапе накопления научных знаний, в частности, данный тезис касается топического применения йодотиронинов.
Цель исследования – исследовать системное и топическое влияние L-тироксина на течение раневого процесса на экспериментальной модели глубоких ожоговых ран.
Материалы и методы
Общий дизайн экспериментального исследования.
Выполнены экспериментальные наблюдения, оценивающие влияния лекарственно измененного тиреоидного статуса и топического влияния L-тироксина на течение раневого процесса в эксперименте. Эксперимент проводили на белых нелинейных крысах-самцах массой 184-246 г. (n=65), полученных из ФГУП «Питомник лабораторных животных «Рапполово» (Рапполово, Ленинградская область, РФ).
После получения из питомника крыс содержали в условиях карантине, длительность которого составила не менее 14 суток. В течение карантина проводили осмотр каждого животного (поведение и общее состояние) дважды в день (в утренние и вечерние часы). Лабораторные животные с подозрением на любое заболевание и/или имеющие изменения в поведении исключались из исследования в течение карантина.
Таблица 1. Характеристика исследуемых групп лабораторных животных
Table 1. Characteristics of the studied groups of laboratory animals
Группа | Название группы | Кол-во лабораторных | Описание группы | Описание метода | Кратность введение |
Ia | Системный гипертиреоз | 18 | Индукция медикаментозного гипертиреоза средней степени тяжести | Внутрибрюшинное введение препарата в дозе 100 мкг/100 г массы животного | 1 раз в сутки |
Ib | Локальный гипертиреоз | 18 | Создание повышенных концентраций L-тироксина в области раны | Аппликация 1 мл геля с L-тироксином в концентрации 10 мкг/мл | 1 раз в сутки на раневую поверхность |
II | Системный гипотиреоз | 18 | Индукция лекарственного гипертиреоза средней степени | Замена воды в поилке на раствор 0,1% пропилтиоурацила | ad libidum |
IIIa | Положительный контроль | 10 | Местное лечение раны стандартным препаратом | Аппликация раны 1,0 г мазью «Левомеколь» | 1 раз в стуки |
IIIb | Интактный контроль | 10 | Ведение раны открытым способом без применения лекарственных средств | - | - |
Содержание животных, формирование опытных групп и рандоминизация.
Лабораторные животные (n=74) содержались в стандартных условиях вивария в 4-х местных клетках, где каждое животное было отделено от других особей перфорированной перегородкой, что обеспечивало коммуникации между экспериментальными животными и уменьшало стресс изоляции. Каждое лабораторное животное имело доступ к воде и пище ad libidum. Лабораторные животные после нанесения экспериментального ожога были разделены с помощью генератора случайных чисел на 5 экспериментальных групп в соотношении 1,8:1,0 по основным и группам сравнения соответственно (Таблица 1). Животным Ia группы индуцирован cистемный гипертиреоз, Ib группа (локальный гипертиреоз) получала аппликации тироксин-содержащем гелем, на II группе лабораторных животных воспроизведена модель cистемный пропилтиоурациловый гипотиреоз путем замены воды в поилке на раствор 0,1% пропилтиоурацила (ПТУ), животные IIIa группы служили положительным контролем и получали аппликации мазью «Левомеколь», IIIb служила интактным контролем (Табл. 1).
Фармакологические субстанции
В исследовании использовались субстанции L-тироксина и ПТУ (Табл. 2), при этом раствор тироксина вводили внутрибрюшинно после ежедневного взвешивания лабораторного животного. Гидрогель с тироксином изготавливали путем перемешивания раствора тироксина с натриевой солью карбоксиметилцеллюлозы (Na-КМЦ) до концентрации 10 мкг/мл. Группа положительного контроля получала аппликации мазью «Левомеколь». Для чистоты эксперимента и создания одинакового стрессового воздействия все группы лабораторных животных кроме системного гипертиреоза получали ежедневные инъекцию с 0,2 мл физиологического раствора.
Таблица 2. Фармакологические субстанции, используемые в исследовании
Table 2. Pharmacological substances used in the study
Наименование субстанции | Международное непатентованное название | Фирма-производитель | Страна-производитель |
L-тироксин | 2-амино-3-[4-(4-гидрокси-3,5-дийодфенокси)-3,5-дийодфенил] пропионовая кислота | РУП «Белмедпрепараты» | Республика Беларусь |
Пропилтиоурацил | 2,3-дигидро-6-пропил-2-тиоксо-4(1Н)-пиримидинон | Wuhan Hezhong Bio-Chemical Manufacture Co., Ltd | КНР |
Моделирование термического ожога
Термический ожог наносили по ранее описанной методике [8] в области проксимальной части спины, чтобы лабораторные животные не имели возможности контакта мордой и лапами с раневой поверхностью. За 4 дня до нанесения раны в области нанесения термического ожога выстригали шерсть и проводили депиляцию предназначенным для этого кремом в течение 15 минут По истечении указанного времени крем с шерстью удаляли с поверхности кожи, кожу в данной области промывали теплой водой, промокали бумажным полотенцем и давали обсохнуть. Подготовку области ожоговой травмы завершали нанесением на кожу метки для обозначения центра будущего места приложения термоаппликатора. Процедуру ожога кожи крысам выполняли под общей анестезией препаратами Золетил®100 в сочетании с 0,01% раствором клонидина в соотношении 2:1. После наступления фазы глубокого сна у животных. В качестве инструмента для нанесения термического ожога крысам использовали цилиндрический стальной аппликатор массой 835 г с плоской рабочей частью в форме круга диаметром 20 мм, что обеспечивало площадь раневой поверхность 100π, т.е. 314±5 мм2. Нагрев аппликатора до постоянной температуры перед воздействием на животное проводили путем полного погружения кипящую воду (температура 98-100°С) на 2 минуты. Продолжительность времени аппликации с кожей лабораторного животного составляла 30 секунд. По истечении указанного времени аппликатор удаляли. Через 72 часа после нанесения ожога рану освобождали от струпа полным его иссечением по границе с неповрежденной кожей. После иссечения струпа кожу вокруг раны прошивали хирургической нитью с оставлением концов нити свободными. Внутрь (по периметру) раневого дефекта устанавливали шину в форме кольца высотой 4 мм, внутренним диаметром 25 мм, наружным диаметром 26,5 мм, которую фиксировали путем пришивания шовным материалом.
Шинирующее кольцо сверху закрывали пластырной наклейкой, которую фиксировали по краям кольца, что позволяло минимизировать контаминацию и снизить потерю препарата при местном нанесении. Наложение шины предупреждало эффект контракции раны и сохранение ее постоянного размера для лучшей объективной оценки исследуемого и сравниваемого препарата.
Наблюдение за лабораторными животными
Для объективизации данных на всех основных этапах эксперимента проводили фотофиксацию состояния ран с использованием масштабной линейки для последующего расчета их площади. Для определения площади ран использовали программу Universal Desktop Ruler, позволяющую определять геометрические параметры раны по фотографии, с предварительной калибровкой точности измерения по отраженной на фотографии масштабной линейке. В качестве критериев полного заживления раны в данном эксперименте служила динамика эпителизации поверхности раны.
Иммуноферментный анализ
Для исследования резорбции и тиреоидного статуса при системном лекарственно индуцируемом измененном тиреоидном статусе и использовании гидрогелей с йодотиронинами исследовали уровни ТТГ в сыворотке крови, для чего забор крови проводили во время декапитации. Использовали тест-систему Вектор-Бест.
Определение уровней гамма-интерферона (ИНФ-γ), дефенсин альфа 1 (DEFa1), трансформирующий фактор роста β-1 (TGFb1), фактора роста фибробластов 2 (FGF2) в раневом отделяемом выполняли с использованием метода ELISA (Иммуноферментного анализа) с помощью реактивов фирмы Cloud-Clone Corporation (США) согласно инструкции. Забор материала производили на 10-е сутки после нанесения раны методом абсорбция раневого отделяемого с помощью стерильных бумажных штифтов, которые помещались на рану в течение 60 сек., после чего пробы помещались в стерильные пробирки с физиологически раствором на 45 мин. Определение выполнялось на многофункциональном планшетном анализаторе Victor X5 (PerkinElmer Inc., США).
Этические правила и нормы.
Работа проведена в соответствии с этическими принципами, установленными Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей (принятой в Страсбурге 18.03.1986 г. и подтвержденной в Страсбурге 15.06.2006 г.) и одобрена Локальным этическим комитетом.
Статистическая обработка.
Методы описательной статистики включали общепринятые методы описательной статистики с учетом статистики малых групп включали в себя как среднее значение с оценкой стандартной ошибки среднего (SE) и стандартного отклонения (SD), так и медиана признака с определением верхнего и нижнего квартилей (25%- и 75% перцентиля), при этом определялся вариант распределения признака в группе: нормальное и отличное от нормального. Распределение признака в группах определяли на основании метода Т.У. Андерсона и Д.А. Дарлинга. С учетом особенностей распределения признака группы в каждом эксперименте сравнивали по U-критерий Манна – Уитни. Для сравнения динамики эпителизации ран лабораторных животных использовали метод Е.Л. Каплана и П. Мейера, при этом при построении кривой в каждой конкретной временной точке демонстрировал средний уровень оставшейся раневой поверхности в данный период времени от 100% в день начала эксперимента до 0% при полной эпителизации, при этом рассчитывали медиану времени до 25%, 50% и 75% эпителизации с определением стандартной ошибки– по формуле Гринвуда, анализ динамики эпителизации в зависимости от распределения признака проводился– по тесту Мантела – Кокса (Log-ranktest) или тесту Гехана – Бреслоу– Вилкоксона. Критический уровень значимости нулевой статистической гипотезы (об отсутствии значимых различий или факторных влияний) принимали равным 0,05.
Результаты
Установлено, что индукция гипертиреоидного состояния и/или аппликация водорастворимого геля с L-тироксином (см. таблицу 3) приводило к достоверному ускорению времени эпителизации. С другой стороны, медикаментозно индуцированный гипотиреоз приводил к значимому замедлению времени эпителизации.
При измерении динамики эпителизации ожоговых ран было установлено, что медианы времени 50%-эпителизации раны в группах, которые получали системное или локальное введение йодотионинов, составили 20 (19;21,5) и 21 (18; 22) дней и достоверно отличались от интактного контроля. Время 75% эпителизации достоверное отличалась во всех экспериментальных группах как от группы интактного контроля, так и от группы сравнения, при этом если в Ia и Ib группах время 75% эпителизации составила 29,5 (28;32) и 30,2±0,9 дней, то в группе индуцированного гипотиреоза время 75% эпителизации не достигнуто (Табл. 3).
Таблица 3. Динамика эпителизации ран в течение эксперимента
Table 3. Dynamics of wound healing during the experiment
Интегральные показатели заживления ран | Группы лабораторных животных | ||||
гипертиреоз | системный гипотиреоз | группы сравнения | |||
Ia группа (системный гипертиреоз) | Ib группа (локальный гипертиреоз) | II группа | IIIa группа (Левомеколь) | IIIb группа интактный контроль | |
Время 25% эпителизации ран, сут. | 10 (9,5; 11,0) | 12,9±0,3 | 15 (13;16,5) | 13,2±0,4 | 14,6±0,3 |
Время 50% эпителизации ран, сут. | 20 (19;21,5) * | 21 (18; 22)* | 29,5 (26; 32,5) | 23,5±0,6* | 28,1±0,7 |
Время 75% эпителизации ран | 29,5 (28;32) † | 30,2±0,9 † | не достигнуто† | 32,5 (29;35)* | 36 (34; 37) |
Примечание: * - достоверное отличие от интактного контроля, † - достоверное отличие от стандарта лечения (IIIa группы) |
При исследовании тиреоидного статуса по уровню ТТГ и Т4 полученные данные точно отражали системный гипо- и гипертиреоз в соответствии с современными представлениями о гормональной регуляции, при этом уровни ТТГ и Т4 в крови лабораторных животных при топической аппликации тироксин-содержащих гелей соответствовала условному эутиреозу и значимо не отличалась от уровня тиреоидных гормонов в IIIa и IIIb группах (Табл. 4).
Таблица 4. Уровни тиреоидных гормонов в последний день эксперимента
Table 4. Thyroid hormone levels on the last day of the experiment
Исследуемые гормоны | Группы лабораторных животных | |||||
гипертиреоз | системный гипотиреоз | контроль | ||||
Ia группа (системный гипертиреоз) | Ib группа (локальный гипертиреоз) | II группа | IIIa группа (Левомеколь) | IIIb группа интактный контроль | ||
ТТГ, мМЕ/л | среднее | 0,33±0,07♭ | 1,53±0,13♭ | 6,09±0,6 | 1,67±0,29♭ | 1,74±0,2 |
медиана | 0,27 (0,14;0,34) | 1,39 (1,13;1,72) ♮‡ | 5,82 (4,16;6,92)*♮†‡ | 1,37 (1,13; 1,84) | 1,58 (1,32; 2,12) | |
Т4, нмоль/л | среднее | 97,98±2,86 | 75,19±2,51 | 56,19±2,99 | 77,64±0,2,81 | 74,88±2,77 |
медиана | 98,15 (87,58;108,83) *♮†‡ | 81,93 (87,58;108,83) ♮‡ | 64,26 (49,05;64,26) *♮†‡ | 79,24 (69,45;86,5) | 75,92 (66,84;82,8) | |
Примечание: ♭ - нормальное распределение признака; * - достоверное отличие от Ib группы; ♮ - достоверное отличие IIIa группы; † - достоверное отличие от интактного контроля, ‡ - достоверное отличие от системного гипотиреоза (IIa группы). |
Уровни всех исследуемых цитокинов и DEFa1 в раневом отделяемом на 10-е сутки эксперимента были статистически значимо повышены в группе системного гипертиреоза в сравнении с обеими контрольными группами. В то же время при локальном применении тироксин-содержащего геля в концентрации 10 мкг/мл статистически значимое повышение уровней было установлено только для FGF2 и ИНФ-γ. В группе ПТУ-индуцированного гипотиреоза, напротив, уровни FGF2 и ИНФ-γ демонстрировали статистически значимое снижение в сравнении с контрольными группами, что косвенно подчеркивает дозозависимые эффекты йодотиронинов в регуляции экспрессии FGF2 и ИНФ-γ (Табл. 5).
Таблица 5. Уровни исследуемых цитокинов и дефензина альфа-1 у лабораторных животных
Table 5. Levels of cytokines and defensin alpha-1 in wound fluid in laboratory animals
Исследуемые цитокины, пг/мл | Группы лабораторных животных | |||||
гипертиреоз | системный гипотиреоз | контроль | ||||
Ia группа (системный гипертиреоз) | Ib группа (локальный гипертиреоз) | II группа | IIIa группа (Левомеколь) | IIIb группа интактный контроль | ||
FGF2 | среднее | 29,24±3,12 | 29,9±1,88 | 15,51±1,16 | 21,57±2,36 | 23,13±2,07 |
медиана | 27,25‡♮† (17,43; 40,45) | 28,5‡♮† (23,2; 36,2) | 16,04† (10,86; 18,54) | 20,86 (16,49; 24,37) | 21,93 (18,99; 28,49) | |
TGFb1 | среднее | 5,76±0,62 | 5,31±0,66 | 4,64±0,64 | 4,89±0,73 | 4,33±0,72 |
медиана | 5,56† (3,59; 7,65) | 4,51 (3,03; 8,15) | 4,97 (2,46; 6,48) | 4,24 (2,87; 7,73) | 4,41 (2,46; 6,13) | |
DEFa1 | среднее | 0,61±0,08 | 0,53±0,08 | 0,41±0,06 | 0,42±0,09♭ | 0,35±0,03 |
медиана | 0,67†‡ (0,26; 0,85) | 0,48 (0,23; 0,83) | 0,42 (0,19; 0,63) | 0,35 (0,23; 0,69) | 0,37 (0,26; 0,4) | |
ИНФ-γ | среднее | 60,58±3,74 | 61,38±3,75 | 37,87±3,99 | 49,22±5,76 | 49,25±4,54 |
медиана | 61,16‡♮† (55,49; 71,67) | 64,08‡♮† (49,77; 71,23) | 37,69♮ (30,67; 49,58) | 50,89 (33,25; 66,86) | 48,08 (42,85; 56,98) | |
Примечание: ♭ - нормальное распределение признака; ♮ - достоверное отличие IIIa группы; † - достоверное отличие от интактного контроля, ‡ - достоверное отличие от системного гипотиреоза (IIa группы). |
Обсуждение результатов
Роль ТГ в регенерации тканей и раневом процессе находится на этапе накопления научных знаний, однако полученные данные позволяют постулировать, что йодотиронины демонстрируют провоспалительные и иммуномодулирующие эффекты [9], которые заключаются с одной стороны в снижении цитотоксичности иммунокомпетентных клеток, с другой стороны в повышении экспрессии провоспалительных цитокинов [10, 11]. Прежде всего это касается IFN-γ, TNF-α и IL-6, в меньшей степени ‒ CXCL9, -10, -11, интелейкинов-21, -23, 37 [12]. Выбор цитокинов и дефензина альфа-1 был определен ролью данных биологически активных субстанций в регенерации ран, при этом в нашем исследовании ИНФ-γ был выбран в качестве референсного показателя, так как значительное количество данных подтверждают повышение экспрессии данного цитокина при системном гипертиреозе [9]. Однако по данным нашего исследования если лекарственно-индуцированный гипертиреоз приводил к повышению секреции всех исследуемых цитокинов и DEFa1, то локальное введение йодотиронина – только к повышению ИНФ-γ и FGF2.
В нашем исследовании получено сокращение времени «естественного течения раневого процесса» (natural history of wound healing) при лекарственном модулировании системного гипертиреоза и при топической аппликации тироксин-содержащего геля, в то же время лекарственная индукция ПТУ-индуцированного гипотиреоза приводила к увеличению времени эпителизации раны, что является одни из экспериментальных доказательств возможности локального применения йодотиронин-содержащих наружных лекарственных средств [7].
К настоящему времени имеются единичные данные об экспериментальном использовании йодотиронин-импрегнированных раневых покрытий и шовного материала, при этом продемонстрирована прежде всего прорегенераторная и проангиогенная активность натуральных йодотиронинов. Пропитанные раствором T4 (1 мкг/мл) хлопковые раневые повязки, продемонстрировали высокую эффективность при заживлении кожных ран у лабораторных животных. Полная эпителизация неглубоких механических ран диаметром 20 мм была достигнута в течение 23 дней [13]. В экспериментальном исследовании применение гидрогелей на комбинированной основе, состоящей из хитозана, карбоксиметилцеллюлозы и гидроксиапатита при разных концентрациями T4: 0,1 мкг/мл, 0,5 мкг/мл и 1 мкг/мл, - на модели мембраны хориоаллантойса куриного эмбриона было продемонстрировано, что гидрогели отличались проангиогеннуой активностью в дозозависимой манере с повышением концентрации Т4 [14]. На аналогичной модели было установлено, что поликапролактоновые волокна, импрегнированные Т3 имели высокий проангиогенный потенциал в месте аппликации. Также погружение данного материала в кольца аорты крыс проявлялось в усилении инвазивного потенциала эндотелиальных клеток и увеличении общей площади поперечных сечений капилляров [15].
Заключение
Наше исследование дополняет имеющиеся представления о роли ТГ в раневом процессе и их возможное применение для стимуляции регенерации. Индуцированный системный гипертиреоз и использование тироксин-содержащего гидрогеля в концентрации 10 мкг/мл усиливает заживление ожоговых ран в эксперименте. При системном гипертиреозе усиливается секреция всех исследуемых цитокинов, при аппликации тироксин-содержащего геля ‒ только секреция FGF2 и ИНФ-γ.
Об авторах
Александр Александрович Минченко
Email: minchenkoaleksandr@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-4180-4430
Артур Ришатович Хасанов
Email: khasartrish@yandex.ru
ORCID iD: 0009-0003-0763-7194
Александра Сергеевна Бунтовская
Email: sandrarebel@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-5816-9736
Антон Иванович Полосков
Email: a.i.poloskov@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-1877-7948
Александра Евгеньевна Трандина
Email: sasha-trandina@rambler.ru
ORCID iD: 0000-0003-1875-1059
Арина Александровна Кокорина
Email: el-kaa@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-6783-3088
Карэн Борисович Овасенов
Email: ovanesov2007@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-7325-8027
Эдуард Михайлович Мавренков
Email: Ehd-Mavrenkov@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-8040-3720
Руслан Иванович Глушаков
Автор, ответственный за переписку.
Email: glushakoffruslan@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-0161-5977
Список литературы
