БЕЗОПАСНОСТЬ УЛЬТРАФИОЛЕТОВОГО КРОССЛИНКИНГА СКЛЕРЫ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ IN VIVO

Полный текст

ВВЕДЕНИЕ Кросслинкинг - это образование дополнительных химических связей между макромолекулами, приводящее к увеличению прочности ткани. Уже более 10 лет данный метод успешно применяется для лечения кератэктазий [1, 2]. Высказываются предположения о перспективности использования кросслинкинга склеры с рибофлавином/ультрафиолетом А (UVA) при прогрессирующей близорукости. Так, в ряде экспериментальных работ было показано положительное влияние кросслинкинга на биомеханическую прочность склеральной ткани, замедление прогрессирования смоделированной близорукости [3, 4]. Однако ученые наблюдали и серьезный побочный эффект процедуры в виде повреждения сетчатки при высокой мощности ультрафиолетового излучения [5, 6]. Таким образом, актуальной является оценка безопасности процедуры кросслинкинга склеры. ЦЕЛЬ Оценить безопасность ультрафиолетового кросслинкинга склеры методом оптической когерентной томографии (ОКТ) в эксперименте in vivo. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Исследование проводили на 34 кроликах породы шиншилла (68 глаз) in vivo. На правых глазах выполняли процедуру кросслинкинга склеры с UVA, левые - служили контролем. Кросслинкинг склеры выполняли под внутримышечной анестезией препаратом «Ксилазин» 2% в дозе 0,2 мл/кг и местной анестезией 0,4% раствором оксибупрокаина («Инокаин»). После установки блефаростата проводили циркулярный разрез конъюнктивы и теноновой оболочки в паралимбальной зоне и отсепаровывали их от глазного яблока тупым путем. Верхнюю и наружную прямые мышцы глазного яблока брали на швы-держатели и открывали доступ к верхненаружному сектору глазного яблока. Выполняли насыщение склеры фотосенсибилизатором путем инстилляции 0,1% водного раствора рибофлавина мононуклеотида в течение 20 мин. Затем проводили облучение склеры ультрафиолетом А (длина волны 370 ± 5 нм, мощность излучения - 3 мВт/см²) в течение 6 циклов по 5 мин (суммарное время облучения - 30 мин). Между циклами дополнительно инстиллировали раствор фотосенсибилизатора (2-3 капли). Облучение проводили с помощью офтальмологического аппарата для УФ-кросслинкинга «УФалинк» (Россия). После завершения процедуры швы-держатели удаляли. На конъюнктивальный разрез накладывали несколько узловых швов 8/0. В послеоперационном периоде проводили местную антибактериальную и противовоспалительную терапию в течение 1 нед (0,5% раствор левофлоксацина и 0,1% раствор дексаметазона 3 раза в день). Состояние оболочек глазного яблока оценивали с помощью ОКТ до проведения ультрафиолетового кросслинкинга, через 1 сут, неделю и месяц после операции. После однократной умеренной седации (внутримышечное введение 2% раствора ксилазина гидрохлорида) кролика оборачивали в стерильную салфетку и фиксировали на руках. Далее животное подносили к подбороднику аппарата спектральной ОКТ высокого разрешения «DRI OCT Triton» в боковой позе, удобной для обследования. На каждом глазу выполняли по 3 последовательных снимка сетчатки в режиме «Macula Radial». Оценивали состояние слоев сетчатки, хориоидеи и склеры, а также проводили измерение их толщины. Статистическую обработку получаемых данных осуществляли с помощью пакета прикладных программ для персонального компьютера МС Exсel, а также Statistica 7.0. Математический анализ включал вычисление средних показателей (М), среднего квадратичного отклонения, стандартной ошибки средней величины (m), показателей достоверности по Стьюденту (р). За достоверную значимость принимали p < 0,05. РЕЗУЛЬТАТЫ Оптическая когерентная томография не выявила каких-либо патологических изменений после проведения ультрафиолетового кросслинкинга склеры. На снимках четко визуализировались слои сетчатки, хориоидея и склера (рис. 1). Результаты измерения толщины оболочек глаз представлены в табл. 1-3. При проведении статистической обработки полученных результатов не выявлено статистически значимой разницы между исследованными группами (p > 0,05). Таблица 1 Толщина сетчатки кроликов (мкм) по данным ОКТ (M ± m) Группа До операции 1 сут после операции 1 нед после операции 1 мес после операции SCXL (n = 15) 157,4 ± 7,3 152,2 ± 6,7 161,9 ± 5,7 153,8 ± 7,1 Контроль (n = 15) 149,1 ± 7,9 159,6 ± 7,2 157,5 ± 6,4 149,7 ± 6,8 Таблица 2 Толщина хориоидеи кроликов (мкм) по данным ОКТ (M ± m) Группа До операции 1 сут после операции 1 нед после операции 1 мес после операции SCXL (n = 15) 148,9 ± 7,4 152,9 ± 7,7 143,7 ± 7,6 153,1 ± 6,8 Контроль (n = 15) 154,4 ± 7,8 147,4 ± 6,9 149,4 ± 7,2 145,9 ± 7,9 Таблица 3 Толщина склеры кроликов (мкм) по данным ОКТ (M ± m) Группа До операции 1 сут после операции 1 нед после операции 1 мес после операции SCXL (n = 15) 282,1 ± 8,9 278,9 ± 9,7 291,6 ± 10,2 286,6 ± 9,4 Контроль (n = 15) 293,4 ± 9,3 287,2 ± 9,6 288,4 ± 9,1 292,4 ± 10,1 ЗАКЛЮЧЕНИЕ В эксперименте мы использовали UVA мощностью 3 мВт/см2 в течение 30 мин и водный раствор рибофлавина без содержания декстрана и не выявили серьезных побочных эффектов процедуры. Таким образом, при данных параметрах ультрафиолетовый кросслинкинг является безопасным для оболочек глаза в эксперименте in vivo. Дальнейшие исследования и разработка оптимального протокола позволят адаптировать кросслинкинг склеры для применения в клинике.

Об авторах

М М Бикбов

ГБУ «Уфимский НИИ глазных болезней Академии наук Республики Башкортостан»

г. Уфа, Россия

В К Суркова

ГБУ «Уфимский НИИ глазных болезней Академии наук Республики Башкортостан»

г. Уфа, Россия

Э Л Усубов

ГБУ «Уфимский НИИ глазных болезней Академии наук Республики Башкортостан»

г. Уфа, Россия

М Н Астрелин

ГБУ «Уфимский НИИ глазных болезней Академии наук Республики Башкортостан»

г. Уфа, Россия

Список литературы

Дополнительные файлы