Сравнение эффективности эпителизи-рующих веществ при экспериментальном ожоге роговицы

Аннотация

Произвели морфологическое сравнение регенераторных свойств на экспериментальном ожоге роговицы кролика. Лечение производили в основной группе экдистероном, в контрольной группе – актовегином. Выявлено ускорение эпителизации переднего эпителия роговицы при использовании экдистерона в сравнении с актовегином. В разные сроки наблюдения площадь дефекта эпителия при лечении экдистероном была достоверно меньше, чем в контрольной в 1,8 раз, что подтверждает гистологическое исследование.

Полный текст

При ожогах глаз страдают все отделы глаза, однако наибольшую тяжесть поражения получает роговица, в силу своей локализации она является наиболее уязвимым отделом глазного яблока [3]. С целью скорейшего заживления роговицы показано применение лекарственных препаратов, оказывающих положительное действие на репаративные процессы. К таким средствам относятся фитоэкдистероиды (ФЭС) [1, 2]. Цель исследования – сравнить регенераторное действие ФЭС при экспериментальных ожогах с общепризнанным эпителизирующим, регенераторным препаратом актовегин 20%. Материалы и методы Исследования были выполнены на 36 кроликах обоего пола, весом 2-2,5 кг. Были сформированы опытная группа – 18 животных (36 глаз), контрольная группа – 18 животных (36 глаз). Ожоги II степени вызывались аппликацией фильтровальной бумаги, смоченной 2,5% раствором гидрооксида натрия с экспозицией 5 секунд на роговицу. В опытной группе лечение включало ежедневные инстилляции (четыре раза в день) масляного раствора фитоэкдистероида экдистерон 0,01%, в контрольной группе лечение включало ежедневные инстилляции (четыре раза в день) глазного геля актовегин 20%, все кролики получали глазные капли ципромед 0,3%. Дефект роговицы определяли окрашиванием флюоресцеином с последующим расчетом площади дефекта на цифровых фотографиях компьютерной программой Photo-M. Фотографирование производили на 1, 3, 7, 14 сутки. Гистологическое исследование проводилось методом окрашивания срезов роговицы гематоксилин-эозином на 1, 3, 7, 14 дни. Результаты и их обсуждение В опытной группе (лечение масляным раствором ФЭС) гистологически через первые сутки преобладали явления структурного повреждения и экссудации. Ткань роговицы имела выраженные некротические изменения с небольшим эпителиальным покрытием в один слой кубических клеток. Волокна собственного слоя набухшие, расслоенные, клеточные элементы в нем отсутствовали, имелись и участки со слабой лейкоцитарной инфильтрацией с преобладанием эозинофилов. Так имелась картина тяжелых дистрофических и некротических изменений с тенденцией к расплавлению ткани, но уже с начинавшейся эпителизацией. На 3 сутки отмечалось во всех слоях роговицы активные регенераторные процессы при сохранении еще некротизации в центре. Роговица частично была покрыта активно пролиферирующим многослойным плоским неороговевающим эпителием, среди клеток которого определялись многочисленные фигуры митоза. В субэпителиальных участках собственного слоя – нейтрофильная инфильтрация, в остальных отделах – набухание волокон и пролиферация молодых элементов фибропластического ряда. Отмечалась выраженная активная регенерация эпителия, который покрывал роговицу на большом протяжении и состоял в основном из двух или трех слоев. К 7 имела место выраженная активная регенерация эпителия, который покрывал роговицу на большом протяжении и состоял в основном из трех или четырех слоев. В периферических отделах отмечалась интенсивная эозинофильная инфильтрация, пролиферация молодых клеток эпителия, который уже на значительном протяжении имел многослойное строение, в базальном слое закономерно определялись фигуры митоза. Регенерация эпителия отмечалась в ранние сроки. Отечность собственного слоя и инфильтрация уменьшались к 7 суткам наблюдения. На 14 сутки эпителизация распространялась мощным пластом, в субэпителиальных участках грануляционная ткань отсутствовала. В поверхностных отделах собственной ткани наблюдалась слабая инфильтрация эозинофилами. В группе контроля гистологически на первые сутки в роговице наблюдались выраженные некротические изменения, осложнённые воспалительной реакцией, инфильтрация собственного слоя лейкоцитами. Зона некроза с дефектом эпителия чётко обнаруживались на третьи сутки опыта. Четвертые сутки характеризовались тяжёлыми некротическими изменениями с явлениями расплавления тканей. В ряде случаев отмечалась слабая регенерация при наличии выраженных дистрофических изменений в поверхностных слоях собственного вещества. Роговица незначительно была покрыта пролиферирующим плоским неороговевающим эпителием, среди клеток которого определялись фигуры митоза. В субэпителиальных участках собственного слоя – нейтрофильная инфильтрация, в остальных отделах – набухание волокон и пролиферация молодых элементов фибропластического ряда. Отмечалась регенерация эпителия, который покрывал роговицу на большом протяжении и состоял в основном из одного слоя клеток. На 7 день в центральной части роговицы еще имелась зона некроза, но в периферических отделах уже отмечалась регенерация эпителия в виде пласта на значительном протяжении, состоящего из двух слоёв клеток, медленно переходящего в эпителий обычного строения. В подлежащем собственном слое отмечалась слабая пролиферация молодых элементов фибропластического ряда и потеря эозинофилии. По периферии же отмечалась регенерация многослойного плоского эпителия, переходящего в двуслойный. В этих участках в собственном слое – умеренная нейтрофильная инфильтрация и пролиферация фибропластических элементов. На 14 сутки в центре роговицы всё ещё имелся некротически измененный собственный слой, ближе к периферии был покрыт тонким пластом регенерирующего эпителия. Имелись и участки, где собственная ткань роговицы уже имела нормальное строение и наблюдалась лишь усиленная пролиферация клеток фибропластического ряда, а под эпителием отмечалось разрастание грануляционной ткани (в виде пласта). Регенераторные процессы в эпителии наблюдались больше по периферии роговицы. При определении площади дефекта эпителия роговицы был отмечен определенный параллелизм. В контрольной группе на первый день площадь дефекта составила 56,17±1,64 мм2, в дальнейшем площадь дефекта эпителия сокращалась незначительно и составляла на 3 день 24,33±0,52 мм2, на 7 день 8,68±0,61 мм2 и на 14 день 7,59±0,36 мм2. Более выраженная эпителизация была отмечена в опытной группе. На первый день площадь дефекта составила 47,23±1,37 мм2. В дальнейшем площадь сокращалась и составляла на 3 день 18,12±0,53 мм2, на 7 день 6,19±0,23 мм2 и на 14 день 2,84±0,4 мм2 . При проведении вариационного статистического анализа различия показателей дефекта эпителия в опытной и контрольной группах были достоверны на 1, 3, 7, 14 дни. Морфологическое исследование роговицы показало, более выраженную регенеративную активность роговицы в опытной группе по сравнению с контрольной группой. Полученные экспериментальные данные свидетельствуют, что масляный раствор ФЭС оказывает более выраженное противовоспалительное, эпителизирующее действие по сравнению с актовегином при химических (щелочных) ожогах. Данный эффект объясняется тем, что ФЭС повышают фагоцитарную активность нейтрофилов, стимулируют биосинтез белка, активируют цитоплазматическую РНК тем самым, оказывая ранозаживляющее действие при повреждении тканей [2, 4]. Выводы 1. Масляный раствор ФЭС обладает лучшим ранозаживляющим действием по сравнению с актовегином. 2. При лечении ФЭС в опытной группе наблюдалось больше слоев эпителия, чем в контрольной группе, так же в опытной группе отмечено отсутствие грануляционной ткани в конце наблюдения. 3. В разные сроки наблюдения площадь дефекта эпителия при лечении ФЭС была достоверно меньше, чем в контрольной в 1,8 раз.