Comparison of the effectiveness of substances in experimental epithelialized corneal burn

Abstract

Produced a morphological comparison of the regenerative properties of the pilot burn the cornea of rabbit. Treatment of the product of Dili in the main group of ecdysterone in the control group – akto-veginom. Revealed the acceleration of epithelialization anterior corneal epithelium using ecdysterone compared to Actovegin. At different periods of observation of the defect area of the epithelium in the treatment of ecdysterone was significantly lower than control by 1.8 times, confirming the histological examination.

Full Text

При ожогах глаз страдают все отделы глаза, однако наибольшую тяжесть поражения получает роговица, в силу своей локализации она является наиболее уязвимым отделом глазного яблока [3]. С целью скорейшего заживления роговицы показано применение лекарственных препаратов, оказывающих положительное действие на репаративные процессы. К таким средствам относятся фитоэкдистероиды (ФЭС) [1, 2]. Цель исследования – сравнить регенераторное действие ФЭС при экспериментальных ожогах с общепризнанным эпителизирующим, регенераторным препаратом актовегин 20%. Материалы и методы Исследования были выполнены на 36 кроликах обоего пола, весом 2-2,5 кг. Были сформированы опытная группа – 18 животных (36 глаз), контрольная группа – 18 животных (36 глаз). Ожоги II степени вызывались аппликацией фильтровальной бумаги, смоченной 2,5% раствором гидрооксида натрия с экспозицией 5 секунд на роговицу. В опытной группе лечение включало ежедневные инстилляции (четыре раза в день) масляного раствора фитоэкдистероида экдистерон 0,01%, в контрольной группе лечение включало ежедневные инстилляции (четыре раза в день) глазного геля актовегин 20%, все кролики получали глазные капли ципромед 0,3%. Дефект роговицы определяли окрашиванием флюоресцеином с последующим расчетом площади дефекта на цифровых фотографиях компьютерной программой Photo-M. Фотографирование производили на 1, 3, 7, 14 сутки. Гистологическое исследование проводилось методом окрашивания срезов роговицы гематоксилин-эозином на 1, 3, 7, 14 дни. Результаты и их обсуждение В опытной группе (лечение масляным раствором ФЭС) гистологически через первые сутки преобладали явления структурного повреждения и экссудации. Ткань роговицы имела выраженные некротические изменения с небольшим эпителиальным покрытием в один слой кубических клеток. Волокна собственного слоя набухшие, расслоенные, клеточные элементы в нем отсутствовали, имелись и участки со слабой лейкоцитарной инфильтрацией с преобладанием эозинофилов. Так имелась картина тяжелых дистрофических и некротических изменений с тенденцией к расплавлению ткани, но уже с начинавшейся эпителизацией. На 3 сутки отмечалось во всех слоях роговицы активные регенераторные процессы при сохранении еще некротизации в центре. Роговица частично была покрыта активно пролиферирующим многослойным плоским неороговевающим эпителием, среди клеток которого определялись многочисленные фигуры митоза. В субэпителиальных участках собственного слоя – нейтрофильная инфильтрация, в остальных отделах – набухание волокон и пролиферация молодых элементов фибропластического ряда. Отмечалась выраженная активная регенерация эпителия, который покрывал роговицу на большом протяжении и состоял в основном из двух или трех слоев. К 7 имела место выраженная активная регенерация эпителия, который покрывал роговицу на большом протяжении и состоял в основном из трех или четырех слоев. В периферических отделах отмечалась интенсивная эозинофильная инфильтрация, пролиферация молодых клеток эпителия, который уже на значительном протяжении имел многослойное строение, в базальном слое закономерно определялись фигуры митоза. Регенерация эпителия отмечалась в ранние сроки. Отечность собственного слоя и инфильтрация уменьшались к 7 суткам наблюдения. На 14 сутки эпителизация распространялась мощным пластом, в субэпителиальных участках грануляционная ткань отсутствовала. В поверхностных отделах собственной ткани наблюдалась слабая инфильтрация эозинофилами. В группе контроля гистологически на первые сутки в роговице наблюдались выраженные некротические изменения, осложнённые воспалительной реакцией, инфильтрация собственного слоя лейкоцитами. Зона некроза с дефектом эпителия чётко обнаруживались на третьи сутки опыта. Четвертые сутки характеризовались тяжёлыми некротическими изменениями с явлениями расплавления тканей. В ряде случаев отмечалась слабая регенерация при наличии выраженных дистрофических изменений в поверхностных слоях собственного вещества. Роговица незначительно была покрыта пролиферирующим плоским неороговевающим эпителием, среди клеток которого определялись фигуры митоза. В субэпителиальных участках собственного слоя – нейтрофильная инфильтрация, в остальных отделах – набухание волокон и пролиферация молодых элементов фибропластического ряда. Отмечалась регенерация эпителия, который покрывал роговицу на большом протяжении и состоял в основном из одного слоя клеток. На 7 день в центральной части роговицы еще имелась зона некроза, но в периферических отделах уже отмечалась регенерация эпителия в виде пласта на значительном протяжении, состоящего из двух слоёв клеток, медленно переходящего в эпителий обычного строения. В подлежащем собственном слое отмечалась слабая пролиферация молодых элементов фибропластического ряда и потеря эозинофилии. По периферии же отмечалась регенерация многослойного плоского эпителия, переходящего в двуслойный. В этих участках в собственном слое – умеренная нейтрофильная инфильтрация и пролиферация фибропластических элементов. На 14 сутки в центре роговицы всё ещё имелся некротически измененный собственный слой, ближе к периферии был покрыт тонким пластом регенерирующего эпителия. Имелись и участки, где собственная ткань роговицы уже имела нормальное строение и наблюдалась лишь усиленная пролиферация клеток фибропластического ряда, а под эпителием отмечалось разрастание грануляционной ткани (в виде пласта). Регенераторные процессы в эпителии наблюдались больше по периферии роговицы. При определении площади дефекта эпителия роговицы был отмечен определенный параллелизм. В контрольной группе на первый день площадь дефекта составила 56,17±1,64 мм2, в дальнейшем площадь дефекта эпителия сокращалась незначительно и составляла на 3 день 24,33±0,52 мм2, на 7 день 8,68±0,61 мм2 и на 14 день 7,59±0,36 мм2. Более выраженная эпителизация была отмечена в опытной группе. На первый день площадь дефекта составила 47,23±1,37 мм2. В дальнейшем площадь сокращалась и составляла на 3 день 18,12±0,53 мм2, на 7 день 6,19±0,23 мм2 и на 14 день 2,84±0,4 мм2 . При проведении вариационного статистического анализа различия показателей дефекта эпителия в опытной и контрольной группах были достоверны на 1, 3, 7, 14 дни. Морфологическое исследование роговицы показало, более выраженную регенеративную активность роговицы в опытной группе по сравнению с контрольной группой. Полученные экспериментальные данные свидетельствуют, что масляный раствор ФЭС оказывает более выраженное противовоспалительное, эпителизирующее действие по сравнению с актовегином при химических (щелочных) ожогах. Данный эффект объясняется тем, что ФЭС повышают фагоцитарную активность нейтрофилов, стимулируют биосинтез белка, активируют цитоплазматическую РНК тем самым, оказывая ранозаживляющее действие при повреждении тканей [2, 4]. Выводы 1. Масляный раствор ФЭС обладает лучшим ранозаживляющим действием по сравнению с актовегином. 2. При лечении ФЭС в опытной группе наблюдалось больше слоев эпителия, чем в контрольной группе, так же в опытной группе отмечено отсутствие грануляционной ткани в конце наблюдения. 3. В разные сроки наблюдения площадь дефекта эпителия при лечении ФЭС была достоверно меньше, чем в контрольной в 1,8 раз.