ВЛИЯНИЕ ФИНАСТЕРИДА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ ГЛИКОПРОТЕИНА-P В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Аннотация

В исследовании на кроликах изучено влияние финастерида на функциональную активность эффлюксного белка-транспортера гликопротеина-Р (Pgp). Активность Pgp оценивали по фармакокинетике его маркерного субстрата фексофенадина. Установлено, что 14 дневное введение финастерида приводит к тканеспецифической индукции активности Рgp в печени и почках.

Полный текст

Фармакотерапия большинства заболеваний предполагает одновременное назначение нескольких лекарственных средств, что существенно повышает риск взаимодействия между ними. Основные виды взаимодействий лекарственных препаратов включают - фармацевтическое, фармакокинетическое и фармакодинамическое, из которых фармакокинетический вид часто играет решающую роль в формировании побочного действия лекарственных веществ или неэффективности комбинированной фармакотерапии. Актуальным и малоизученным в настоящее время является лекарственное взаимодействие, связанное с влиянием на системы транспорта лекарственных веществ в организме. Pgp - это полиспецифичный АТФ-зависимый эффлюксный транспортер, контролирующий фармакокинетику различных соединений как в физиологических условиях, так и в условиях патологии, он также препятствует проникновению эндогенных липофильных веществ через цитоплазматические мембраны различных клеток [1, 4, 6]. Установлен целый ряд лекарственных препаратов, которые оказывают индуцирующее или ингибирующее влияние на функциональную активность Pgp, что, в связи с широкой субстратной специфичностью белка-транспортера, может приводить к значительным изменениям фармакокинетики лекарственных средств, назначаемых в комплексной фармакотерапии [1]. В научной литературе нами не было обнаружено информации о характере влияния финастерида - ингибитора 5 а-редуктазы, применяемого для терапии доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ), на функциональную активность белка-транспортера. Пожилой возраст пациентов, страдающих ДГПЖ, повышает вероятность того, что основному заболеванию будет сопутствовать дополнительная патология, требующая фармакологической коррекции. Исходя из химической структуры молекулы финастерида, можно прогнозировать принадлежность вещества к субстратам Pgp, а, значит, и возможность изменять эф-флюксную активность белка-транспортера [7]. Логично предположить, что фи-настерид является потенциальным индуктором Pgp, т.к. по имеющимся данным, он взаимодействует с PXR-рецептором (Pregnane X receptor), транскрипционным фактором, активирующим экспрессию ферментов метаболизма ксенобиотиков, а также транспортеров ксено- и эндобиоти- 46 Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова, № 4, 2012 г. ков [8]. В связи с вышеизложенным, представляется актуальным изучить характер влияния финастерида на функциональную активность Pgp. Цель настоящего исследования - изучить влияние финастерида на функциональную активность Pgp в эксперименте. Материалы и методы Работа выполнена на 6 половозрелых кроликах-самцах породы Шиншилла, массой 3500 - 4300 г. Исследование влияния финастерида на функциональную активность Pgp проводили по фармакокинетике фексофенадина - маркерного субстрата белка-транспортера. Финастерид вводили внутрижелудочно через зонд в течение 14 дней в дозе 0,225 мг/кг [5, 9] в форме суспензии в оливковом масле. Фексофенадин (Телфаст 180 мг; Aventis Pharma, Италия) вводили внутрижелудочно в дозе 67,5 мг/кг массы тела животного до и после 14дневного введения изучаемого препарата, а также на 5-й день его отмены. Пробы крови отбирали из краевой вены уха кролика в объеме 5 - 7 мл в ге-паринизированные побирки через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 12 и 24 часа после однократного введения фексофенадина, центрифугировали 10 минут при 3000 об/мин, плазму хранили при -29°С до анализа [2]. Содержание фексофенадина в плазме крови определяли методом ВЭЖХ на хроматографе «Стайер» (Россия) с ультрафиолетовым детектором и обращено-фазовой колонкой «Beckman Coulter» 4,6*250 мм, зернением 5 мкм. Экстракцию и хроматографирование маркерного субстрата осуществляли по собственной методике, за основу которой был взят метод Раменской Г.В. с соавт. [3]. Анализ выполняли при длине волны 220 нм и скорости подвижной фазы 1 мл/мин. Элюирование выполняли подвижной фазой следующего состава (на 200 мл): 133,7 мл бидистиллированной воды, содержащей 2,33 мл ледяной уксусной кислоты и 0,936 мл триэтиламина, доведенной триэтиламином до pH=4,3 и 64 мл ацетонитрила. Время удерживания пика фексофенадина составило 12,31 мин. В качестве экстрагентов для жидкостной экстракции фексофенадина применяли дихлорметан (ACROS ORGANICS), этилацетат (ACROS ORGANICS) и диэти-ловый эфир (ХИММЕД). Коэффициент экстракции фексофенадина из плазмы крови составлял 64 %. Определяли следующие фармакокинетические параметры: максимальная концентрация - Cmax (нг/мл), время достижения максимальной концентрации - Tmax (ч), период полувыведения T./2 (ч), площадь под фармакокинетической кривой "концентрация-время" от нуля до бесконечности и от нуля до последнего забора крови AUCo-M, AUC0-t (нг/мл)*ч, общий клиренс - Cl (л/ч), объем распределения - Vd (л), коэффициент абсорбции - Cmax/AUC0-t (1/ч) среднее время удерживания - MRT (ч), константа элиминации - Kel (1/ч). Фармакокинетические параметры рассчитывали модельно-независимым методом с использованием программы Kinetica 5.0. Отношение Cmax/AUC0-t вычисляли самостоятельно. Фармакокинетические кривые фексофенадина строили с помощью офисного пакета «Microsoft Office XP». Все первичные экспериментальные данные были подвергнуты математикостатистической обработке с использованием офисного пакета «Microsoft Office XP» и программы Statistica 8.0. Характер распределения данных определяли по критерию Шапиро-Уилка. Наличие статистически достоверных межгрупповых различий определяли по критерию Нью-мена-Кейлса после проведения дисперсионного анализа повторных измерений (тест ANOVA - для показателей, имеющих нормальное распределение, критерий Фридмана - для показателей, распределение которых отличалось от нормального). Полученные данные представлены в виде среднего арифметического значения и стандартной ошибки среднего результата (М±ш) в случае нормального распределения данных или в виде медианы, верхнего и нижнего квартиля - если распределение данных отличалось от нормального. 47 Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова, № 4, 2012 г. Результаты и их обсуждение 14-дневное пероральное введение финастерида кролика-самцам в дозе 0,255 мг/кг массы тела приводило к статистиче ски значимым изменениям фармакокинетики маркерного субстрата Pgp - фексо-фенадина. Полученные результаты представлены в таблице 1. Таблица 1 Основные фармакокинетические параметры фексофенадина на фоне введения и отмены финастерида (М±т - при нормальном распределении данных; медиана, нижний и верхний квартиль - при распределении данных, Изучаемые параметры Исходные значения n=6 Финастерид 14 дней n=6 5 день отмены финастерида n=6 Onax, нг/мл 264.89 (250.76; 370.79) 228.78 (188.11; 269.89) * 301.28 (292.01; 464.14) Т ч А max? А 4,0(3,0; 4,0) 3,5 (3,0; 4,0) 3,5 (2,0; 6,0) T/, ч 12.027±2.15 4.19±0.11* 14.74±2.46 AUC0-t , (нг/мл)хч 2984.075 (2699.34; 3069.45) 2077.7 (1480.92; 2342.26) * 4016.23 (3713.44; 4281.21) AUC0-M , (нг/мл) хч 4071.11 (3342.96; 5215.09) 2139.53 (1512.77; 2402.32) * 5574,00 (5217.89; 6823.07) Cl, л/ч 86.35±20.27 176.54±32.66* 53.16±5.97 Vd, л 1386.50±130.12 1326.68±210.98 1134.00±65.73 Cmax/AUC0-t, 1/ч 0.093 (0.083; 0.12) 0.11 (0.09; 0.16) 0.08 (0.073; 0.091) MRT, ч 19.15±2.86 7.77±0.49* 23.04±3.15 Kl, 1/ч 0.069±0.015 0.16±0.0043* 0.052±0.0069 * - достоверные различия по сравнению с показателями интактных животных (р<0,05) 14-дневное введение финастерида кроликам вызывало достоверное снижение медиан значений на 13,63% (p<0,05), AUC0-t на 30,37% (p<0,05), AUQi-M на 47,45% (p<0,05), средних значений TJ/2 на 65,16% (p<0,05), MRT на 59,43% (p<0,05) и повышение средних значений Kel на 131,88% (p<0,05) и Cl фексофенадина на 104,45% (p<0,05) по сравнению с исходными данными. Достоверных различий между медианами значений Tmax и Cmax/AUC0-t, а также между средними значениями Vd фек-софенадина у кроликов до и после введения препарата обнаружено не было. На пятый день отмены финастерида изучаемые фармакокинетические параметры существенно не отличались от аналогичных до введения препарата (p>0,05). Достоверное снижение медиан значений Cmax, AUC0-M, AUC0-t, средних зна чений MRTt и T1/2, а также повышение средних значений Cl и Kel фексофенадина на фоне назначения финастерида в течение 14 дней является доказательством его индуцирующего влияния на функциональную активность Pgp в печени и почках, органах, ответственных за выведение препарата. Отсутствие достоверных различий между медианами значений Cmax/AUC0-t, показателя, характеризующего абсорбцию веществ, до и после введения финастерида свидетельствует о тканеспецифичной индукции Pgp в органах выведения без влияния на функциональную активность белка-транспортера слизистой оболочки кишечника. Одним из механизмов индукции экспрессии Pgp ксенобиотиками является их взаимодействие с ядерным прегнан X рецептором (pregnane X receptor PXR) и с 48 Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова, № 4, 2012 г. конститутивным андростановым рецептором (constitutive androstane receptor CAR), представляющими собой белковые транскрипционные факторы, распознающие специфические последовательности в промоторах или энхансерах генов-мишеней и модулирующие их экспрессию [10]. Имеются данные о том, что финасте-рид является активатором PXR [8]. Клиническая значимость фармакокинетического взаимодействия финастерида и фексофенадина должна учитываться, несмотря на относительно высокое значение терапевтического индекса гистаминолитика. Нежелательные взаимодействия, связанные с влиянием на системы транспорта лекарственных веществ в организме, следует про-филактировать, при назначении препаратов-субстратов Pgp, характеризующихся малым терапевтическим индексом и низкой биодоступностью при энтеральном введении, если они применяются на фоне индукторов или ингибиторов Pgp. Выводы Внутрижелудочное введение кроликам финастерида в дозе 0,255 мг/кг массы в течение 14 дней приводит к повышению функциональной активности Pgp, определяемой по фармакокинетике его маркерного субстрата - фексофенадина, что подтверждается достоверным снижением Cmax, AUC0-t, AUC0-M, T1/2 и MRT и повышением Cl и Kel без изменения коэффициента абсорбции и свидетельствует о тканеспецифичной индукции Pgp в печени и почках -органах, ответственных за выведение препарата.