Patient evaluation of general practitioners as a tool to improve the quality of primary health care

Full Text

Лекарственные вещества с антигипо-ксическими и антиоксидантными свойствами сегодня широко применяются в медицинской практике [4, 7, 11, 13]. Пристальное внимание к антигипоксантам, их разностороннее экспериментальное и клиническое изучение обусловлены многообразным метаболотропным действием данной группы препаратов. В основе их фармакодинамики лежат различные метаболические механизмы, включая регуляцию потребления кислорода и энергетический обмен, воздействие на процессы свободнорадикального окисления и проницаемость клеточных мембран, влияние на регуляторные факторы клеточной адаптации и другие процессы [3, 9, 10, 12, 16]. В научной литературе имеются сведения о противовоспалительной активности антигипоксантов и возможности их применения в лечении воспалительных заболеваний [5, 14]. При фармакотерапии воспалений препаратами выбора, как известно, являются нестероидные противовоспалительные средства (НПВС). Однако, несмотря на несомненную клиническую эффективность, даже кратковременный прием данных препаратов может приводить к развитию побочных эффектов, которые в целом встречаются примерно в 25% случаев и могут представлять серьезную угрозу для жизни. Среди перспективных путей повышения эффективности и безопасности НПВС рассматривается, в частности, их комбинированное использование с антигипоксантами/ антиоксидантами [8]. В связи с этим целью настоящей работы явилось изучение противовоспалительной активности антигипоксантов различного химического строения и их влияние на эффективность НПВС при остром экспериментальном воспалении. Материалы и методы Эксперименты проведены на крысах-самцах линии Wistar массой 180-220 г. Острую воспалительную реакцию воспроизводили путем субплантарного введения 0,1 мл 1% водного раствора каррагенина в левую заднюю лапу опытным группам крыс [15]. Контрольным животным вводили равный объем воды очищенной. 61 Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова, № 4, 2014 г. В работе изучены вещества с анти-гипоксантной и антиоксидантной активностью различной химической структуры: амтизол (3,5-диамино-1,2,4-тиадиа-зол), гесперидин (5,3'-диокси-4'-метокси-7-рамноглюкозид флавонона), гипоксен (натриевая соль [поли-{-2,5-дигидрокси-фенилен}]-4-тиосульфокислоты) и метапрот (2-этилтиобензимидазол гидробромид), которые вводили в дозе 50 мг/кг массы. Препараты сравнения - ацетилсалициловая кислота (АСК) в дозе 100 мг/кг и диклофенак натрия в дозе 8 мг/кг массы. Все лекарственные вещества вводили в виде водных растворов через зонд в желудок за 1 час до индукции воспаления. При комбинированном применении вещества вводили с интервалом 1 час. Величину отека измеряли онкометри-ческим методом через 3 часа после индукции воспаления по изменению объема конечности экспериментальных животных [17]. Объем конечностей животных измеряли до введения и через 3 часа после введения каррагенина. В качестве критериев оценки противовоспалительной эффективности антигипоксантов и НПВС использовались: прирост объема конечности и торможение воспаления. Прирост объема конечности рассчитывали по формуле: П - прирост отека; О - величина объема лапы после введения индуктора воспаления; И - величина объема лапы до введения индуктора воспаления. Торможение воспаления рассчитывали по формуле: о - леченные животные (опытные); к - группа каррагенина. Затем животных декапитировали под легким эфирным наркозом. В момент декапитации животных осуществляли забор крови. Подсчет лейкограммы проводили общепринятым методом [1]. По данным лейкограммы производили расчет агранулоцитарно/гранулоцитарного ин декса (1д/г - индекс противовоспалительной активности), представляющего собой отношение суммарных показателей агра-нулоцитов (лимфоциты и моноциты) и гранулоцитов (нейтрофилы и эозинофи-лы). Агранулоцитарно/гранулоцитарный индекс рассчитывали по формуле: 1а/г = X агранулоциты / X гранулоциты. Показатели свободнорадикального окисления (СРО) в сыворотке крови - интенсивность быстрой вспышки (Фщах - прямопропорциональна процессу ПОЛ) и величину светосуммы свечения (обратнопропорциональна активности антиоксидантной системы) регистрировали на отечественном хемилюминометре CL-3606 фирмы «Диалог» с помощью программы «CLM». Статистическую обработку результатов опытов проводили с помощью пакета прикладных программ Statistica Version 6.0. Гипотезы о средних значениях проверяли с помощью t-критерия Стьюдента. Результаты и их обсуждение Через 3 часа после субплантарного введения каррагенина у опытных крыс развивался выраженный отек пораженной конечности, объем которой существенно увеличивался и составлял 2,52 см3, что на 73,8% больше исходного объема. У контрольных животных объем лапы не изменялся (табл. 1). На фоне введении гипоксена и мета-прота объем конечности увеличился по сравнению с контрольной группой животных на 49,6% и 56,5% соответственно, что было достоверно меньше, чем в опытной группе с каррагенином. Предварительное введение амтизола и геспери-дина не оказало статистически значимого влияния на развитие каррагенинового отека, прирост объема конечности в обоих случаях был сопоставим с моделью. На фоне введения АСК и диклофенака увеличение объема конечности у опытных крыс было менее выраженное, соответственно на 24% и 10,5%. При комбинированном применении гипоксена с АСК или диклофенаком для коррекции воспаления отмечено минимальное увеличение объема конечности, 62 Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова, № 4, 2014 г. причем данные показатели достоверно не отличались от значений контрольной группы, а торможение воспаления составило 81,3 и 90,4%. Метапрот тоже потенцировал действие АСК и диклофенака, торможение воспаления при его введении с НПВС составило 78 и 86,8%. Применение АСК в комбинации с амтизолом и гесперидином не отличалось по выраженности воспалительного отека от монотерапии только АСК. Из приведенных результатов следует, что гипоксен и в меньшей степени метапрот уменьшают развитие каррагенин-индуцированного отека. При комбинированном применении с АСК и дикло-фенаком они потенцируют противовоспалительный эффект НПВС. Результаты исследования лейко-граммы экспериментальных животных представлены в таблице 2. Из таблицы следует, что во всех опытных группах животных введение каррагенина вызывало относительную нейтрофилию с увеличением процентного содержания сегментоядерных нейтрофилов на фоне общего лейкоцитоза. Такие изменения в лейкоцитарной формуле характерны для острого воспалительного процесса. В группах животных, получавших АСК и диклофенак до введения каррагени-на, подобные изменения были менее значительны. Антигипоксанты не оказали существенного влияния на лейкограмму, но их комбинации с АСК и диклофенаком были более эффективны, чем применение одних НПВС. При комбинированном применении гипоксена и метапрота с диклофенаком наблюдались минимальные изменения лей-кограммы. Гипоксен и метапрот оказали потенцирующий эффект и на действие АСК. Амтизол и гесперидин при комбинированном введении с АСК существенно не изменяли показателей лейкограммы. Таблица 1 Влияние антигипоксантов и НПВС на объем конечности крыс через 3 часа после введения каррагенина Г руппы животных, (n=10) Доза, мг/кг Объем лапы, см3, (M±m) Прирост объема, % Торможение воспаления, % До введения После введения Контрольная гр-па 1,43±0,05 1,44±0,06 Каррагенин 1,45±0,05 2,52±0,07* 73,8 Антигипоксанты + каррагенин Г ипоксен 50 1,43±0,05 2,14±0,07*# 49,6 32,8 Метапрот 50 1,45±0,037 2,27±0,04*# 56,5 23,4 Амтизол 50 1,53±0,03 2,58±0,03* 68,6 7 Г есперидин 50 1,45±0,04 2,42±0,04* 66,9 9,3 НПВС + каррагенин АСК 100 1,46±0,04 1,81±0,07*# 24,0 67,5 Диклофенак 8 1,43±0,02 1,58±0,02# 10,5 85,8 Антигипоксанты + НПВС + каррагенин Г ипоксен + АСК 50 1,37±0,08 1,56±0,04# 13,8 81,3 Г ипоксен + Диклофенак 00 15 8 1,41±0,03 1,51±0,03# 7,1 90,4 Метапрот + АСК 50 1,48±0,056 1,72±0,06*# 16,2 78,0 Метапрот + Диклофенак 00 15 8 1,44±0,03 1,58±0,02# 9,7 86,8 Амтизол + АСК 50 100 1,53±0,05 1,97±0,06*# 28,7 61,1 Г есперидин + АСК 50 100 1,43±0,05 1,79±0,06*# 25,1 66,0 Примечание. В таблицах: * - различие с контролем статистически значимо (р<0,05); # - различие с кар-рагенином статистически значимо (р<0,05). 63 Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова, № 4, 2014 г. Таблица 2 Влияние антигипоксантов и НПВС на лейкограмму крови крыс при каррагенин-индуцированном воспалении Г руппы животных (n=10) Доза мг/кг Лейкограмма крови крыс 1а/г усл. ед. Нейтрофилы Эозинофи-лы, % Моноциты, % Лимфоциты, % Палочко ядерные, % Сегментоядерные, % Контроль 0,6±0,21 22,4±0,26 1,7±0,03 1,8±0,17 73,5±3,51 3,07±0,11 Каррагенин 1,1±0,62* 49,6±3,75* 0,9±0,07* 4,5±0,08* 43,8±3,98* 0,95±0,02* Антигипоксанты + каррагенин Г ипоксен 50 0,9±0,03 41,8±2,36#* 0,9±0,01* 4,2±0,31* 52,2±3,27# * 1,29±0,01*# Метапрот 50 1,1±0,06* 44,2±2,24#* 0,9±0,03* 4,4±0,06* 49,4±3,88# * 1,16±0,02*# Амтизол 50 1,2±0,08* 49,1±2,16* 0,8±0,02* 4,5±0,11* 44,4±2,12* 0,96±0,02* Г есперидин 50 1,1±0,05* 48,9±2,68* 0,7±0,03* 4,5±0,12* 44,8±3,18* 0,97±0,03* НПВС + каррагенин АСК 100 0,8±0,68 37,4±4,53#* 1,1±0,06* 3,4±0,21#* 57,3±5,38# * 1,55±0,03*# Диклофенак 8 0,7±0,07 31,3±3,68#* 1,4±0,08# 2,8±0,18#* 63,8±4,52# * 1,99±0,02# Антигипоксанты + НПВС + каррагенин Г ипоксен + АСК 50 100 0,7±0,46 31,8±3,12#* 1,3±0,05# 2,2±0,28# 64,0±3,60# 1,98±0,08# Г ипоксен + Диклофенак 50 8 0,6±0,09# 25,5±2,54# 1,6±0,07# 1,9±0,08# 70,4±4,51# 2,64±0,1# Метапрот + АСК 50 100 0,8±0,04 36,0±1,15#* 1,2±0,04#* 2,8±0,08#* 59,3±4,33# * 1,64±0,05*# Метапрот + Диклофенак 50 8 0,6±0,04# 27,6±2,68# 1,3±0,05# 2,1±0,07# 68,4±4,22# 2,39±0,08# Амтизол + АСК 50 100 0,9±0,05 44,3± 1,91#* 1,0±0,04* 3,2±0,09#* 50,6±2,56# * 1,16±0,04*# Г есперидин +АСК 50 100 1,3±0,21* 49,5±0,26* 0,79±0,03* 4,5±0,17* 43,9±3,51* 0,99±0,03* Для интегрированной оценки противовоспалительной активности антигипоксантов и их комбинаций с НПВС был рассчитан индекс противовоспалительной активности (табл. 2). Наибольшее значение индекса отмечено в контроле - 3,07. При воспалении индекс уменьшается. На фоне применения препаратов антигипоксантов и НПВС наблюдается различная противовоспалительная активность, что видно не только по изменению объема конечности, но и по изменению индекса 1а/г. Наиболее эффективными оказались комбинации гипоксена с диклофенаком (1а/г=2,64±0,1), метапрота с диклофенаком (1а/г=2,39±0,08), гипоксена с АСК (1а/г=1,98±0,08) и метапрота с АСК (1а/г=1,64±0,05). При сравнении прироста объема конечности с индексом 1а/г отмечено, что между данными показателями имеется обратная корреляционная зависимость (при r = - 0,96, p<0,05). В следующей серии экспериментов мы изучили активность СРО в сыворотки крови экспериментальных животных через 3 часа после индукции воспаления, а также влияние антигипоксантов и НПВС на процессы пероксидации. Результаты исследования активности процессов СРО представлены в таблице 3. Как следует из таблицы, интенсивность быстрой вспышки и величина 64 Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова, № 4, 2014 г. Таблица 3 Показатели свободнорадикального окисления сыворотки крови крыс при каррагенин-индуцированном воспалении и его фармакологической коррекции Г руппы животных (n=10) Доза мг/кг Показатели свободнорадикального окисления, отн. ед. Ф max, отн. ед. Величина светосуммы свечения, отн. ед. Контрольная группа 2731±362,8# 36875±5327,0# Каррагенин 6578±411,2* 72978,2±2383,2* НПВС + каррагенин АСК 100 5836±385,7*# 56037±2539,5*# Диклофенак 8 5743±354,6*# 52430±2146,4*# Антигипоксанты + каррагенин Г ипоксен 50 3894±241,8*# 55873±2953,7*# Метапрот 50 5873±134,5*# 65567±2561,8*# Амтизол 50 5992±257,8*# 68253±2496,1*# Г есперидин 50 5956±165,1*# 69164±1564,9*# Антигипоксанты + НПВС + каррагенин Г ипоксен +АСК 50 100 3051±239,3# 42659± 1076,6*# Г ипоксен +Диклофенак 50 8 2843±268,7# 38642±1246,2# Метапрот +АСК 50 100 3464±257,2*# 43281±1964,6*# Метапрот +Диклофенак 50 8 3525±195,7*# 44653±1564,3*# Амтизол +АСК 50 100 4165±136,5*# 45274±1896,5*# Г есперидин +АСК 50 100 4298±156,4*# 44281±1346,6*# светосуммы свечения в группе животных, где применялся каррагенин, были достоверно выше (в 2,4 и в 2 раза соответственно) значений контрольной группы. Такие изменения показателей свидетельствуют об активации СРО (активация процессов ПОЛ и снижение активности антиоксидантной защиты). В опытных группах крыс на фоне применения лекарственных препаратов показатели СРО увеличивались не так выраженно, например, в группе, где применялась АСК, интенсивность быстрой вспышки увеличилась в 2,1 раза, а величина светосуммы свечения - в 1,5 раза по отношению к контролю. Примерно такие же изменения отмечались после введения диклофенака. Антигипоксанты тоже снижали величину изучаемых показателей СРО, активированного каррагенином. Наиболее эффективно это отмечалось на фоне приема гипоксена по показателю Фтах. При назначении комбинаций гипо-ксена с диклофенаком или АСК, а также метапрота с диклофенаком или АСК наблюдалось максимальное угнетение СРО, индуцированного карагенином. Показатели интенсивности быстрой вспышки и величины светосуммы свечения в этих группах опытных животных приближались к контрольным значениям. Комбинации амтизола и гесперидина с НПВС были менее эффективными. Выраженное ингибирование процессов СРО при применении гипоксена и его комбинаций с НПВС в условиях острого воспаления, по-видимому, объясняется полигидрофениленовой структурой основного ядра гипоксена. Гидроксильные группы полигидрохинона легко отдают свой атом водорода, который может взаимодействовать с активным радикалом с 65 Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова, № 4, 2014 г. образованием пероксидов. В молекуле гипоксена одновременно может существовать до 12 гидроксильных групп, способных одномоментно или последовательно связать большое количество свободных радикалов [2, 6]. Таким образом, субплантарное введение 1% водного раствора карагенина крысам вызывает через 3 часа развитие острой воспалительной реакции, которая проявляется выраженным отеком (увеличение объема лапы) пораженной конечности, характерными изменениями лейко-граммы крови и активацией процессов СРО в сыворотке крови. Предварительное энтеральное введение опытным животным антигипоксантов (амтизол, геспери-дин, гипоксен, метапрот) существенно не изменяет развитие воспалительной реакции. Слабое противовоспалительное действие оказывают гипоксен и метапрот в дозах 50 мг/кг. Однако применение анти-гипоксантов в комбинации с ацетилсалициловой кислотой или диклофенаком при остром карагенин-индуцированном воспалении сопровождается выраженным увеличением противовоспалительного эффекта НПВС. Наиболее эффективными оказались комбинации гипоксена с дик-лофенаком, метапрота с диклофенаком, гипоксена с АСК и метапрота с АСК. У животных, получавших эти комбинации лекарственных веществ на фоне введения каррагенина, все регистрируемые признаки воспаления (прирост объема конечности, процент торможения воспаления, показатели лейкограммы, активность свободно-радикального окисления) были значительно меньше, а индекс противовоспалительной активности выше по сравнению с другими опытными группами животных. Данные результаты свидетельствуют о том, что гипоксен и мета-прот потенцируют противовоспалительный эффект НПВС. Возможно, это связано с мощным антиоксидантным действием препаратов и подавлением экссудативной фазы воспаления. Выводы Гипоксен и метапрот в дозе 50 мг/кг массы оказывают слабое противовоспа лительное действие на модели острого каррагенин-индуцированного воспаления. Применение гипоксена и метапрота в комбинации с диклофенаком или ацетилсалициловой кислотой потенцирует противовоспалительный эффект НПВС.

References

Supplementary files