THE STUDY OF ANTIINFLAMMATORY ACTIVITY OF POLYSACCARIDES ISOLATED FROM TANACETUM VULGARE
- 期: 卷 20, 编号 3 (2012)
- 页面: 53-57
- 栏目: Articles
- ##submission.dateSubmitted##: 28.10.2016
- ##submission.datePublished##: 15.12.2012
- URL: https://journals.eco-vector.com/pavlovj/article/view/5099
- DOI: https://doi.org/10.17816/PAVLOVJ2012353-57
- ID: 5099
如何引用文章
全文:
详细
Polysaccharides, are isolated from Tanacetum vulgare flowers, exert influence on antiinflammatory activity, the normalization of leucocytes number and erythrocyte sedimentation rate, the decreasing of drops.
全文:
Воспаление является одним из самых распространенных патологических процессов, определяющих или сопровождающих течение заболеваний различной этиологии. В медицинской практике широко используются противовоспалительные средства, относящиеся к различным классам химических соединений. Имеющиеся данные об их эффективности и особенностях действия в эксперименте и клинике весьма разноречивы в связи с различными принципами и методами оценки соответствующих показателей [6, 7]. Применение многих синтетических и природных (кортикостероиды) противовоспалительных средств вызывает побочные реакциями со стороны желудочнокишечного тракта при энтеральном применении (фенилбутазон, индометацин, салицилаты) [3], нередко наблюдается лейкопения, анемия, тромбоцитопения и склонность к кровотечениям, реже агра-нулоцитоз, отмечается нарушение водносолевого обмена [5]. Полисахаридные препараты обладают противовоспалительным действием и не вызывают побочных эффектов со стороны желудочно-кишечного тракта [2], что определяет целесообразность дальнейшего поиска антифлогистиков полиса- харидной природы, в том числе полисахаридов цветков пижмы обыкновенной. Материалы и методы Полисахарид выделяли из воздушносухих цветков пижмы, продающихся в аптечной сети. Предварительной экстракцией сырья 40% этанолом отделяли поли-фенольные соединения, а из шрота экстракцией оксалатом аммония в течение 1,5 часов на кипящей водяной бане извлекали полисахаридный комплекс, который осаждали избытком спирта этилового. Очищали спиртом этиловым, ацетоном и эфиром [1], получая аморфный порошок светло-серого цвета. Моносахаридный состав определили после кислотного гидролиза (в растворе кислоты серной 1М) методом нисходящей бумажной хроматографии (в системе растворителей бутанол - кислота уксусная - вода очищенная 4:1:5) и восходящей тонкослойной хроматографии на пластинах «Silufol» (в той же системе растворителей). В состав полисахаридного комплекса входят: глюкоза, галактоза, ксилоза и арабиноза. Количество уроновых кислот определяли гравиметрически после гидролиза полисахаридного комплекса и осаждения полига-лактуроновой кислоты в виде пектата кальция [4]. Количественное определение свободных карбоксильных групп прово- 53 Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова, №3, 2012 г. дили алкалиметрически (индикатор - фенолфталеин). Нами впервые установлено, что полисахарид цветков пижмы обыкновенной относится к классу пектиновых веществ и содержит до 85% остатков уро-новых кислот, 16% которых имеют свободную карбоксильную группу. Методом спектрофотометрии в видимой области мы определили, что полисахарид цветков пижмы обыкновенной обладает выраженной солюбилизирующей активностью. В разных образцах полисахарида находится от 69,87% до 75,13% восстанавливающих моносахаридов в пересчете на глюкозу. Для изучения противовоспалительной активности использовали 3%-ный водный раствор полисахарида. Исследование проводили на 24 белых беспородных крысах средней массой 150-200 г, которых содержали в стандартных условиях вивария. Исследования на животных выполнены в соответствии с Европейской конвенцией по защите и использованию позвоночных животных для экспериментов и других целей, «Правилами лабораторной практики в Российской Федерации», а также «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных». В эксперименте использовали четыре группы животных по шесть особей в каждой. Моделью асептического экссудативного воспаления служил отек, вызванный введением 0,1 мл 2,5%-ного раствора формалина под апоневроз стопы задней конечности крысы. Первой группе подопытных крыс за 2 часа до введения формалина, а затем с интервалом 2 часа вводили внутрижелу-дочно (через зонд) полисахаридный комплекс цветков пижмы обыкновенной в дозе 0,3 г/кг массы; в последующие 7 суток - ежедневно. Вторая и третья группы животных получали препараты сравнения - настой цветков календулы (1 г/кг массы) и индо-метацин (0,01 г/кг массы) в режиме назначения полисахарида. Крысам контрольной группы в те же сроки вводили физиологический раствор. Для изучения динамики воспалительной реакции величину отека измеряли онкометрическим методом через 1, 2, 3, 4, 6 и 24 часа после инъекции флогогенного агента, далее 1 раз в сутки в течение семи дней. Каждое определение проводили не менее трех раз, брали средние значения замеров. Через 4 часа, на 3, 5 и 7 сутки после введения формалина у животных брали кровь для определения количества лейкоцитов и скорости оседания эритроцитов. Результаты опытов обрабатывали статистически. Результаты и их обсуждение У интактных животных введение флогогенного агента обусловило развитие гиперемии и постепенного нарастания отека конечности с максимумом через 4 часа после введения 2,5%-ного формалина, когда объем воспаленной конечности крысы составил 205,0% от исходного. В последующие сроки наблюдения отек постепенно уменьшался и первоначальный объем конечности восстанавливался к седьмым суткам эксперимента. Параллельно нарастанию отека отмечено изменение числа лейкоцитов и величины СОЭ в периферической крови. К четвертому часу опыта у крыс контрольной группы имел место выраженный лейкоцитоз: количество лейкоцитов возросло в 3 раза и составило 35645,8 ±1920,4 против 11391,7±292,0 для интактных животных. Максимальный подъем величины СОЭ -до 3,4±0,2 (для интактных крыс 1,5±0,2) наблюдался к третьим суткам эксперимента. В последующие сроки наблюдения указанные показатели снижались и соответствовали норме к седьмым суткам опыта. Лечение экспериментального воспалительного процесса настоем календулы, приготовленным согласно требованиям Государственой фармакопеи, (1,0 г/кг массы животного) не изменяло динамику развития отека, однако способствовало задержке накопления экссудата (рис. 1). Спустя 1 час и 4 часа после введения формалина объем воспаленной конечности был на 22,22% и 38,10% меньше, чем в контроле, а количество лейкоцитов через 4 часа составило 28563,2±911,0. Через 54 Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова, №3, 2012 г. сутки торможение воспалительной реакции составило 40% , а через трое суток 63,64%. Максимальный подъем величины СОЭ - до 2,7±0,3 наблюдался к третьим суткам эксперимента. Первоначальный объем конечности крыс восстановился к пятым суткам эксперимента, а уровень лейкоцитов на седьмые сутки составил 15625,5±1209,0. Назначение индометацина (0,010 г/кг массы) в качестве терапевтического средства способствовало значительной задержке воспалительного процесса. Тор можение воспаления составило: через 1 час после инъекции формалина 55,56%, а в момент максимального развития отека -через 4 часа -57,14% от уровня контроля соответственно. Количество лейкоцитов через 4 часа после введения формалина составило 16633,3±504,4. Максимальный подъем величины СОЭ - до 2,2±0,4 наблюдался к третьим суткам эксперимента. Первоначальный объем конечности крысы восстановился к третьим суткам эксперимента, а уровень лейкоцитов и СОЭ - к седьмым суткам. -контроль -настой календулы -полисахаридный комплекс »норма Рис. 1. Влияние полисахаридного комплекса, настоя календулы и индометацина на динамику воспалительного отека у крыс У крыс, получавших полисахаридный комплекс цветков пижмы обыкновенной, как и у животных контрольной группы, после инициации воспаления формалином наблюдалась гиперемия и отек конечности. Однако интенсивность воспалительного процесса по сравнению с животными контрольной группы была значительно снижена. Через 1 час после введения флогогенного агента торможение воспалительной реакции составило 66,67%, а в момент максимального развития отека - через 4 часа - 61,90%, что значительно выше соответствующих данных контрольной группы. Полное угнетение воспалительной реакции и восстановление первоначального объема конечности крыс при лечении полисахаридным комплексом цветков пижмы обыкновенной наблюдалось к третьим суткам эксперимента. 55 Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова, №3, 2012 г. Таблица 1 Влияние полисахаридного комплекса цветков пижмы, настоя календулы и индометацина на уровень лейкоцитов и СОЭ у крыс с экспериментальным воспалением Время после введения формалина Количество лейкоцитов СОЭ Интактные животные 11391,7±292,0 1,5±0,2 Контрольная группа 4 ч 35645,8±1920,4 1,7±0,2 3 сут. 21770,8±159,3 3,4±0,2 5 сут. 19391,7±867,3 3,2±0,3 7сут. 15900,0±1070,8 1,8±0,2 Лечение индометацином 4 ч 16633,3±504,4 1,6±0,2 3 сут. 14533,3±460,2 2,2±0,4 5 сут. 13166,7±88,5 1,3±0,2 7сут. 12083,3±504,4 1,3±0,2 Лечение полисахаридом 4 ч 21416,7±1504,5 1,6±0,2 цветков пижмы обыкно 3 сут. 13629,2±128,3 2,6±0,2 венной 5 сут. 12779,2±747,8 1,9±0,2 7сут. 11395,8±216,8 1,6±0,4 Лечение настоем цветков 4 ч 28563,2±911,0 1,7±0,3 календулы 3 сут. 25885,3±2012,0 2,7±0,3 5 сут. 21290,7±199,3 2,0±0,4 7сут. 15625,5±1209,0 1,6±0,2 Под влиянием полисахарида у крыс величина СОЭ через 4 часа после введения препарата составила 1,6±0,2, а уровень лейкоцитов на 39,91% ниже чем в контроле (табл. 1). Нормализация показателей СОЭ и количества лейкоцитов наблюдалась на 7 сутки эксперимента и составляли соответственно 1,6±0,4 и 11395,8±216,8. Данные, полученные при действии полисахаридов цветков пижмы обыкновенной на изменение величины СОЭ и количество лейкоцитов при воспалении превосходит действие настоя цветков календулы и сравнимо с действием индометацина. Выводы 1. Из цветков пижмы обыкновенной выделен полисахаридный комплекс, относящийся к классу гликуроногликанов типа пектинов. Общий выход составил 6,5%. 2. Изучены и установлены: состав и некоторые физико-химические свойства полисахаридного комплекса цветков пижмы обыкновенной. 3. Изучена противовоспалительная активность полисахаридного комплекса цветков пижмы обыкновенной. Полученные данные свидетельствуют о значи тельном тормозящем эффекте полисахарида на развитие экссудативного компонента воспалительной реакции, уменьшении лейкоцитоза, нормализации СОЭ и сокращении сроков лечения. В эксперименте полисахаридный комплекс превосходит по активности настой цветков календулы и не уступает индометацину.×
参考
- Кочетков Н.К. Химия углеводов / Н.К. Кочетков. - М.: Изд-во «Химия», 1967. - 672 с.
- Лавренев Г.Ю. Сравнительная оценка влияния некоторых растительных полисахаридов на воспалительный процесс и регенерацию хронической язвы желудка / Г.Ю. Лавренев, И.П. Чернов // Фармакол. и токсикол. - 1983. - №4. - С. 85-89
- Машковский М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: РИА «Новая волна», 2007. - 1206 с.
- Филипович Ю.Б. Практикум по общей биохимии: учебное пособие для студентов химических специальностей педагогических институтов / Ю.Б. Филипович, Т.А. Егорова, Севастьянова. - 2-е изд., перераб. - М.: Просвещение, 1982. - 311 с.
- Hypoglycemic activity of polysaccharide fractions containing beta-glucans from extracts of Rhynchelytrum repens (Wild.) C.E. Hubb., Poaceae / A.C. De Paula [et al.] // Braz J Med Biol Res. - 2005. - Vol. 38, №6. - Р. 885-893.
- Gressly T.F. Effect of abomasal pectin infusion on digestion and nitrogen bal ance in lactating dairy cows / T.F. Gressly, L.E. Armentano // J Dairy Sci. - 2005. - Vol. 88, № 11. - Р. 4028-4044.
- Sun H. Haemolytic activities and adjuvant effect of Gynostemma pentaphyllum saponins on the immune responses to ovalbumin in mise / H. Sun, Q. Zheng // Phetother. Res. - 2005. - Vol. 19, № 10. - Р. 895-900.
补充文件
![](/img/style/loading.gif)