Ложноположительные результаты определения бактериальных эндотоксинов в лекарственных средствах: применение блокатора β-глюканов

Введение. При оценке качества лекарственных средств (ЛС) по показателю «Бактериальные эндотоксины» в ферментативную реакцию с лизатом амебоцитов наряду с бактериальными эндотоксинами вступают и β-глюканы. Это приводит к получению ложноположительных результатов в ЛАЛ-тесте (Limulus amebocyte lysate), что создает серьезную проблему для определения пирогенных примесей. Выделяют 2 основных источника происхождения β-глюканов в лекарственных препаратах: наличие вспомогательных веществ в составе препарата (например, кармеллоза натрия, кроскарбоксиметилцеллюлоза натрия) и технологические примеси действующего вещества на стадии получения ЛС. Цель исследования - изучение потенцирующего (усиливающего) влияния β-глюканов в испытаниях на наличие бактериальных эндотоксинов, поиск и выбор способа его устранения. Материал и методы. Объекты исследования - лекарственные препараты «Бетаметазон, суспензия для инъекций 7 мг/мл» и «Инозин, раствор для внутривенного введения 20 мг/мл». Для проведения ЛАЛ-теста в модификациях гель-тромб и хромогенный кинетический использовали эндотоксин-специфичный буфер (блокатор β-глюканов). Результаты. Рассмотрены основные причины возникновения «ложных» результатов: потенцирование (усиление) реакции ЛАЛ-реактива с бактериальными эндотоксинами из-за наличия β-глюканов в препаратах. Разработаны методики по устранению факторов, мешающих проведению ЛАЛ-теста, во избежание получения ложноположительных результатов. Заключение. Разработаны методические подходы к предотвращению влияния потенцирующего (усиливающего) мешающего фактора на результаты ЛАЛ-теста.

бактериальные эндотоксины, мешающие факторы, ложноположительные результаты, β-глюканы