New ways of immunodiagnosis in neurology

Full Text

Рассеянный склероз (PC) и миастения (М) — аутоиммунные заболевания нервной системы, диагностика которых достаточно сложна. Это связано с чрезвычайным клиническим полиморфизмом этих заболеваний и отсутствием надежных методов лабораторной диагностики [2, 4].

Нами проведено клинико-иммунологическое обследование 65 больных с несомненным диагнозом PC и 37 больных М, результатом которого явилась разработка иммунофармакологических способов диагностики этих заболеваний. Группу больных PC составили 45 женщин и 20 мужчин в возрасте от 16 до 50 (33,3±1,2) лет. У 53 (81,7%) больных имела место цереброспинальная форма заболевания, у 9 (13,9%) — церебральная и у 3 (4,4%) — спинальная. В стадии клинической экзацербации обследованы 36 (55,4%) больных, из них в дебюте заболевания (в периоде первой экзацербации) — 19, в стадии ремиссии — 10 (15,4%). Прогрессирующее течение заболевания наблюдалось у 19 (28,2%) больных PC. Длительность заболевания к моменту обследования широко варьировала — от 2 недель до 20(4,2±0,6) лет. Заболевание манифестировало в возрасте до 20 лет у 8 (12,3%) больных, от 20 до 35 — у 45 (69,2%), после 36 лет — у 12 (18,5%). Средний возраст больных в дебюте заболевания равнялся 29,4±1,0 годам. Время от начала заболевания до установления диагноза PC также весьма различалось — от одного месяца до 14 (2,5±0,4) лет.

Группу больных М составили 27 женщин и 10 мужчин в возрасте от 24 до 70 (43,9±2,0) лет. У 18 (48,6%) больных наблюдалась локальная форма М, у 19 (51,4%) — генерализованная. Длительность заболевания составляла один месяц—18 лет (5,7±0,8). Заболевание дебютировало в возрасте от 16 до 67 (38,2±2,3) лет. Период от начала заболевания до установления настоящего диагноза также колебался — от одного месяца до 15 (2,7±О,5) лет. У больных были диагностированы острое нарушение мозгового кровообращения, дифтерия, миелопатия, PC, рассеянный энцефаломиелит, энцефалит, опухоль головного мозга. Всем больным проводили классическую прозериновую пробу M.Wolker: у 4 (10,8%) больных наблюдался “драматический” эффект с полной компенсацией нарушенных функций, у 15 (40,5%) — эффект был положительным, но с неполной компенсацией, у 18 (43,8%) — проба дала отрицательные результаты (прозеринрезистентный вариант заболевания).

В контрольную группу вошли 20 здоровых лиц. Кроме того, были обследованы больные с другими нозологическими формами, которые составили группы сравнения. 1-я группа сравнения включала 20 больных с заболеваниями периферической нервной системы, преимущественно вертеброгенной природы. Эта группа являлась принципиально важной, поскольку результаты изучения интересующих нас показателей мы экстраполировали фактически на всю неврологическую патологию, не имеющую клинических признаков и патогенетических механизмов аутоиммунных заболеваний нервной системы.

2-я группа сравнения была сформирована в процессе исследования. Ее составили 40 больных с заболеваниями, клинически имитирующими PC, и 20 — с невропатологической симптоматикой, имитирующей М. Как правило, это были больные, у которых на какой-либо стадии болезни предполагались изучаемые заболевания или они даже лечились по поводу PC или М. Дифференциальная диагностика характера патологии у большинства больных этой группы представляла объективные трудности.

Предложенные нами способы иммунодиагностики PC и М основаны на положениях концепции иммунного механизма химического гомеостаза (ИМХГ), сформулированной в 1976 г. в Пермской медицинской академии А.С.Заксом и А.А.Быковой [1]. Согласно этой концепции, иммунная система постоянно участвует в регуляции баланса многих эндогенных биологически активных веществ (БАВ). Это подтверждает наличие в крови здоровых лиц небольших количеств розетко-, бласто-, бляшкообразующих лимфоцитов и антител (АТ), специфических эндогенным медиаторам, ферментам, гормонам, их предшественникам и метаболитам. Минимальное нарушение баланса эндобиотика в организме вызывает быструю реакцию иммунной системы в виде роста числа специфичных розеткообразующих клеток (РОК), бластов, антителообразующих клеток и титра АТ в крови. Иммунологические показатели, специфичные эндогенным БАВ, как исходные, так и после изменения баланса эндобиотиков фармакологическими агентами, вводимыми в организм больных, отличаются от специфических иммунологических показателей здоровых лиц. На основе этих отличий и разработаны способы диагностики PC и М.

Исходным положением новой иммунодиагностики PC стал известный факт дефицита серотипа в организме больных PC [5, 6]. Поэтому введение в их организм веществ, изменяющих баланс эндогенного серотина, не вызывает его накопления в крови, как это наблюдается у практически здоровых лиц. На основе данного факта и положений концепции ИМХГ нами предложен пероральный резерпиновый тест. Изучались клеточные и гуморальные показатели, специфичные серотонину, до и через 22—24 часа после приема 1 мг резерпина.

У практически здоровых лиц и больных 1-й группы сравнения фоновое число серотониновых РОК в крови, которое определяли в реакции иммунного розеткообразования с эритроцитарным серотониновым диагностикумом, равнялось 5,0±0,7%, титр противосеротониновых АТ в сыворотке крови был изначально низким и колебался в пределах 1:8—1:32 (17,2±1,9). На прием резерпина и, следовательно, изменение баланса эндогенного серотонина иммунная система реагировала ростом в крови числа серотониновых розеткообразующих лимфоцитов и титра противосеротониновых АТ. После приема резерпина число лимфоцитов, специфичных серотонину, в крови лиц контрольной группы и 1-й группы сравнений составило 26,5±1,5%, а титр противосеротониновых АТ варьировал от 1:64 до 1:256 (138,0±16,3). Имело место (Р<0,001) 5-кратное увеличение числа РОК, специфичных серотонину, относительно их фонового количества и статистически значимое (Р<0,001) 8-кратное нарастание титра противосеротониновых АТ по сравнению с их исходным уровнем.

Фоновое число лимфоцитов, иммунных к серотонину, в крови больных PC составило 5,9±0,5%. Исходный титр противосеротониновых АТ в сыворотке крови больных PC варьировал от 0 до 1:8 (4,9±0,4). После приема резерпина фоновые показатели в крови больных PC не изменились (Р>0,05): число РОК, специфичных серотонину, равнялось 6,4±0,5%, титр противосеротониновых АТ — 6,3±0,4 (табл. 1).

 

Таблица 1. Число РОК, специфичных серотонину, в крови и титр противосеротониновых АТ в сыворотке крови практически здоровых лиц, больных PC и групп сравнения

Группы	Число РОК, специфичных серотонину, %		Титр противосеротониновых АТ
наблюдений	фоновое	после приема резерпина	исходный	после приема резерпина
Практически здоровые лица	5,2±0,68	28,1±1,50	20,0±1,88	142,0±18,3
1-я группа сравнения	4,8±0,56	24.9±1,65	14,4±1,6	136,0±15,4
Больные PC	5,9±0,47	6,4±0,51	4,9±0,44	6,3±0,45
2-я группа сравнения	5,5±0,49	23,2±1,48	13,1±0,95	128,0±11,7

 

Таким образом, у больных PC имеет место совершенно иная, чем у здоровых и больных с заболеваниями периферической нервной системы, реакция иммунной системы на прием резерпина, что позволяет считать ее характерной для данного демиелинизирующего заболевания и рассматривать резерпиновый тест в качестве одного из лабораторных методов диагностики PC (приоритетная справка № 961120568 от 10.10.96 г.). При анализе данных иммунологического исследования крови больных PC установлено, что число РОК и титр АТ, специфичных серотонину, не зависит от пола, возраста больных, длительности и типа течения заболевания, степени неврологического дефицита, определяемого по шкале DSS J.Kurtzke.

В патогенезе М ведущую роль играют АТ к ацетилхолиновым рецепторам [3]; кроме того, в организме больных изменен баланс эндогенного ацетилхолина (АХ). На последнем факте основаны предложенные методы диагностики М. Больные всех групп наблюдения были обследованы по следующей программе. У них были изучены следующие показатели: 1) фоновое число РОК, специфичных АХ (Ах РОК) в крови (клеточный вариант ацетилхолинового теста); 2) изменение числа Ах РОК в ответ на прозерин, вводимый подкожно; 3) фоновый титр АТ к АХ в сыворотке крови (гуморальный вариант ацетилхолинового теста); 4) изменение титра анти-Ах АТ в ответ на введение прозерина.

Результаты исследования группы контроля и 1-й группы сравнения показали (табл. 2), что фоновое число Ах РОК в крови, определяемое в реакции иммунного розеткообразования с эритроцитарным ацетилхолиновым диагностикумом, составило 6,35±0,65%; исходный титр анти-Ах АТ в сыворотке крови колебался в пределах 1:2—1:6 (8,9±1,3). После введения прозерина эти показатели возросли (Р<0,001): число Ах РОК — до 23,3±1,41%, титр анти-Ах АТ — до 62,4±8,44. Совершенно другая картина наблюдалась в крови больных М: фоновое число Ах РОК было изначально повышено (относительно контроля) в 4—4,5 раза (Р<0,001) и равнялось 25,9±1,78%; исходный титр анти-Ах АТ также был повышен и колебался в пределах 1:64—1:1024 (341,0±52,7; Р<0,001). В ответ на введение прозерина число Ах РОК значительно уменьшалось (относительно фонового) и составило всего 6,97± ±0,52% (Р<0,001). Аналогичным образом реагировало и гуморальное звено иммунитета: титр анти-Ах АТ уменьшался до 61,8±11,6 (Р<0,01).

 

Таблица 2. Число РОК, специфичных АХ, в крови и титр анти-Ах Ат в сыворотке крови здоровых лиц, больных М и групп сравнения

Группы наблюдений	Показатели, специфичные АХ, в крови обследованных
	число РОК, %		титр АТ
	фоновое	после введения прозерина	исходный	после введения прозерина
Практически здоровые лица	5,3±0,65	23,3±1,41	8,9±1,30	62,4±8,44
1-я группа сравнения	6,4±0,63	22,4±1,85	9,0±1,28	70,4±7,19
Больные М	25,9±1,78	6,97±0,52	341,0±52,70	61,8±11,60
2-я группа сравнения	5,8±0,74	22,9±1,65	8,9±1,37	68,6±8,21

 

Таким образом, фоновые показатели, специфичные АХ, и характер их изменения после введения прозерина при М отличаются от аналогичных показателей у здоровых лиц и больных с патологией периферической нервной системы, что позволяет считать их характерными для данного заболевания и рассматривать ацетилхолиновый тест и иммунный вариант прозериновой пробы в качестве диагностических методов при М (приоритетные справки № 96105123 от 27.03.96 г. и № 96122333 от 19.11.96 г.). Величина показателей, специфичных АХ, зависит от формы М: при генерализованной форме их уровень в крови выше, чем при локальных формах. При сравнении показателей, специфичных АХ, в крови больных М в зависимости от пола, возраста, длительности заболевания, степени тяжести и типа течения, достоверных различий не выявлено.

Наши исследования в группе больных с клинической симптоматикой, имитирующей PC или М, показали отсутствие характерных для PC и М иммунных ответов на действие резерпина или прозерина как на клеточном, так и на гуморальном уровнях, что было одним из аргументов, позволивших отвергнуть диагноз PC или М. При дальнейшем клиническом наблюдении у больных этих групп были установлены следующие диагнозы: синдром вегетативной дистонии с оптико-вестибулярными нарушениями, астенический или истерический невроз, токсическая мозжечковая атаксия, опухоль ствола мозга, вестибулопатии, острое нарушение мозгового кровообращения в бассейне основной артерии, аневризма внутренней сонной артерии, гипотериоз с миастеноподобным синдромом, офтальмоплегическая миопатия.

Таким образом, полученные результаты могут быть использованы в качестве диагностических маркеров PC и М, а предложенные способы иммунодиагностики позволят диагностировать эти заболевания в дебюте, при стертых, атипичных и прозеринрезистентных формах М.

About the authors

A. A. Bykova

Perm State Medical Academy

Author for correspondence.
Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Perm

Е. V. Volodina

Perm State Medical Academy

Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Perm

Е. F. Olkhovskaya

Perm State Medical Academy

Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Perm

А. А. Shutov

Perm State Medical Academy

Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Perm

References

Supplementary files