S-нитрозоглутатион как индуктор нитрозативного стресса и апоптоза

Введение. S-нитрозоглутатион представляет собой S-нитрозилированное производное глутатиона и считается важным медиатором сигнальных эффектов оксида азота (II). Оксид азота способен проявлять как регуляторное действие, так и токсическое за счёт формирования активных форм азота и нитрозилирования внутриклеточных компонентов, что может привести к развитию апоптоза. Роль оксида азота в регуляции апоптоза является двойственной, следовательно, требует дальнейшего изучения.

Цель исследования – изучить возможность развития нитрозативного стресса и апоптоза под действием донора NO – S-нитро-зоглутатиона.

Материал и методы. Исследование выполнено на культуре клеток HepG2. S-нитрозоглутатион добавляли к клеткам в концентрациях 1, 10, 50, 100 мкМ, инкубировали 3 и 24 ч. К контрольным клеткам в эквивалентном объеме добавляли воду для инъекций (растворитель S-нитрозоглутатиона). Фотометрическими методами определяли жизнеспособность клеток (МТТ-тест), концентрацию метаболитов оксида азота и пероксинитрита. С помощью метода вестерн-блот оценивали относительное количество 3-нитротирозина, BCL2 и Fas.

Результаты. Воздействие S-нитрозоглутатиона в концентрации 100 мкМ (24 ч) приводило к снижению жизнеспособности клеток и увеличению содержания пероксинитрита. Уровень метаболитов оксида азота возрастал при действии S-нитрозоглутатиона в концентрациях 1–100 мкМ и сроках воздействия 3 и 24 ч, вызывало увеличение относительного количества 3-нитротирозина в данных условиях. S-нитрозоглутатион при инкубации 3 ч и концентрациях 1–50 мкМ повышал уровень BCL2, при 50–100 мкМ – снижал содержание Fas; при инкубации 24 ч и концентрации 1–100 мкМ – снижал уровень BCL2 и Fas.

Вывод. S-нитрозоглутатион в концентрациях 1–50 мкМ с воздействием 3 ч оказывает сигнальное действие в клетках линии HepG2, а в концентрации 100 мкМ при инкубации 3 и 24 ч вызывает развитие нитрозативного стресса, что приводит к развитию апоптоза и снижению жизнеспособности клеток.