Том 28, № 8 (2025)

Хлорофиллы по химические структуре – магниевые комплексы различных тетрапирролов. Основными растительными источниками хлорофиллов являются крапива двудомная, люцерна, шелковица, эвкалипт, различные виды водорослей и ель обыкновенная. Изучены хлорофиллы А, Б, С, Д, но в процентном соотношении в сырье преобладают виды А и Б. Хлорофиллы обладают высокой биологической активностью, благодаря чему представляют интерес для разработки лекарственных препаратов. В настоящее время производные хлорофиллов активно применяются для фотодинамической терапии раковых заболеваний. Среди доказанных фармацевтических эффектов – гемопоэтический, ранозаживляющий, бактерицидный, противовирусный и иммуностимулирующий.

Цель обзора – систематизация информационных источников о химической структуре, свойствах, биологической активности, технологии и стандартизации хлорофиллов, выделенных из растительного сырья.

Обобщены сведения о хлорофиллах, изучены их химическая структура, растительные источники, свойства и биологическая активность. Особое внимание уделено методам экстракции и количественному определению хлорофиллов в растительном сырье. Установлено, что основным методом экстракции хлорофиллов из растительного сырья является мацерация этиловым спиртом. Для интенсификации выделения хлорофиллов используются ультразвуковая ванна, микроволновая печь, также рассмотрены методы экстракции сверхкритической жидкостью, глубокими эвтектическими растворителями, с использованием экстрактора ускоренного растворения. Для количественного определения хлорофиллов в полученных вытяжках используются методы спектрофотометрии, фотометрии, индуктивно связанной плазмы с оптической эмиссионной спектрометрией, спектроскопии ядерного магнитного резонанса, высокоэффективной жидкостной хроматографии. В настоящее время хлорофиллы в основном используются в качестве натуральных пигментов. В данном обзоре они рассматриваются с точки зрения использования в медицине в качестве активной фармацевтической субстанции.

Изучены государственный реестр лекарственных средств и фармацевтический рынок. Установлено, что в Российской Федерации с хлорофиллами зарегистрированы в основном лекарственные препараты для наружного и местного применения. Для внутреннего применения зарегистрированы лекарственные препараты с хлорофиллами из эвкалипта и биологически активные добавки.

Введение. Нифедипин, представитель класса 1,4-дигидропиридинов, занял прочное место в арсенале врачей для лечения разнообразных сердечно-сосудистых заболеваний. Сосудорасширяющее и антигипертензивное действие нифедипина делают его ценным инструментом в борьбе с гипертонией и другими сердечно-сосудистыми патологиями. Низкая растворимость в воде является распространенной проблемой для фармацевтических субстанций, таких как нифедипин, ограничивая их биодоступность и эффективность. Это приводит к снижению терапевтического эффекта и необходимости увеличения дозировки, что, в свою очередь, может увеличить риск побочных эффектов. Нанотехнологии предлагают перспективный подход к преодолению этого барьера, позволяя создавать лекарственные формы с улучшенными фармакокинетическими свойствами.

Цель исследования – разработка методики повышения растворимости нифедипина путем получения наночастиц с использованием высокоэнергетической шаровой мельницы.

Материал и методы. В работе использовали нифедипин (Тамико, Сирия), метанол (Biosolve Chimie, Франция), дигидрофосфат калия, гептансульфонат натрия и ортофосфорную кислоту (85%) (Isolab, Германия), очищенную воду и Твин 20 (Merck, Германия). Измельчение нифедипина проводили с использованием высокоэнергетической шаровой мельницы (Retsch PM 400). В ходе исследовательской работы профиль растворения наночастиц нифедипина и нифедипина изучали путем исследования их насыщенного раствора методом ВЭЖХ.  Для характеристики размеров измельченных образцов, их исследовали с помощью сканирующей электронной микроскопии (СЭМ).

Результаты. Применение высокоэнергетической шаровой мельницы (Retsch PM 400) позволило получить наночастицы нифедипина с существенно улучшенными характеристиками растворимости. Установлено, что растворимость наночастиц нифедипина составила (90,5 мкг/мл), что в 38 раз выше, чем у исходной субстанции (2,34 мкг/мл).

Выводы. Результаты исследования демонстрируют эффективность использования высокоэнергетической шаровой мельницы для получения наночастиц нифедипина со значительно повышенной растворимостью. Эти результаты открывают новые возможности для разработки лекарственных форм нифедипина с улучшенной биодоступностью.

Введение. Бешенство является инфекционным заболеванием с абсолютной летальностью. В настоящее время не существует эффективных лекарств и схем лечения людей с признаками бешенства. Единственной стратегией постэкспозиционной профилактики бешенства является вакцинация и введение антирабического иммуноглобулина. При этом сохраняется актуальность поиска новых схем лечения и профилактики заболевания, вследствие чего важным является разработка и исследование противовирусных препаратов, эффективных против вируса бешенства.

Цель исследования – изучение противовирусной активности препарата на основе одноцепочечной высокополимерной РНК Sacharomyces cerevisiae, ранее показавшей противовирусную активность в отношении других возбудителей вирусных инфекций.

Материал и методы. В работе исследовали влияние препарата на основе одноцепочечной высокополимерной РНК S. cerevisiae Амфиэвовир на уровень репродукции аттенуированного штамма вируса бешенства «Саратов» на модели культуры клеток Vero.

Результаты. Исследуемый препарат в диапазоне концентраций от 10 до 20 мкг/мл и внесении в культуру клеток не позднее, чем через 24 ч после инфицирования, снижает титр вируса на уровне от 24,6 до 36,2% по сравнению с контрольной группой. Внесение препарата в инфицируемую культуру клеток позднее 24 ч снижает его противовирусный эффект.

Выводы. Исследуемый препарат на основе одноцепочечной высокополимерной РНК S. cerevisiae обладает противовирусной активностью в отношении вируса бешенства в условиях in vitro. Результаты позволяют обосновать дальнейшее изучение схем
постэкспозиционной профилактики бешенства с использованием препаратов, изготовленных на основе иммуностимулирующих и иммуномодулирующих РНК.

Введение. Вартонов студень пуповины человека – соединительная ткань внеэмбрионального происхождения, характеризующаяся признаками эмбрионального фенотипа, которые проявляются в ускоренной регенерации повреждений и безрубцовом заживлении ран плода. Децеллюляризация представляет собой технологию удаления клеток и клеточных компонентов из биологического материала с сохранением основных структурных и композиционных характеристик внеклеточного матрикса.

Цель исследования – оценка структурных и биологических характеристик децеллюляризованного матрикса из Вартонова студня пуповины человека.

Материал и методы. Децеллюляризацию осуществляли с использованием детергентного метода – обработкой стерильным раствором додецилсульфата натрия в концентрации 0,01% в течение 24 ч при комнатной температуре. Компонентный состав Вартонова студня пуповины человека до и после процесса децеллюляризации оценивали с использованием методов спектрального анализа. Для изучения биологических характеристик децеллюляризованного матрикса из Вартонова студня пуповины человека использовали МТТ-тест и модель подкожной имплантации на мышах.

Результаты. Содержание общего коллагена по гидроксипролину в Вартоновом студне пуповины человека до децеллюляризации составило от 244,8 до 507,2 мкг/мг, после – от 398,9 до 777,3 мкг/мг, гиалуроновой кислоты и сульфатированных гликозаминогликанов – от 11,5 до 16,5 и от 16,1 до 22,5 мкг/мг до децеллюляризации и от 15,6 до 22,1 и от 25,6 до 29,6 мкг/мг после децеллюляризации соответственно. В Вартоновом студне пуповины человека идентифицированы множественные типы коллагена (I, III, IV, V, VI, XII), а также фибронектин, люмикан, декорин, бигликан и тенасцин. Выявлено отсутствие цитотоксичности модельных сред на основе экстрактов из децеллюляризованного матрикса из Вартонова студня пуповины человека. При подкожной имплантации мышам не наблюдалось признаков отторжения и усиленной клеточной реакции воспаления.

Выводы. Показана практическая возможность разработки лекарственного препарата и/или медицинского изделия для регенеративной медицины на основе децеллюляризованного матрикса из Вартонова студня пуповины человека.

Введение. Карбонилирование, как вариант окислительной модификации белков, служит показателем повреждения тканей при окислительном стрессе, в том числе вызванным гипоксией. Некоторые регуляторы метаболического ответа на дефицит кислорода, такие как донор NO аргинин и метаболит митохондрий сукцинат, также способны оказывать влияние на модуляцию антиоксидантной защиты клетки и окислительный стресс.

Цель исследования – оценка влияния аргинина и сукцината в комплексе на степень карбонилирования белков и антиоксидантный статус при гипоксии.

Материал и методы. В исследование включены 40 крыс Wistar, разделённые на 5 групп (n=8): животные, подвергшиеся нормобарической хронической гипоксии при содержании в гермокамере до снижения уровня кислорода до 10% один раз в день в течение 14 дней (1); получавшие аргинин в дозе 500 мг/кг массы тела животного в сутки на протяжении 10 дней (2); сукцинат в дозе 100 мг/кг массы тела животного в сутки на протяжении 14 дней (3); получавшие аргинин и сукцинат (4); подвергшиеся гипоксии и получавшие аргинин и сукцинат (5). В митохондриях семенных пузырьков и эпидидимиса оценивали активность супероксиддисмутазы по торможению реакции кверцетином, степень карбонилирования белков по реакции с 2,4-динитрофенолгидразином из чего рассчитывали резервно-адаптационный окислительной модификации белков потенциал. Для статистического анализа использовали критерий Манна–Уитни.

Результаты. сочетание аргинина и сукцината приводило к повышению степени карбонилирования белков и снижению резервно-адаптационный окислительной модификации белков митохондрий семенных пузырьков и эпидидимиса, при этом активности супероксиддисмутазы оставалась на уровне группы 2, что ниже, чем в группе 3. Комплексное воздействие изучаемых метаболитов при гипоксии оказывало протективное действие на белки митохондрий, снижая степень их окислительной модификации, что в особенности справедливо для белков митохондрий головки эпидидимиса. 

Выводы. В условиях физиологического синтеза NO сукцинат способствует поддержанию активности супероксиддисмутазы, что не проявляется при гипоксия-подобных состояниях. Активация синтеза NO аргинином в комплексе в сукцинатом является эффективным способом коррекции окислительной модификации белков митохондрий при гипоксии.

Введение. Sequoia sempervirens (D.Don) Endl. – самые высокие реликтовые растения-долгожители, способные накапливать уникальные вторичные метаболиты, которые могут найти применение в фитофармакогнозии. Для сохранения биоразнообразия редких видов растений целесообразно применять методы биотехнологии и создавать генетические банки in vitro, в том числе методом клонального микроразмножения. Создать стрессоустойчивые и высокопродуктивные растения можно с использованием «классических» методов клеточной биотехнологии, в частности, клеточной селекции in vitro.

Цель исследования – разработка технологии получения в условиях in vitro высокопродуктивных микроклонов реликтовых голосеменных растений рода Sequoia, изучение накопления и локализации вторичных метаболитов и их биологической активности.

Материал и методы. Объект исследования – растения Sequoia sempervirens (D.Don) Endl. Асептическую культуру получали из побегов первого года вегетации интактных растений. Экспланты культивировали на питательной среде Мурасига и Скуга с различным гормональным составом. Изучение локализации фенольных соединений проводили в листьях, стеблях, апикальных почках интактных растений секвойи и в микроклонах, а также в каллусной ткани. Для этого применяли гистохимические методы: на сумму фенольных соединений материал окрашивали 0,08% раствором реактива Fast Blue, для изучения локализации флаванов (катехины и проантоцианидины) использовали реакцию с ванилиновым реактивом в парах соляной кислоты. При помощи спектрофотометрических методов определяли количественное содержание разных классов полифенолов. Цитотоксические свойства экстрактов изучали с помощью МТТ-теста

Результаты. Получены культуры микроклонов in vitro S. sempervirens. Исследована зависимость роста культуры in vitro от гормонального состава питательной среды и эндогенного содержания полифенолов в первичном экспланте. Впервые показаны накопление и локализация вторичных соединений в микроклонах in vitro S. sempervirens. Установлено, что вторичные метаболиты преимущественно локализуются в эпидермальных, паренхимных и проводящих тканях как интактных растениях, так и микроклонов in vitro. Приводится описание локализации вторичных соединений в культурах in vitro, как продуцентов веществ с высокой биологической активностью.

Выводы. Исследования по цитотоксичности экстрактов культур in vitro секвойи демонстрируют высокие показатели по отношению к линии клеток рака шейки матки HeLa и линии глиобластомы человека А172.