Встречаемость аллелей и генотипов полиморфных генов лептина G(−2548)A, адипонектина G(276)T и рецептора адипонектина А(+219)Т у больных псориазом, страдающих алиментарным ожирением

Полный текст

Введение. Псориаз – хроническое иммуновоспалительное заболевание кожи мультифакториальной природы с доминирующим значением генетических факторов, поражающее 2–3% взрослого населения планеты [8]. К особенностям течения псориаза на современном этапе можно отнести более тяжелое течения дерматоза, частую инвалидизацию больных, снижение качества жизни, недостаточную эффективность терапевтических мероприятий.

Воздействие внешних и/или внутренних триггеров на фоне определенных генетических нарушений во врожденном и адаптивном иммунитете приводит к манифестации псориаза. Доля генетической составляющей в развитии заболевания составляет 60–70%, а средовой – 30–40% [2]. Результаты генетических исследований позволяют рассматривать псориаз как полигенное заболевание, при котором один и тот же фенотип может быть ассоциирован с различными генетическими вариантами [9].

Больные псориазом имеют более высокий риск развития метаболического синдрома (МС) и возникновения сердечно-сосудистых заболеваний, что приводит к уменьшению продолжительности жизни. МС – это комплекс клинических, гормональных и метаболических нарушений. Компонентами МС являются абдоминальное ожирение, артериальная гипертензия, жировой гепатоз, сахарный диабет и дислипидемия [1, 6].

Установлено, что хроническое субклиническое системное воспаление играет такую же значимую роль в нарушениях обмена веществ, как и при псориазе. В основе патогенеза псориаза, атеросклероза и абдоминального ожирения лежит дисбаланс цитокинов Т-хелперов 1-го и 17-го типа. Жировая ткань является активным эндокринным органом, секретирующим различные медиаторы воспаления, включающие гормоноподобные молекулы – адипокины – и некоторые провоспалительные цитокины – интерлейкин (IL)-1β, IL-6 и фактор некроза опухоли α (TNF-α) [1, 6].

Лептин – пептидный гормон жировой ткани, обладающий провоспалительными свойствами и являющийся одним из ведущих факторов в формировании инсулинорезистентности. Он может играть значимую роль в развитии абдоминального ожирения и более тяжелом течении псориаза.

Адипонектин – противовоспалительный полипептид, секретируемый адипоцитами и действующий как инсулин-сенсибилизирующий гормон. Обнаружена ассоциация между снижением уровня адипoнектина в сыворотке крови и нарастанием массы тела, а также ускорением развития атеросклероза. У больных псориазом с МС уровень адипонектина ниже, чем у больных псориазом без метаболических нарушений [3, 10].

Ранее МС рассматривался с позиции приобретенных нарушений обмена веществ. В последнее десятилетие получены данные о наследуемом характере развития ожирения, сахарного диабета, артериальной гипертензии. В связи с этим можно предположить наличие общих генетических детерминант у псориаза и абдоминального ожирения [4, 5, 7, 11].

Цель исследования. Изучить встречаемость аллелей и генотипов полиморфизмов G(−2548) A (rs7799039) гена лептина, G(276)Т (rs1501299) адипонектина и A(+219)T (rs11061971) рецептора адипонектина-2 у больных псориазом, страдающих абдоминальным ожирением, и пациентов, не имеющих метаболических нарушений.

Материалы и методы. Обследованы 227 больных псориазом: 114 пациентов с индексом массы тела (ИМТ) <30 кг/м2 (средний возраст – 44,5±8,7 года, 67/114 (58,8%) мужчин и 47/114 (41,2%) женщин); 113 пациентов с ИМТ ≥30 кг/м2 (средний возраст – 46,1±6,9 года, 70/113 (61,9%) мужчин и 43/113 (38,1%) женщины). В качестве контроля обследовали 100 условно здоровых лиц с ИМТ <30 кг/м2 (средний возраст – 42,1±7,4 года, 59/100 (59%) мужчин и 41/100 (41%) женщина). Источником дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) были лейкоциты периферической крови. Молекулярно-генетическое исследование выполнено на базе Центра коллективного пользования научным оборудованием «Молекулярная биология» Медицинской академии им. С.И. Георгиевского (структурное подразделение) Крымского федерального университета им. В.И. Вернадского. ДНК выделяли с помощью фенол-хлороформной методики. Однонуклеотидные полиморфизмы исследуемых маркеров определяли, используя методику аллель-специфической полимеразной цепной реакции (ПЦР) с флуоресцентными зондами. Синтез праймеров и зондов осуществлен в научно-производственной компании «Синтол» (Москва), их последовательности представлены в таблице 1. Определение генных полиморфизмов выполняли с помощью аллель-специфической ПЦР в реальном времени на приборе «CFX-96» фирмы «BioRad Laboratories» (Соединенные Штаты Америки). Реакция проводилась в объеме 25 мкл, режим амплификации: 1×95°/5 с, 45×(95°/15 с – 58°/50 с).

 

Таблица 1. Последовательность праймеров и зондов к генным полиморфизмам

Ген	Полиморфизм	Праймеры и зонды
Лептин	G(-2548)A	Праймеры
		F 5'-cctgtaattttcccatgagaac-3'
		R 5'-tgcaacatctcagcacttag-3'
		Зонды
		5'-FAM-egtgcccgacaggg ttgcgctgatcggcacg-BHQ1
		5'-R6G-cgtgcccgacagggttgcact- gatcggcacg-BHQ
Адипонектин	G(276)Y	Праймеры
		F 5'caggtaagaatgtttctg
		R 5'agaggaatcagaatatgaa
		Зонды
		5'FAM-gtataaactatatgaaggcattcatt attaactaa-BHQ
		5' R6G-atataaactatatgaagtcattcat- tattaactaa-BHQ
Рецептор адипонектина R2	A(219)T	Праймеры
		F 5'acgaagaggtgataatga
		R 5'atagtagtagtagtagtagtagtag
		Зонды
		5'FAM -aatgtggaggaagtg- gcagagg-BHQ
		5'R6G -aatgtggaggatgtggcagagg- BHQ

 

Результаты и их обсуждение. Встречаемость генотипов АА, АG и GG полиморфизма G(−2548)A гена лептина у больных псориазом в целом (32/227 (14,1%),104/227 (45,8%) и 91/227 (40,1%) соответственно) и здоровых людей (17/100 (17%), 52/100 (52%) и 31/100 (31%) соответственно) не имела статистически значимых различий. Анализ распределения генотипов данного полиморфизма среди больных псориазом выявил повышение частоты генотипа АА среди пациентов с ИМТ ≥30 кг/м2 в сравнении с больными с ИМТ <30 кг/м2 (22/113 (19,5%) и 10/114 (8,8%) соответственно) (OR=2,51, 95% CI: 1,07–6,04, Se=0,69, Sp=0,53; р<0,05). Частота аллеля А у пациентов с ИМТ ≥30 кг/м2 была выше, чем у пациентов с ИМТ <30 кг/м2 (100/226 (44,2%) и 68/228 (29,8%) соответственно) (OR=1,87, 95% CI: 1,25–2,80, Se=0,60, Sp=0,56; р<0,05), таблица 2.

 

Таблица 2. Распределение аллелей и генотипов полиморфизма G(−2548)A гена лептина у больных псориазом, страдающих ожирением, пациентов, не имеющих ожирения, и здоровых лиц

Группа	Частота генотипов, абс. (%)				Частота аллелей, абс. (%)
	AA	AG	GG	Всего:	A	G	Всего:
Больные псориазом с ИМТ <30 кг/м2	10 (8,8)*	48 (42,2)	56 (49,1)*	114 (100)	68 (29,8)*	160 (70,2)	228 (100)
Больные псориазом с ИМТ >30 кг/м2	22 (19,5)*	56 (49,6)	35 (31)*	113 (100)	100 (44,2)*	126 (55,8)	226 (100)
Больные псориазом всего	32 (14,1)	104 (45,8)	91 (40,1)	227(100)	168 (37)	286(63)	454(100)
Здоровые лица	17 (17)	52 (52)	31(31)	100 (100)	87 (43,5)	113 (56,5)	200 (100)

Примечание: * - различия между больными псориазом, страдающими ожирением и не имеющими его, р<0,05.

 

Частота генотипов GG, GТ и ТТ полиморфизма G(+276)Т гена адипонектина у больных псориазом в целом (110/227 (48,5%), 101/227 (44,1%) и 16/227 (7,5%) соответственно) и здоровых людей (43/100 (43%), 48/100 (48%) и 9/100 (9%) соответственно) не имела статистически значимых различий. Анализ распределения генотипов данного полиморфизма выявил снижение частоты генотипа ТТ среди пациентов, страдающих псориазом, с ИМТ ≥30 кг/м2 в сравнении с больными псориазом с ИМТ <30 кг/м2 (1/113 (0,9%) и 16/114 (14%) соответственно) (OR=0,06, 95% CI: 0,01−0,4, Se=0,06, Sp=0,47; р<0,05). Частота аллеля Т у пациентов с ИМТ ≥30 кг/м2 была ниже, чем у пациентов с ИМТ <30 кг/м2 (55/226 (24,3%) и 79/228 (34,6%) соответственно) (OR=0,61, 95% CI: 0,4−0,93, Se=0,41, Sp=0,47; р<0,05), таблица 3.

 

Таблица 3. Распределение аллелей и генотипов полиморфизма G(+276)Т гена адипонектина у больных псориазом, страдающих ожирением, пациентов, не имеющих ожирения, и здоровых лиц

Группа	Частота генотипов, абс. (%)				Частота аллелей, абс. (%)
	GG	GT	ТТ	Всего:	G	T	Всего:
Больные псориазом с ИМТ <30 кг/м2	51 (44,7)	47 (41,2)	16 (14)*	114 (100)	149 (65,4)	79 (34,6)*	228 (100)
Больные псориазом с ИМТ >30 кг/м2	59 (52,2)	53 (46,9)	1 (0,9)*	113 (100)	171 (75,7)	55 (24,3)*	226 (100)
Больные псориазом всего	110 (48,5)	100 (44,1)	17(7,5)	227(100)	321 (70,7)	133 (29,3)	454 (100)
Здоровые лица	43(43)	48 (48)	9 (9)	100 (100)	134 (67)	66 (33)	200 (100)

Примечание: * - различия между больными псориазом, страдающими ожирением, и пациентами, не имеющими ожирения, р<0,05.

 

Встречаемость генотипов АА, АТ и ТТ полиморфизма A(+219)T гена рецептора адипонектина-2 у больных псориазом в целом (57/227 (25,1%), 79/227 (34,8%) и 91/227 (40,1%) соответственно) и здоровых людей (28/100 (28%), 24/100 (24%), 48/100 (48%) соответственно) не имела статистически значимых различий. Анализ распределения генотипов данного полиморфизма выявил повышение частоты генотипа АА среди пациентов, страдающих псориазом, с ИМТ ≥30 кг/м2 в сравнении с больными псориазом с ИМТ <30 кг/м2 (42/113 (37,2%) и 15/114 (13,2%) соответственно) (OR=3,9, 95% CI: 1,92−8,02, Se=0,74, Sp=0,58; р<0,05). Частота аллеля А у пациентов с ИМТ ≥30 кг/м2 была выше, чем у пациентов с ИМТ <30 кг/м2 (127/226 (56,2%) и 66/228 (28,9%) соответственно) (OR=3,15, 95% CI: 2,10−4,74, Se=0,66, Sp=0,62; р<0,05), таблица 4.

 

Таблица 4. Распределение аллелей и генотипов полиморфизма A(+219)T гена рецептора адипонектина-2 у больных псориазом, страдающих ожирением, пациентов, не имеющих ожирения, и здоровых лиц

Группа	Частота генотипов, абс. (%)				Частота аллелей, абс. (%)
	АА	АТ	ТТ	Всего:	А	Т	Всего:
Больные псориазом с ИМТ <30 кг/м2	15 (13,2)*	36 (31,6)	63 (55,3)	114 (100)	66 (28,9)*	162 (71,1)	228 (100)
Больные псориазом с ИМТ >30 кг/м2	42 (37,2)*	43 (38,1)	28 (24,8)	113 (100)	127 (56,2)*	99 (43,8)	226 (100)
Больные псориазом всего	57 (25,1)	79 (34,8)	91 (40,1)	227 (100)	193 (42,5)	261 (57,5)	454 (100)
Здоровые лица	28 (28)	24 (24)	48 (48)	100 (100)	80 (40)	120 (60)	200 (100)

Примечание: * - различия между больными псориазом, страдающими ожирением, и пациентами, не имеющими ожирения, р<0,05.

 

Таким образом, полученные нами данные показывают, что полиморфные гены вовлечены в развитие абдоминального ожирения у больных псориазом. Генетическое исследование изучаемых полиморфизмов у больных псориазом при дебюте заболевания позволит прогнозировать развитие ожирения, что необходимо учитывать при выборе тактики ведения таких пациентов.

Выводы

1. Выявлена ассоциация между развитием абдоминального ожирения у пациентов, страдающих псориазом, и носительством генотипа АА, а также аллеля А полиморфизма G(−2548)A гена лептина.
2. Обнаружена протекторная роль генотипа ТТ и аллеля Т полиморфного гена G(+276)Т адипонектина в отношении риска развития абдоминального ожирения у больных псориазом.
3. Генотип АА и аллель А гена рецептора адипонектина-2 А(+219)Т ассоциирован с риском развития абдоминального ожирения у пациентов, страдающих псориазом.

Об авторах

И. В. Рычкова

Клинический кожно-венерологический диспансер

Email: zkissskaz@mail.ru
Россия, Симферополь

О. А. Притуло

Крымский федеральный университет им. В.И. Вернадского

Email: zkissskaz@mail.ru
Россия, Симферополь

К. Д. Малый

Крымский федеральный университет им. В.И. Вернадского

Автор, ответственный за переписку.
Email: zkissskaz@mail.ru
Россия, Симферополь

Список литературы

Дополнительные файлы