Экспериментальное обоснование возможности использовании цитохимических показателей периферической крови для оценки функционального состояния организма летчика
- Авторы: Пащенко ПС1, Рисман БВ1, Дергачев ВБ1
-
Учреждения:
- Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова
- Выпуск: Том 20, № 2 (2018)
- Страницы: 160-165
- Раздел: Статьи
- Статья получена: 01.05.2019
- Статья опубликована: 15.12.2018
- URL: https://journals.eco-vector.com/1682-7392/article/view/12309
- DOI: https://doi.org/10.17816/brmma12309
- ID: 12309
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Методом количественной спектрофотометрии продуктов цитохимической реакции для выявления локализации окислительных ферментов исследовали активность дегидрогеназ сукцината (митохондриальной), лактата, α-глицерофосфата, глюкоза-6-фосфата лимфоцитов периферической крови крыс в условиях моделирования острого и хронического гравитационного стресса. Установлена динамика морфофункциональных преобразований, выраженность которых зависит от продолжительности воздействия (времени вращения животных на центрифуге). Для острого гравитационного стресса характерными являются изменения активности митохондриальной сукцинатдегидрогеназы, а в различных стадиях хронического гравитационного стресса - усиление процессов гликолиза (повышение активности лактатдегидрогеназы и α-глицерофосфатдегидрогеназы), а также пластического обмена (повышение активности глюкоза-6-фосфафатдегидрогеназы). Указанные изменения объясняются включением нейрогуморальных механизмов регуляции, обеспечивающих синхронизацию процессов окислительного метаболирования в клетках органов различных систем организма при неблагоприятных условиях их функционирования. Установлены существенные корреляционные связи между активностью ферментов лимфоцитов с одноименными показателями нейронов чревного симпатического узла, аденоцитов коркового и мозгового вещества надпочечников. Это дает основание полагать, что активность ферментов лимфоцитов может быть использована в качестве косвенных показателей процессов, происходящих в органах симпатоадреномедулярной и гипофиз-адренокортикальной систем в условиях острого и хронического гравитационного стресса.
Полный текст
Введение. Функциональным состоянием орга- низма в значительной степени определяется рабо- тоспособность летчика, а также эффективность его деятельности в условиях воздействия в том числе агрессивных факторов полета. Существующая си- стема медицинского контроля направлена на пред- упреждение развития в организме переутомления, терминальные стадии которого граничат с болезнен- ными состояниями. Развитию этих состояний предшествуют дезадап- тивные процессы в клетках тканей органов и особенно в регуляторных системах организма. При этом про- исходящие в клетках процессы далеко не всегда до- ступны для непосредственного и инструментального изучения, что требует разработки косвенных критери- ев для диагностики клеточной дезадаптации, в первую очередь, в структурах нервной системы и железах внутренней секреции. В литературе имеются попытки обоснования использования показателей химизма клеток крови в качестве своеобразного «зеркала» процессов, происходящих во внутренних органах [5]. Однако веских аргументов в пользу этого утверждения в литературе нет. Имеются лишь единичные краткие сообщения о наличии корреляции между активностью ферментов лимфоцитов и клеток паренхиматозных внутренних органов [1]. Попыток же сопоставления активности окисли- тельных ферментов лимфоцитов периферической крови с соименными показателями клеток органов симпато-адреномедулярной и гипофиз-адренокорти- кальной систем в условиях гравитационного стресса в доступной литературе мы не встретили. Цель исследования. Исследовать цитохимиче- ские показатели активности ключевых ферментов лимфоцитов периферической крови, определить их корреляционные связи с аналогичными показателями клеток коры и мозгового вещества надпочечника, а также нейроцитов чревного симпатического узла в условиях гравитационного стресса. Материалы и методы. Состояние острого (ОГС) и хронического (ХГС) гравитационного стресса модели- ровали путем вращения 92 белых беспородных крыс- самцов в возрасте 8, 21 и 34 недель на центрифуге с радиусом плеча 1,5 м [3]. Величина перегрузки соста- вила 4-6 ед. Состояние ОГС достигалось 3-кратными вращениями крыс по специально разработанному графику с двумя перерывами в течение 20 мин каждый (1-я серия, острое воздействие). ХГС моделировали вращением крыс по регламенту чередующихся 2-недельных вариантов (развиваю- 160 2 (62) - 2018 ВЕСТНИК РОССИЙСКОЙ ВОЕННО-МЕДИЦИНСКОЙ АКАДЕМИИ Экспериментальные исследования щийся ХГС - «предстресс», 2-я серия, хроническое воздействие на протяжении 13 недель). Вращением же на протяжении 26 недель достигали развития выра- женной картины гравитационного стресса (развитой ХГС, 3-я серия хронического воздействия). Общее время вращения в 1-й серии составило: - 31 мин; во 2-й серии - 20 ч 9 мин; в 3-й серии - 40 ч 18 мин. Кровь для приготовления мазков брали из хвосто- вых сосудов крыс. Всего было использовано 37 экспе- риментальных (ЭЖ) и 55 контрольных животных (КЖ). В лимфоцитах периферической крови исследо- вали дегидрогеназы сукцината (СДГ: К.Ф. 1.3.99), лактата (ЛДГ: К.Ф.1.1.27), цитоплазматического α-глицерофосфата (α-гл.ФДГ: К.Ф.1.1.18) и глюкоза- 6-фосфата (гл-6-ФДГ: К.Ф.1.11.49) по методике Кванглино и Хейхо [8]. Активность ферментов определяли как оптическую плотность продукта цитохимической реакции - дифор- мазана, используя спектрофотометрию (спектрофо- тометр «МЦФУ-2»). В соответствии со специальной программой длина волны составляла 580 НМ; объектив - 20; диаметр зонда - 0,2 мкм, число точек съема ин- формации на одно сканирование - 5 (для нейроцитов чревного узла, секреторных клеток различных зон коры мозгового вещества надпочечников). Для фотометрии в лимфоцитах применяли точечный метод ввиду от- носительно небольших размеров этого типа клеток. У каждого животного измеряли оптическую плотность в 50 клетках. Результаты спектрофотометрии выражали в условных единицах оптической плотности. При опре- делении ошибки среднего арифметического и медианы учитывали соотношение изменчивости объектов 1 и 2 порядков [2]. Кроме абсолютных значений активности ферментов лимфоцитов, определяли относительные показатели: СДГ/ЛДГ; СДГ/α-гл.ФДГ; Г-6-ФДГ/ЛДГ; Г-6-ФДГ/α-ФДГ, - характеризующие соотношение ак- тивности ключевых энзимов метаболических циклов при различных состояниях организма животных. Для про- ведения корреляционного анализа между активностью ферментов лимфоцитов с аналогичными показателями нейронов чревного узла и секреторных клеток клубочко- вой, пучковой, сетчатой зон коркового вещества, а также хромаффиноцитов мозгового вещества надпочечника использовали известные показатели оптической плот- ности ферментов клеток указанных органов. При этом применяли программу корреляционного однофактор- ного дисперсионного анализа. Кроме того, определяли относительное содержание лимфоцитов в мазках крови, окрашенных по Романовскому - Гимзе. Результаты и их обсуждение. У КЖ 1-й серии опытов (возраст 8 недель) лимфоциты составили 65-71% от всех форменных элементов белой крови. Такой процент лимфоцитов характерен для крыс, на- ходящихся в состоянии виварного контроля или же ре- акции их организма на раздражитель слабой силы [4]. Цитохимически в этих клетках выявляются СДГ, ЛДГ, α-гл.ФДГ и Г-6-ФДГ. Эти ферменты находятся в цито- плазме лимфоцитов преимущественно в виде гранул, и только 9-11% клеток интенсивно окрашены диформа- заном. Обращают на себя внимание близкие значения активности данных ферментов, что может указывать на определенную сбалансированность цитохимического статуса лимфоцитов у КЖ группы 1-й серии. Это пред- положение в некоторой мере подтверждается тем, что показатели СДГ/ЛДГ, СДГ/α-гл.ФДГ, Г-6-ФДГ/ЛДГ, Г-6- ФДГ/α-гл. ФДГ оказались близкими к 1 (их значения соответственно равны 0,99; 1,03; 0,96; 0,99). Через 20 мин после острого воздействия пере- грузок до 75-86% увеличилось относительное со- держание лимфоцитов, что может свидетельствовать о развитии у ЭЖ реакции активации (реакция на раз- дражитель средней силы). Описанный тип реакции сочетается с высокой устойчивостью ЭЖ к острому воздействию перегрузок. Цитоспектрофотометрически после гравитаци- онного воздействия не выявлено изменений актив- ности СДГ, ЛДГ, α-гл.ФДГ. Отмечена лишь тенденция к увеличению активности СДГ и Г-6-ФДГ (табл. 1) По- казатели СДГ/ЛДГ, СДГ/α-гл.ФДГ, Г-6-ФДГ/α-гл.ФДГ составили соответственно 1,1; 1,01; 1,06; 1,09, то есть практически не отличаются от контрольного уровня. Таким образом, в ответ на острое воздействие перегрузок происходит изменение содержания лим- фоцитов крови без выраженных преобразований в ферментативном статусе этих клеток. Увеличение содержания лимфоцитов обусловлено выходом из их депо в процессе воздействия. На это же указывает и описанное в литературе увеличение общего содержа- ния лейкоцитов крови (в том числе и лимфоцитов) под действием гравитационных перегрузок [6]. Механизм такого рода реакций - нервно-рефлек- торный. Видимо, требуется время для того, чтобы гормоны вызвали изменение активности ферментов. Таблица 1 Активность окислительных ферментов в лимфоцитах периферической крови крыс 1-й серии после острого воздействия гравитационных перегрузок, у. е. опт. плотн. Группа Статистич. показатели СДГ ЛДГ α-гл.ФДГ Гл-6-ФДГ КЖ X±m 0,332±0,010 0,355±0,006 0,342±0,018 0,314±0,010 КЖ Me±m 0,346±0,12 0,354±0,008 0,332±0,018 0,306±0,012 ЭЖ X±m 0,359±0,003 0,331±0,005 0,358±0,006 0,351±0,001* ЭЖ Me±m 0,358±0,004 0,330±0,005 0,365±0,006 0,346±0,002 Примечание: Х - среднее; m - ошибка средней; Ме - медиана; * - р<0,05. ВЕСТНИК РОССИЙСКОЙ ВОЕННО-МЕДИЦИНСКОЙ АКАДЕМИИ 2 (62) - 2018 161 Экспериментальные исследования Данные, полученные нами, подтверждают точку зре- ния о том, что для действия гормонов необходимо более длительное время, чем для развития эффектов от прямых нервных влияний. У КЖ 2-й серии (возраст 21 неделя) содержание лимфоцитов периферической крови составляло 65-73%, не отличаясь, таким образом, от данных, по- лученных в контроле 1-й серии. Более существенные изменения отмечены в ферментном статусе лимфо- цитов. Так, по сравнению с КЖ 1-й серии произошло уменьшение активности ферментов, за исключением Г-6-ФДГ (табл. 2). Причем наиболее низкими оказа- лись значения активности ЛДГ и α-гл.-ФДГ. Снижение же активности СДГ является умеренным. Неравно- мерное уменьшение активности ферментов привело к изменению показателей СДГ/ЛДГ, СДГ/αгл.-ФДГ, Г-6-ФДГ/ЛДГ, Г-6-ФДГ/α-гл.-ДГ. В отличие от КЖ 1-й серии, у которых значения этих показателей близки к 1, у КЖ 2-й серии СДГ/ЛДГ=1,7, а СДГ/α-гл.-ФДГ = 1,25, что может свидетельствовать о перестройках в лимфоцитах, направленных на относительное усиле- ние процессов митохондриального метаболирования. Установлено также выраженное увеличение значе- ний показателей Г-6-ФДГ/ЛДГ до 2,11 и Г-6-ФДГ/α-гл- ФДГ до 1,7. Это свидетельствует о том, что процессы пластического обмена играют наиболее важную роль во внемитохондриальных структурах лимфоцитов пе- риферической крови КЖ 2-й серии опытов. Через 20 мин после хронического воздействия перегрузок у ЭЖ 2-й серии отмечено снижение содер- жания лимфоцитов до 35-43%. Эти результаты согла- суются с данными Н.А. Юрина [6], который наблюдал лимфопению у животных, подвергшихся воздействию гравитационных перегрузок. Такое содержание лимфо- цитов находится на уровне, близком к стрессу. Ферментный статус лимфоцитов также имеет существенные отличия. Основное из них - это значительное повышение активности резервного фермента - ЛДГ - при некотором снижении активности СДГ (см. табл. 2). В результате этого отношение СДГ/ЛДГ уменьшилось от 1,7 (контроль) до 0,62. Следовательно, действие перегрузок на протяжении 13 недель привело к выраженной интенсификации гликолиза в лимфоцитах. В сочетании с уменьшением количества этих клеток установленные изменения могут свидетельствовать о катаболизирующем влиянии на лимфоциты компонентов плазмы крови. В этот период в мазках крови виден клеточный детрит. Известно, что метаболизм клеток крови подвер- жен влиянию различных гормонов. В 1-й и 2-й сериях опытов наблюдалась картина выброса гранул катехо- ламинов из клеток мозгового вещества надпочечников в просвет синусоидов. Именно здесь и появляется первая возможность взаимодействия гормонов моз- гового вещества надпочечников с клетками крови. Из надпочечника адреналин и норадреналин вме- сте с кровью через центральную надпочечниковую вену оттекает в почечную, а затем в заднюю полую вену [4]. Это обеспечивает проникновение катехола- минов практически во все ткани организма. Начало дистрофических и деструктивных про- цессов в нервной ткани происходит параллельно с резкой интенсификацией гликолиза - более чем в два раза, а также снижением показателя СДГ/ЛДГ в лим- фоцитах периферической крови. Уменьшение этого показателя (до еще более низких значений) также было отмечено в нейроцитах чревного узла животных 2-й серии опытов. Таким образом, из числа используемых показа- телей отношение СДГ/ЛДГ наиболее чутко отражает процессы, развивающиеся в нейроцитах чревного узла, коре надпочечников и лимфоцитах перифе- рической крови в условиях гипергравитации. В периферической крови крыс в возрасте 26 недель, не подвергавшихся воздействию гравитационных перегрузок, содержание лимфоцитов находится на уровне КЖ 1-й серии. Цитоспектрофотометрически отмечается наи- более высокий уровень активности исследуемых ферментов по сравнению с отмеченным у КЖ первых двух серий опытов. Это повышение показателей про- исходит неравномерно и больше касается внемито- хондриальных ферментов. Так, если активность СДГ по сравнению со 2-й серией возросла в 2,4 раза, то активность ЛДГ - более чем в 9 раз. После хронического воздействия перегрузок на протяжении 26 недель в 1,5 раза снизилась активность СДГ, чуть меньше - α-гл.ФДГ, а гл-6-ФДГ и активность ЛДГ при этом незначительно повышались (табл. 3). Достоверное (р<0,01) увеличение СДГ в группе ЭЖ по сравнению с КЖ указывает на выраженное от- ставание у них интенсивности процессов митохондри- ального окисления от уровня гликолиза. Причем этот сдвиг интенсивности окисления в сторону гликолиза осуществляется по мере увеличения числа вращений животных на центрифуге. Если после острого воз- Активность окислительных ферментов в лимфоцитах периферической крови крыс 2-й серии Таблица 2 после хронического воздействия гравитационных перегрузок на протяжении 13 недель, у. е. опт. плотн. Группа Статистич.показатели СДГ ЛДГ α-гл.ФДГ Гл-6-ФДГ КЖ X±m 0,269±0,014 0,168±0,017 0,215±0,020 0,366±0,002 КЖ Me±m 0,270±0,05 0,164±0,007 0,205±0,014 0,366±,011 ЭЖ X±m 0,209±0,057* 0,345±0,081** 0,284±0,006* 0,400±0,001* ЭЖ Me±m 0,209±0,052 0,307±0,028 0,279±0.011 0,402±0,008 Примечание: * - р<0,05; ** - р<0,01. 162 2 (62) - 2018 ВЕСТНИК РОССИЙСКОЙ ВОЕННО-МЕДИЦИНСКОЙ АКАДЕМИИ Экспериментальные исследования Таблица 3 Активность окислительных ферментов в лимфоцитах периферической крови крыс 3-й серии после хронического воздействия гравитационных перегрузок на протяжении 26 недель, у. е. опт. плотн. Группа Статистич. показатели СДГ ЛДГ α-гл.ФДГ Гл-6-ФДГ КЖ X±m 0,704±0,007 1,021±0,006 0,845±0,088 0,830±0,110 КЖ Me±m 0,698±0,010 1,043±0,085 0,890±0,085 0,790±0,281 ЭЖ X±m 0,494±0,046* 1,136±0,019** 0,777±0,0164* 0,571±0,085* ЭЖ Me±m 0,490±0,047 1,164±0,022 0,799±0,0196 0,563±0,079* Примечание: * - р<0,05; ** - р<0,01. действия перегрузок различия между активностью СДГ в контроле и опыте отсутствуют, то после влияния данного экстремального фактора на протяжении 13 недель различие становится достоверным (р<0,05), а через 26 недель эксперимента достоверность уве- личивается (р<0,01). Еще более наглядной является динамика отноше- ния СДГ/ЛДГ: в отличие от 1-й серии, когда показатель был близок к 1, во 2-й и особенно в 3-й сериях значе- ния его резко уменьшились. Так, после хронического воздействия перегрузок на протяжении 26 недель показатель СДГ/ЛДГ уменьшился до 0,33. Таким образом, нарастание клеточной гипоксии с угнетением митохондриального окисления связано с увеличением числа воздействий, то есть является кумулятивным. При этом начиная со 2-й серии и особенно в 3-й в мазках крови хорошо виден клеточ- ный детрит, который, безусловно, свидетельствует о деструкции клеток, хотя трудно поддается количе- ственному учету. Из всех рассмотренных абсолютных и относитель- ных показателей наиболее информативным является отношение СДГ/ЛДГ. Уменьшение его значения до уровня ниже 0,6 сопровождается появлением кле- точного детрита, увеличением числа интенсивно окрашенных клеток в мазках периферической крови. Выявлено, что уменьшение отношения СДГ/ЛДГ лимфоцитов в динамике воздействия гравитационных перегрузок происходит раньше заметных деструктивных процессов не только в клетках периферической крови, но также в органах симпатоадреномедулярной (нейроциты чревного узла и хромаффиноциты мозгового вещества надпочечника) и гипофиз-адренокортикальной систем (клетки коры надпочечников). Более того, нередко актив- ность СДГ, ЛДГ и Г-6-ФДГ, а также в меньшей степени α-гл.ФДГ изменялась однонаправленно в клетках вы- шеперечисленных органов и лимфоцитах крови после хронического воздействия перегрузок. Примером может служить динамика показателя СДГ/ЛДГ(рис. 1) Отмеченные факты послужили основанием для исследования динамики интегративных связей между ферментным статусом лимфоцитов крови и клеток органов, в которых изменения были выражены в наибольшей степени (клетки коркового и мозгового вещества надпочечников, нейроциты чревного узла) после острого и хронического воздействия на орга- низм гравитационных перегрузок. Помимо теоретического интереса, такие иссле- У.е. и Рис. 1. Динамика изменения СДГ/ЛДГ в лимфоцитах периферической крови и нейроцитах чревного узла крыс после острого и хронического воздействия гравитационных перегрузок дования приобретают и практическую целесообраз- ность, если учесть, что лимфоцит периферической крови является доступным объектом изучения не только у животных, но и у человека. Установлено, что наибольший процент сильных кор- реляционных зависимостей выявлен между активностью СДГ, ЛДГ, α-гл.ФДГ и гл-6-ФДГ лимфоцитов и активностью этих же ферментов в клетках надпочечника, а также нейро- цитах чревного узла (рис. 2). Именно эти связи отражают выраженные интегративные процессы между исследуе- мыми ферментами лимфоцитов и внутренних органов. У контрольных и экспериментальных животных в воз- расте 8, 21 и 34 недель обнаруживаются существенные корреляционныесвязимеждуактивностьюокислительных ферментов лимфоцитов периферической крови и клеток различных зон надпочечников, нейроцитов чревного узла, однако у каждой из возрастных групп корреляции имеют свои особенности. В группе КЖ 1-й серии установлены корреляци- онные связи активности СДГ лимфоцитов и клеток клубочковой зоны коркового вещества надпочечни- ков, а также хромаффиноцитов мозгового вещества надпочечника. Активность гл.-6-ФДГ лимфоцитов коррелирует с активностью этого же фермента в клет- ках пучковой и сетчатой зон надпочечников. Кроме ВЕСТНИК РОССИЙСКОЙ ВОЕННО-МЕДИЦИНСКОЙ АКАДЕМИИ 2 (62) - 2018 163 Экспериментальные исследования Рис. 2. Распределение суммарных значений коэффициентов корреляции между активностью ферментов лимфоцитов, клеток надпочечников и нейроцитов узла в условиях острого и хронического стресса того, существует сильная положительная связь между активностью α-гл.-ФДГ исследуемых клеток крови и мозгового вещества надпочечников. У этих же животных отмечено наличие корреляци- онной зависимости между активностью СДГ, гл-6-ФДГ и ЛДГ и этими же ферментами нейроцитов чревного узла. Поскольку указанные связи имеют место между одними и теми же ферментами, назовем их условно «одноферментными». Помимо «одноферментных», обнаружены корреляционные зависимости между различными ферментами, например активностью СДГ лимфоцитов и Г-6-ФДГ клеток пучковой зоны коркового вещества надпочечников. После острого воздействия гравитационных пере- грузок увеличивается число положительных связей между активностью всех четырех дегидрогеназ лим- фоцитов и СДГ хромаффиноцитов мозгового веще- ства надпочечников. Установленные у КЖ в возрасте 8 недель «одноферментные» связи сохраняются, что указывает на их высокую устойчивость при остром воздействии данного экстремального фактора. Появление же новых связей между СДГ лимфо- цитов и СДГ клеток сетчатой зоны надпочечников, а также зависимостей на межферментном уровне указывает на усиление интеграции ферментных пре- вращений в клетках надпочечников и лимфоцитах крови. У этих же животных 1-й серии сохраняются «одноферментные» связи между СДГ, а также Г-6- ФДГ лимфоцитов и нейроцитов чревного узла. В то же время появляется новая корреляционная зависимость между ЛДГ клеток крови и нейроцитов. В группе КЖ 2-й серии обнаружены «межфер- ментные» связи активности СДГ лимфоцитов с ЛДГ пучковой зоны надпочечников и нейроцитов чревного сплетения, а также «одноферментная» зависимость между активностью СДГ исследуемых клеток крови и нейроцитов. С активностью Г-6-ФДГ лимфоцитов кор- релирует активность СДГ хромаффиноцитов мозгово- го вещества надпочечников и клеток сетчатой зоны. Таким образом, наибольшее число корреляцион- ных связей с клетками надпочечников и нейроцитов чревного узла обнаруживает активность СДГ лимфо- цитов. Это указывает на исключительно важную роль этого фермента в поддержании ферментного статуса клеток крови (лимфоцитов) и исследуемых органов у контрольных животных. Воздействие гравитационных перегрузок на протяжении 13 недель приводит к изме- нению структуры корреляционных связей дегидрогеназ лимфоцитов с активностью этих ферментов в клетках надпочечников чревного узла. В отличие от контроля, эти зависимости наблюдаются главным образом с активностью ЛДГ лимфоцитов. Отме- чены положительные связи активности этого фермента клеток крови и клеток мозгового и всех трех зон коркового вещества надпочечников. Наблюдаемая положительная корреляционная зависимость между ЛДГ и 6-гл.-ФДГ надпочечников, а также активностью ЛДГ лимфоцитов дает право рассчитывать на однонаправленное измене- ние их активности у животных, подверженных хроническо- му (на протяжении 13 недель) воздействию перегрузок. При этом активность ЛДГ лимфоцитов может отражать направление сдвига активности этого же фермента в клетках коркового и мозгового вещества надпочечника. Наличие положительной корреляционной связи между ЛДГ лимфоцитов и α-гл.ФДГ клеток клубочко- вой, пучковой и сетчатой зон коры надпочечников и нейроцитов чревного сплетения несет дополнительную информацию для косвенного суждения об изменении интеграции процессов гликолиза в этих органах. Ранее нами [3] было показано, что при действии перегрузок на организм животных 2-й серии в над- почечниках и чревном сплетении раньше, чем, напри- мер, в краниальном симпатическом узле, появляются деструктивные процессы в клеточных элементах (кариопикноз, атрофия), которым предшествует, а затем и сопутствует интенсификация гликолиза в сохранившихся клеточных элементах. Поэтому есть основание полагать, что лимфоцит чутко реагирует интенсификацией гликолиза на изменение обменных и деструктивных процессов в тех органах, в которых эти нарушения происходят. Параллельно с усилением анаэробных процессов в различных зонах коры надпочечников отмечалось очаго- вое снижение активности митохондриальной СДГ. В связи с этим наличие положительной связи СДГ лимфоцитов с активностью этого фермента в клетках клубочковой и пучковой зон коры надпочечников дает основание исполь- зовать активность сукцинатдегидрогеназы для суждения о снижении процессов митохондриального окисления в клетках надпочечников. Кроме положительных корреляционных связей, вы- явлены также и отрицательные значения коэффициентов корреляции активности отдельных ферментов. У КЖ 3-й серии наблюдаются положительные кор- реляционные связи между активностью СДГ лимфо- цитов и клеток мозгового вещества надпочечников, а также пучковой и сетчатой зон коры надпочечников. Кроме того, отмечена подобная зависимость актив- 164 2 (62) - 2018 ВЕСТНИК РОССИЙСКОЙ ВОЕННО-МЕДИЦИНСКОЙ АКАДЕМИИ Экспериментальные исследования ности Г-6-ФДГ клеток крови с данным показателем клубочковой и пучковой зон. Из ферментов гликолиза только ЛДГ аденоцитов пучковой зоны обнаруживает связь с активностью СДГ и ЛДГ лимфоцитов. Не удалось обнаружить связей ферментов анаэроб- ного окисления лимфоцитов с одноименными энзимами нейроцитов чревного узла интактных животных. После хронического воздействия гравитационных перегрузок на протяжении 26 недель по мере возрас- тания гипоксии в тканях увеличивается также количество положительных корреляционных связей между актив- ностью ЛДГ лимфоцитов и нейроцитов чревного узла. Связь между лимфоцитами и клетками надпочечников остается такой, какой она была у животных 2-й серии. Подобный факт расценен нами как свидетельство ста- бильной генерализации гликолиза - основного пути окисления в регуляторных органах и клетках крови крыс, подверженных хроническому воздействию гра- витационных перегрузок. При этом, если использовать терминологию некоторых авторов, ферменты лимфо- цитов крови могут быть использованы в качестве свое- образного «зеркала», в котором отражаются изменения ферментного статуса клеток органов [5]. Выявленные в эксперименте закономерности корреляционных зависимостей между ферментным статусом лимфоцитов и клеток надпочечников, а также нейроцитов чревного узла дают основание для про- ведения исследования ферментного статуса лимфо- цитов периферической крови у лиц, систематически подвергающихся воздействию перегрузок в полете. Выводы Цитохимический статус лимфоцитов периферической крови крыс характеризуется наличием в цитоплазме этих клеток ферментов, отражающих процессы окислительно- го метаболирования в важнейших биохимических циклах: дыхательном (митохондриальное окисление в цикле трикарбоновых кислот), пентозном гликолизе. Изменения активности СДГ, ЛДГ, α-гл-ФДГ при ОГС характеризуются некоторым усилением процессов митохондриального окисления, а в условиях ХГС - стабилизацией гликолиза. Во всех сериях эксперимента выявлена корреляци- онная зависимость между активностью дегидрогеназ лимфоцитов крови и аналогичными показателями клеток мозгового вещества и коры надпочечников, а также нейроцитов чревного узла. При ОГС преобла- дают значимые связи между активностью СДГ и гл-6 ФДГ. Для ХГС характерными являются существенные связи между ферментами гликолиза. Появлению деструктивных процессов в органах симпатоадреномедулярной и гипофиз-адренокор- тикальной систем предшествует снижение показа- теля отношения активности СДГ и ЛДГ (СДГ/ЛДГ) в лимфоцитах периферической крови, что позволяет использовать его в качестве перспективной пробы для выявления изменений в организме при систематиче- ском воздействии перегрузок в режимах, присущих современному воздухоплаванию.×
Об авторах
П С Пащенко
Военно-медицинская академия им. С.М. КироваСанкт-Петербург
Б В Рисман
Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова
Email: bobdoc@inbox.ru
Санкт-Петербург
В Б Дергачев
Военно-медицинская академия им. С.М. КироваСанкт-Петербург
Список литературы
- Духова, З.Н. Влияние внутривенного гексиналового наркоза на активность ферментов лимфоцитов и различных органов в эксперименте / З.Н. Духова, О.Д. Кузьминов // Актуальные вопросы клинической медицины, гигиены труда и органи- зации здравоохранения. - Караганда, 1972, - С. 120-122.
- Катинас, Г.С., Полонский Ю.З. К методике анализа количе- ственных показателей цитологии / Г.С. Катинас, Ю.З. По- лонский // Цитология. - 1970. - Т. 12, вып. 3. - С. 399-408.
- Пащенко, П.С. Особенности способов и методов выявления клеточной дезадаптации тканей органов регуляторных си- стем организма в экстремальных условиях / П.С. Пащенко // Регуляторные системы организма в условиях гравитацион- ного стресса. - Салехард: Красный Север, 2007. - С. 22-32.
- Сапин, М.Р. Сосуды надпочечных желез / М.Р. Сапин. - М.: - Медицина. - 1974. - 208 с.
- Соколов, В.В. Цитохимия ферментов в профпатологии / В.В. Соколов, Р.П. Нарциссов, А.А. Иванова. - М.: Медицина, 1975. - 120 с.
- Юрина, Н.А. Морфология и цитохимия стрессорной реакции крови при действии гравитационных перегрузок / Н.А. Юрина // Международный конгресс анатомов: тез. докл. - М., 1970. - С. 231.
Дополнительные файлы
![](/img/style/loading.gif)