Том 18, № 4 (2020)

Прогресс в области клинических исследований и медицины способствовал существенному снижению смертности в мире. Политика развитых стран в настоящее время направлена на увеличение продолжительности жизни и улучшение ее качества. Как следствие, современный мир уже столкнулся с проблемами старения и возрастных заболеваний. Нейродегенеративные заболевания являются одной из основных медицинских проблем, свойственных для «стареющей» популяции людей. В качестве одного из направлений разработки новых подходов лечения нейродегенеративных заболеваний рассматриваются стволовые клетки в составе биомедицинских клеточных продуктов (препаратов на основе жизнеспособных клеток человека), которые могли бы оказывать регенерирующую функцию на нейроны головного и спинного мозга или использоваться для заместительной терапии. В работе описываются особенности использования и разработки препаратов на основе стволовых клеток, перспективных для лечения таких нейродегенеративных заболеваний, как рассеянный склероз, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и латеральный амиотрофический склероз, а также проводимые в мире клинические исследования с использованием мезенхимальных стволовых клеток из пуповинной крови, костного мозга, нейрональных и эмбриональных стволовых клеток для лечения нейродегенеративных заболеваний. В настоящее время проводимые клинические исследования препаратов на основе жизнеспособных клеток человека для лечения нейродегенеративных заболеваний преимущественно характеризуются доказанной безопасностью их применения и проявляемой специфической активностью на уровне иммуномодулирующего эффекта. Учитывая ранние стадии клинических исследований с участием ограниченного количества пациентов, преимущественно, в одноцентровой локализации, данные по эффективности использования регенеративного потенциала стволовых клеток для лечения нейродегенеративных заболеваний предстоит получить в будущем.

Актуальными для современной геронтологии являются не только проблемы увеличения продолжительности жизни, но и значительного улучшения ее качества. Для этого необходимо решать задачи ранней диагностики и таргетной профилактики возраст-ассоциированных заболеваний. Рассматриваются данные об одном из наиболее часто встречающихся маркеров старения - β-микроглобулине (β2М) плазмы крови. Представлены сведения о строении, свойствах и функциях β2М, содержание которого увеличивается при старении организма. В экспериментах показано, что концентрация β2М увеличивается в гиппокампе старых животных, а также молодых гетерохронных парабионтов. Обнаружена положительная корреляция между концентрацией β2М и степенью нарушения когнитивных функций, деменции. Большую роль вМ играет в развитии заболеваний сердечно-сосудистой системы. У больных с высоким уровнем β2М в сыворотке крови более тяжело протекала ИБС, сильнее поражались сонные артерии и периферические сосуды. Показана положительная корреляция тяжести и продолжительности сахарного диабета с высокой концентрацией β2М. Кроме того вМ стимулирует рост и метастазирование различных видов рака. Определение концентрации β2М в сыворотке крови имеет большое прогностическое значение для предиктивной медицины и профилактики патологии, ассоциированной с возрастом.

Введение. Для оценки фармакокинетических параметров новых лекарственных средств необходима разработка аналитических методов определения их содержания в биологических объектах. Цель исследования. Разработка и валидация методики высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с масс-детектированием нового производного вальпроевой кислоты и 1,3,4-тиадиазола в головном мозге крыс. Методы. Объектом исследования явился новый антиконвульсант N-(5-этил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-пропилпентанамид (вальпразоламид). Определение вальпразоламида осуществляли ВЭЖХ-масс-спектрометрическим методом. Оценивали селективность, перенос пробы, линейность, правильность, прецизионность, матричный эффект, степень извлечения вальпразоламида. Результаты. Разработана методика ВЭЖХ-масс-спектрометрического определения вальпразоламида в гомогенатах головного мозга крыс (аналитическая колонка Zorbax Eclipsi plus C18 4 мкм 2,0*150 мм, температура 30°С; подвижная фаза - ацетонитрил и вода деионизированная со следующим профилем градиента: 0-1-я минута - 10% раствор ацетонитрила; 1-5-я минута - линейное повышение концентрации ацетонитрила до 90%; 5-6-я минута - изократический участок с концентрацией ацетонитрила 90%; 6-10-я минута - кондиционирование колонки 10% ацетонитрилом; скорость потока подвижной фазы - 0,6 мл/мин; объем вводимой пробы - 10 мкл; общее время элюирования - 10 мин, масс-детектирование при отрицательной поляризации). Значение MRM-перехода вальпразоламида составило m/z 254,0 → m/z 167,1. Заключение. Аналитический диапазон методики составляет 1-1000нг/мл. Разработанная методика является селективной, точной, прецизионной и линейной, по всем параметрам соответствует требованиям по валидации биоаналитических методик.

Введение. Специфическая коагуляционная активность фактора свертывания крови УПа зависит от наличия в молекуле данного белка N-ацетилнейраминовой (сиаловой) кислоты и фосфатных остатков. В связи с этим в качестве одного из критериев эффективности и безопасности лекарственных препаратов, содержащих данный белок, необходимо подтверждение подлинности профиля гликозилирования. Вместе с тем возможная вариабильность посттрансляционных модификаций требует индивидуального подхода к их оценке в соответствии с требованиями и рекомендациями по сравнению биоподобных препаратов. Материал и методы. В качестве объектов исследования использовали оригинальный препарат «НовоСэвен», биоподобный лекарственный препарат «Коагил-VII» и европейский референсный образец Human coagulation factor Vila (rDNA) CRS. Для анализа олигосахаридной части применяли методы анионообменной хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии гидрофильного взаимодействия с флюоресцентным и масс-спектрометрическим детектированием. Результаты. В ходе исследования установлен основной набор модификаций молекул рекомбинантного фактора свертывания крови Vila, представленный комплексными биантенными олигосахаридами с незначительным присутствием триантенных структур. Для биоподобного лекарственного препарата наиболее характерной является модификация дисиалированной галактозилированной комплексной группой с одним остатком фукозы. Заключение. Оценка профиля N-гликозилирования рекомбинантного фактора свертывания крови Vila, основанная на сравнительном анализе биоподобного препарата, оригинального препарата и стандартного образца CRS выявила различия в количественном содержании гликанов при общем совпадении времен удерживания основных пиков всех образцов. Масс-спектрометрическое исследование позволило осуществить структурную интерпретацию полученных хроматографических данных. На примере биоподобного препарата показана необходимость использования при подтверждении подлинности гликопрофиля в качестве образца сравнения аттестованного установленным образом стандартного образца предприятия.

Введение. Основными функциями α1-антитрипсина (А1АТ) являются ингибирование эластазы нейтрофилов, а также контроль секреции фактора некроза опухоли- α (TNF α). Противовоспалительные свойства А1АТ проявляются уменьшением миграции лейкоцитов и пролиферации Т-лимфоцитов путем увеличения количества циклического аденозинмонофосфата (цАМФ) в клетках. Цель исследования. Изучение уровня А1АТу больных хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ) на разных стадиях течения основного заболевания, а также в зависимости от вида инфекционных осложнений и локализации патологического процесса. Методы. Проанализированы данные, полученные у 177 пациентов с ХЛЛ в динамике. Методы исследования этиологических агентов инфекционных осложнений ХЛЛ применяли согласно Приказу от 22.04.85 №535 «Обунификации микробиологических (бактериологических) методов исследования применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений». Для обнаружения антител к Varicella zoster, Cytomegalovirus использовали иммуноферментный анализ (ИФА). Определение концентрации А1АТ осуществляли также методом ИФА с применением тестовых систем IDK α1-Antitrypsin Clearance ELISA фирмы Immundiagnostik AG (Bensheim, Германия). Результаты. Показано умеренное повышение концентрации А1АТ при бактериальных инфекциях. При вирусных и грибковых осложнениях выявлено значительное увеличение содержания А1АТ по сравнению с нормой. Установлено достоверное различие А1АТ сыворотки при лечении инфекционных осложнений с исходными показателями (р<0,001): уровень А1АТ после начала лечения инфекционных осложнений увеличивался на 24,7% при бактериальных осложнениях, на 9,8% - при вирусных инфекциях и на 7,0% - при микозах. Стабилизация процесса и нивелирование клинических проявлений инфекции приводили к снижению уровня А1АТ в 1,5-2 раза. Заключение. Механизм увеличения уровня А1АТ под влиянием препаратов может быть связан как с гибелью возбудителей, при разрушении которых выделяются пирогенные вещества и эндотоксины, запускающие механизмы развития воспалительных реакций, на которые организм реагирует большим выделением А1АТ, так и гепатотоксичным действием химиотерапии. Таким образом, определение уровня А1АТ может быть использовано для контроля эффективности проводимой терапии инфекционных осложнений у больных ХЛЛ.