INTENSITY OF FREE RADICAL PROCESSES AND SUPEROXIDE DISMUTASE ACTIVITY IN PATIENTS WITH DRUG-INDUCED HEPATITIS UPON COMBINED THERAPY WITH MELAXEN AND EPIFAMINE

Full Text

ЦЕЛЬ РАБОТЫ. Сравнительная характеристика способности мелаксена и эпифамина влиять на интенсивность свободнорадикального окисления биосубстратов и активность супероксиддисмутазы (СОД) у больных с лекарственным гепатитом, развивающимся на фоне приема противотуберкулезных препаратов. Лекарственные гепатиты у больных туберкулезом относят к категории преимущественно токсических побочных реакций полихимиотерапии. Важнейшим патогенетическим фактором в развитии токсического гепатита является действие активных форм кислорода (АФК) на клеточный гомеостаз, что приводит к развитию окислительного стресса, в основе которого лежит дисбаланс между интенсивностью свободнорадикального окисления (СО) и активностью антиоксидантной системы (АОС) организма. Негативные эффекты АФК в значительной степени подавляются под действием АОС организма, к ферментативному звену которой относится супероксид-дисмутаза (СОД; КФ1. 15. 1. 1.), катализирующая реакцию дисмутации супероксиданионрадикалов с образованием кислорода и пероксида водорода [3]. Имеются данные об антиоксидантных свойствах гормона эпифиза и экстрапинеальных тканей — мелатонина [5]. В связи с этим приобретает актуальность исследование антиоксидантной активности эпифамина и мелаксена у больных лекарственным гепатитом. Эпи-фамин — пептидный биорегулятор, тропный к эпитала-мо-эпифизарной области, он относится к классу цитоме-динов, способных обеспечивать коррекцию содержания мелатонина в организме. Мелаксен является лекарственным препаратом, имеющем в своем составе мелатонин. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ В клиническое исследование было включено 105 человек с лекарственным гепатитом, развивающимся вследствие комплексного приема 4—5 противотуберкулезных препаратов (изониазид, стрептомицин, ри-фампицин, пиразинамид, этамбутол, микобутин). Среди них 62 мужчины (61 %) и 43 женщины (39 %). Возраст больных составлял от 21 до 75 лет: средний возраст— (45,2 ± 7,3) года. Все пациенты были больны инфильтра-тивным туберкулезом легких. Средняя продолжительность заболевания составляла (2,6 ± 0,4) месяца. Диагноз лекарственного гепатита был поставлен на основании клинических признаков заболевания, биохимического исследования крови, данных ультразвукового исследования печени. Критериями исключения из исследования являлись: вирусные гепатиты, злокачественные новообразования, острый инфаркт миокарда, острое нарушение мозгового кровообращения. Больные были поделены на 3 группы. Первая группа пациентов (35 человек) находилась на базисном лечении гепатопротекторами (карсил, эссенциале). Вторая группа пациентов (39 человек) дополнительно к гепатопротекторам получала эпифамин («Клиника Института биорегуляции и геронтологии», Россия; удостоверение качества и безопасности № 103, регистрационное удостоверение № 004471.Р643.04.2003) по 1 таблетке (10 мг) 3 раза в день за 10—15 минут до еды в течение 7 дней. Третья группа пациентов (31 человек) Выпуск 4 (44). 2012 31 дополнительно к гепатопротекторам получала мелаксен (Unifarm, Inc., США) по 1 таблетке, содержащей 3 мг мелатонина, 1 раз в день за 30-40 минут перед сном в течение 10 дней. Контрольную группу составили 65 практически здоровых лиц в возрасте от 21 до 52 лет с нормальными показателями общего и биохимического анализов крови. Интенсивность СО определяли на биохемилю-минометре БХЛ-07 с программным обеспечением. Кинетическую кривую биохемилюминесценции регистрировали в течение 30 секунд и определяли следующие параметры: светосумму хемилюминесценции (S), интенсивность вспышки (Imax) и величину тангенса угла наклона кинетической кривой (tg α2). Активность СОД определяли на спектрофотометре Hitachi U-1900 (Япония) по ингибированию скорости восстановления нитросинего тетразолия в неэнзиматической системе феназинмета-сульфата и НАДН при длине волны 540 нм [2]. Активность фермента выражали в ферментативных единицах (Е) в расчете на мл сыворотки и в виде удельной активности. Общий белок определяли унифицированным методом по биуретовой реакции [1]. Активность аланина-минотрансферазы (АлАт) определяли с помощью набора реактивов «Витал Диагностик» (Санкт-Петербург). При статистической обработке использовали стандартные методы вариационной статистики (расчет средних значений (М), ошибка средних значений (m), f-критерия Стьюдента) и непараметрического теста Вилкок-сона с использованием прикладных программ «STATISTICA 6.0», достоверными считались различия при р < 0,05. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Состояние функции печени у больных 1, 2 и 3-й групп до лечения по сравнению с контрольной группой характеризовалось возрастанием уровня активности АлАт в 1,8, 2,1 и 1,7 (p < 0,05) раза соответственно по сравнению с верхней границей нормы [189 нмоль (с. л.)]. Данный биохимический показатель подтверждает, что на фоне приема противотуберкулезных препаратов у больных происходило нарушение метаболизма и повреждение гепатоцитов. После стандартного лечения гепатопротекторами (карсил и/или эссенциале) происходило уменьшение активности АлАт в среднем в 2,2 (p < 0,05) раза. В сыворотке крови 2-й группы пациентов, принимавших помимо гепатопротекторов эпифамин, происходило снижение уровня АлАт в 2,3 (p < 0,05) раза, а после комбинированной терапии с мелаксеном — в 3,1 (p < 0,05) раза. Таким образом, включение в стандартную терапию эпифамина и мелаксена усиливало гепатопротекторное действие, по-видимому, за счет антиоксидантного эффекта. В сыворотке крови больных 1, 2 и 3-й групп перед применением гепатопротекторов — карсила и/или эссенциале, такие параметры БХЛ, как S и Imax, характеризующие интенсивность СО, были выше в среднем в 2,5 (p < 0,05) и 1,9 (p < 0,05) раза соответственно, по сравнению с нормой. Это указывает на то, что развивающееся при приеме противотуберкулезных препаратов лекарственное поражение печени сопровождалось значительной интенсификацией СО. Такой показатель, как tg α2, отражающий степень активности АОС организма, был ниже в 1,4 (p < 0,05) раза по сравнению с соответствующим значением в норме, что свидетельствовало о снижении антиоксидантного потенциала организма больных. После проведения лечения с применением гепатопротекторов наблюдалось уменьшение S в 1,5 раза и Imax в 1,3 (p < 0,05) раза, при этом tg α2 возрастал в среднем на 15 % (p < 0,05) по сравнению с результатами до лечения. Таким образом, на фоне базисной терапии происходило снижение выраженности окислительного стресса, за счет антиокислительного эффекта силимарина и эссенциальных фосфолипидов, входящих в состав гепатопротекторов [4, 6]. После комплексного лечения гепатопротекторами и эпифамином в сыворотке крови больных 2-й группы происходило уменьшение как S, так и Imax в среднем в 1,6 (p < 0,05) раза. Величина tg α2 увеличивалась на 21 % (p < 0,05) по сравнению с результатами до лечения. По-видимому, при действии эпифамина происходила коррекция содержания мелатонина и повышение антиоксидантного статуса пациентов. В 3-й группе больных после комбинированной терапии с мелаксеном параметры S и I уменьшались в 1,6 и 1,7 ~ ~ max J ’ ’ (p < 0,05) раза соответственно, по сравнению с результатами, полученными до лечения. Величина tg α2 увеличивалась на 36 %, что выше показателей, полученных в первой и второй группах. Очевидно, мелатонин, входящий в состав препарата, оказывал положительное действие на свободнорадикальный гомеостаз и защиту гепатоцитов от действия АФК. При лекарственном гепатите активность СОД, выраженная в Е/мл сыворотки крови, во всех группах больных увеличивалась среднем в 1,3 (p < 0,05) по сравнению с нормой (рис. А). Удельная активность фермента повышалась в меньшей степени — в 1,2 (p < 0,05) раза (рис. Б). Возрастание активности данного фермента может иметь адаптивное значение в условиях повышенной выработки АФК [4]. После проведения базисной терапии активность СОД, выраженная как в Е/мл сыворотки крови, так и в виде удельной активности, достоверно не изменялась. При комбинированной терапии с эпифамином у больных 2-й группы происходило возрастание активности СОД, выраженной в Е/мл сыворотки крови, на 20,0 % (p < 0,05), удельной активности — на 16,5 % (p < 0,05). Применение комбинированной терапии с мелаксеном сопровождалось также возрастанием активности СОД, выраженной в Е на мл, и удельной активности в сыворотке крови больных с лекарственным поражением печени на 22,1 и 18,0 % соответственно по сравнению с результатами до лечения, что, очевидно, было сопряжено с воздействием на ферментативную активность 32 Выпуск 4 (44). 2012 .S ή 90 80 70 60 50 40 30 20 10 O §Т"£ ,и г·· 0,7 O1E 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 Группы пациентов Группы II lIШ‘'НІ іП'. Рис. Активность супероксиддисмутазы, выраженная в Е на мл (А), и удельная активность (Б), в сыворотке крови в норме (1), у больных с лекарственным гепатитом после стандартного лечения (2), при комбинированной терапии с эпифамином (3) и мелаксеном (4) мелатонина, уровень которого корригируется под действием данных препаратов. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Таким образом, включение препаратов, способных корригировать уровень мелатонина, в базисную терапию лекарственного гепатита, приводило к более выраженному антиокислительному эффекту и усилению гепатопротекторного действия по сравнению с применением традиционных гепатопротекторов.

About the authors

S. S. Popov

Email: popov-endo@mail.ru

K. K. Shulgin

A. N. Pashkov

V. I. Zoloedov

G. I. Shvedov

References

Supplementary files