CCOMPARATIVE ASSESSMENT OF N-DEMETILIVABRADINE/IVABRADINE METHABOLIC RATIO DETERMINATION IN PLASMAAND URINE

全文:

В связи с развитием персонифицированной медицины в последние годы активно разрабатываются и внедряются методы оценки функционального состояния различных метаболических систем организма [3, 4]. Для оценки метаболической активности определенной ферментной системы традиционно используют метаболический коэффициент, который рассчитывают после назначения специфического маркерного субстрата изучаемого фермента [7]. Компоненты метаболического отношения (основное вещество и его метаболит, образованный под действием изучаемой ферментной системы) можно мониторировать в различных биологических жидкостях организма [7]. Обычно этими жидкостями являются плазма крови и моча. Определение компонентов в плазме связано с техническими трудностями и трудностями математической обработки - многократный забор образцов крови, подбор параметров математической модели, расчет площади под кривой (AUC) зависимости «концентрация/время». Кумулятивная экскреция изучаемых веществ в моче, собранной за определенный период времени, значительно упрощает процедуру определения изучаемых компонентов. В связи с этим вопрос о том, насколько согласуются результаты, полученные разными способами определения, является актуальным. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Оценить согласованность определений метаболического коэффициента, рассчитанного по результатам мониторирования ивабрадина и N-деметиливабрадина в плазме крови и моче. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Исследование выполнено на клинической базе кафедры клинической фармакологии ВолгГМУ и в ла боратории фармакологической кинетики НИИ фармакологии ВолгГМУ. В анализ включены результаты расчетов метаболического коэффициента по данным одновременного мониторирования концентраций ивабрадина [2] и его N-деметилированного метаболита в плазме крови и моче, полученные у добровольцев после однократного приема ивабрадина (10 мг). Ивабрадин и N-деметиливабрадин определяли на жидкостном хроматографе Shimadzu с флуоресцентным детектором (Япония) на колонке Kromasil LC-18, при длине волны экстинкции 283 нм и длине волны эмиссии 328 нм. Пробоподготовку биологических образцов проводили с использованием твердофазной экстракции на CN-патронах. В качестве внутреннего стандарта использовали домперидон (Toronto Research Chemical Inc., Канада). Для расчета модельных параметров (ka, ke, k12, k21, С0) двухкамерной фармакокинетической модели методом наименьших квадратов применяли надстройку «Поиск решения» с использованием программного обеспечения Microsoft Office Excel 2007. Площади под фармакокинетическими кривыми AUC^^ рассчитывали методом статистических моментов [6]. Метаболический коэффициент (К) в плазме определяли как отношение площади метаболита (AUC ) к площади ивабрадина 0-12ч N-деметиливабрадина-(AUC0_^ ивабрадина). Метаболический коэффициент в моче, собранной за 12 ч после однократного приема ивабрадина, рассчитывали по отношению кумулятивной экскреции (концентрация*объем) N-деметиливабрадина к ивабрадину. Статистическую обработку всех результатов исследования проводили с помощью пакета программ Выпуск 3 (47). 2013 33 SPSS 11.0 и БИОСТАТ. Полученные данные представлены в виде медианы и квартилей (Me (LQ; UQ)). Для установления корреляционной зависимости использовали коэффициент ранговой корреляции Спирмена. Метод Блэнда-Алтмана выполняли в соответствии с авторской методикой [6, 8]. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ В ходе серии экспериментов были получены парные результаты (n = 48) одновременного определения метаболического коэффициента в плазме 1,31 (0,77; 1,55) и моче 0,35 (0,25; 0,49) добровольцев, которые достоверно различались друг от друга (р < 0,001). Для определения возможной связи между результатами, полученными в плазме и в моче (рис. 1), первоначально определили коэффициент корреляции Rho Спирмена. Несмотря на высокую достоверность (р < 0,001), коэффициент корреляции составил 0,466. в плазме и моче от величины метаболического ко- Рис. 1. Зависимость между результатами определения метаболического коэффициента в плазме и моче Однако, применив метод Блэнда-Алтмана (рис. 2), было установлено, что результаты определения метаболического коэффициента в плазме и моче находятся в пределах 2SD разности этих показателей, что свидетельствует о согласованности этих методов между собой. При этом величины «пределов согласованности» с 95 % доверительными интервалами составили: -0,16 [-0,41; 0,08] - нижний «предел согласованности» и 1,77 [1, 53; 2, 02] - верхний «предел согласованности». Средняя разность методов с 95 % ДИ составила 0,804 [0, 66; 0, 95]. Исходя из формы графика, выявлена пропорциональная зависимость расхождения результатов Рис. 2. Метод Блэнда-Альтмана для определения метаболического коэффициента в плазме и моче ЗАКЛЮЧЕНИЕ Таким образом, методы определения метаболического отношения N-деметиливабрадин/ивабрадин в моче и плазме согласованы между собой. Различия между определениями метаболического коэффициента в плазме и моче пропорционально увеличиваются с ростом определяемого коэффициента.

作者简介

V. Petrov

O. Magnitskaya

Email: magol73@yandex.ru

B. Tolkachev

L. Smirnova

A. Ryabucha

K. Kuznetsov

E. Suchkov

参考

补充文件