RELATIVE BIOAVAILABILITY OF VMA-99-82, A NEW ADENINE DERIVATIVE WITH ANTIVIRAL ACTIVITY

Full Text

Задачами фармакокинетики является изучение сти сочетания различных лекарственных средств; об-всасывания, распределения, метаболизма и выведе- наружения активных метаболитов, предупреждения воз-ния лекарственных веществ из организма, что необхо- можностей развития побочных эффектов. В этой связи димо для рационального использования лекарственных важнейшим этапом доклинических испытаний новых средств: индивидуального подбора оптимальной лечеб- лекарственных веществ является изучение эксперимен-ной дозы; определения кратности приема и допустимо- тальной фармакокинетики [1, 3]. 78 --Выпуск 3 (47). 2013 ©згшірСа ©ШгС Из ряда 9-производных аденина, синтезированных на кафедре фармацевтической и токсикологической химии ВолгГМУ в результате скриннинговых исследований было выбрано вещество-лидер по противовирусной активности - соединение VMA-99-82 (адепрофен). Данное соединение продемонстрировало высокую ингибиторную активность в отношении различных ДНК- и РНК-содержащих вирусов, в частности цитомегалови-руса человека и ВИЧ-1 [4, 5, 7]. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Изучение относительной биодоступности нового производного аденина - соединения VMA-99-82, обладающего противовирусной активностью. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Для количественного определения соединения был разработан метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). В исследовании использовали жидкостной хроматограф (Shimadzu, Япония). Определение соединения VMA-99-82 проводилось при помощи диодноматричного ультрафиолетового детектора, длинна волны 205 нм. Хроматографическое разделение осуществлялось на колонке SUPELCOSIL LC-18 (5 мкм; 150 мм х 4,6 мм). Мобильная фаза включала в себя ацетонитрил (УФ 210) (Россия) и буферную систему из 50 мМ р-ра однозамещенного калия фосфата (рН 5,65) в соотношении 40 % : 60 % v/v. Экстракцию VMA-99-82 из биологических проб, а также одновременное осаждение белков проводили смесью этанола и ацетонитрила. Время удерживания составило около 7,0-7,5 мин. Чувствительность метода - 1 мкг/мл, средняя ошибка измерения не превышает 10 %. Эксперименты выполнены на 20 кроликах породы шиншилла массой 1,8-2,2 кг, которые содержались в условиях вивария на стандартной диете с соблюдением всех правил и Международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях. VMA-99-82 вводили животным перорально, посредством желудочного зонда, в максимальной терапевтической дозе 50 мг/кг. Забор проб производили через 15, 30 минут и через 1, 2, 4, 8 и 12 часов после введения [6]. Расчеты производили немодельным методом, статистическую обработку осуществляли в программе Microsoft Excel [2]. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ В результате проведенного исследования были получены усредненные фармакокинетические профили зависимости концентрации вещества в плазме крови кроликов от времени. Как видно из представленных данных (рис.), соединение VMA-99-82 быстро всасывается из желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) - максимальная кон центрация соединения (8,71 мкг/мл) достигается через 30 минут после введения. После этого концентрация снижается, причем снижение носит биэкспо-ненциальный характер, предполагая быструю первую фазу распределения, сменяющуюся более медленной фазой элиминации. Первая фаза элиминации заканчивается через 2 часа после введения и начинается вторая «медленная» фаза до 12 часов исследования. - Субстанция -Таблетки 5 10 Вр е мя, часы Рис. Содержание соединения VMA-99-82 в плазме крови кроликов при пероральном введении субстанции и таблеток в дозе 50 мг/кг; по оси абсцисс - время (часы), по оси ординат - концентрация (мкг/мл) Основные фармакокинетические параметры, рассчитанные для субстанции и таблеток (табл. 1), показывают невысокие значения периода полувыведения (Т1/2 = 5,62 и 5,6 часа соответственно) и среднего времени удерживания в организме одной молекулы препарата (MRT = 7,8 и 7,72 часа). Быстрое снижение концентрации препарата обуславливает низкое значение площади под фармакокинетической кривой (AUC = 46,29 и 43,05 мкг*ч/мл). Величина общего объема распределения (Vd = 8,77 и 9,4 л/кг) примерно в 14 раз превышает общий объем жидкости в организме крысы - 0,67 л/кг, что свидетельствует о выраженной способности препарата интенсивно проникать в органы и ткани животных. Таблица 1 Фармакокинетические параметры соединения VMA-99-82 в плазме крови кроликов при пероральном введении субстанции и таблеток в дозе 50 мг/кг Параметры Субстанция Таблетки AUC (мкг*час/мл) 46,288 43,054 Кєі (час'1) 0,1236 0,1238 Т1/2 (час) 5,618 5,598 MRT (час) 7,796 7,718 Cl (л/(час*кг) 1,084 1,164 Vd (л/кг) 8,77 9,388 Как видно из представленных материалов, характер распределения и основные фармакокинети 4 0 15 Выпуск 3 (47). 2013 79 ческие параметры для субстанции и таблеток близки по значениям. На основании полученных в ходе исследования данных была рассчитана относительная биодоступность, которая составила 93,44 %. При анализе экспериментальных данных, полученных в ходе введения соединения VMA-99-82 различным видам животных (крысы, кролики), не было выявлено значимых межвидовых различий (табл. 2). Таблица 2 Фармакокинетические параметры соединения VMA-99-82 в плазме крови крыс и кроликов при пероральном введении в дозе 50 мг/кг Параметры Крысы Кролики AUC (мкг*час/мл) 49,43 46,288 Кєі (час-1) 0,11 0,1236 Т1/2 (час) 6,11 5,618 MRT (час) 8,52 7,796 Cl (л/(час*кг) 1,01 1,084 Vd (л/кг) 8,91 8,77 ЗАКЛЮЧЕНИЕ Таким образом, в ходе проведенных исследований рассчитана относительная биодоступность, величина которой составила 93,44 °%. Полученные данные позволяют сделать заключение, что лекарственная форма подобрана оптимально и ее можно рекомендовать к дальнейшему применению. Также в результате сравнительного анализа усредненных фармакокинетических профилей и основных фармакокинетических параметров, полученных в результа те введения соединения VMA-99-82 различным видам животных (крысы, кролики), не было выявлено значимых межвидовых различий.

About the authors

L. A. Smirnova

E. A. Suchkov

Email: ewgenik@gmail.com

A. F. Riabuha

K. A. Kuznetsov

A. A. Ozerov

References

Supplementary files