CORRECTION OF ABNORMALITIES IN POSTNATAL DEVELOPMENT OF RAT OFFSPRING WITH EXPERIMENTAL PREECLAMPSIA BY NEW GABA COMPOUND RGPU-242 DERIVATIVES

Full Text

Гестоз является одним из самых частых и опасных осложнений беременности, встречающихся в акушерской практике [2]. В России, несмотря на наблюдающееся в последнее десятилетие снижение абсолютного числа родов, частота гестоза из года в год увеличивается и достигает 16-21 % [1]. В настоящее время общепризнано, что ключевым звеном патогенеза гестоза является эндотелиальная дисфункция, приводящая к нарушению плацентарно-плодового кровообращения, гипоксии плода, окислительному стрессу, гиперагрегации и гиперкоагуляции. Как следствие, возникает задержка внутриутробного развития плода, что приводит к отставанию физического развития и формирования сенсорно-двигательных рефлексов у детей в постнатальном периоде [4, 8]. Несмотря на достаточно широкий спектр лекарственных средств, используемых в клинике для коррекции гестозов, их применение не всегда эффективно, что диктует необходимость поиска новых препаратов для лечения и профилактики осложнений беременности. Показано, что некоторые производные ГАМК (цитрат фенибута, салицилат фенибута) оказывают выраженное эндотелиопротективное действие, обладают антигипоксическими, антиоксидантными, антиагрегантными свойствами [5, 7, 9, 10]. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Изучение влияния производного ГАМК, соединения РГПУ-242, на физическое развитие и скорость созревания сенсорных рефлексов потомства от крыс с экспериментальным гестозом. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Экспериментальный гестоз (ЭГ) моделировали на белых беспородных крысах-самках массой 220-240 г путем замены питьевой воды на 1,8%-й раствор NaCl с 7-го по 21-й дни гестации [11]. Были сформированы следующие группы животных: группа позитивного контроля (беременные самки без ЭГ (n = 6), (потомство, n = 49); группа негативного контроля (беременные самки с ЭГ, получавшие физиологический раствор (n = 10), (потомство, n = 86); опытная группа 1 (беременные самки с ЭГ, получавшие соединение РГПУ-242 в дозе 23 мг/кг (n = 7), (потомство, n = 64);опытная группа 2 (беременные самки с ЭГ, получавшие препарат сравнения сулодексид в дозе 30 мг/кг (n = 6), (потомство, n = 65). Соединения вводились перорально ежедневно с седьмого дня гестации и до родов. Отмечалось количество мертворожденных крысят и постнатальная гибель потомства. Показатели физического развития потомства (отлипание ушной раковины, появление первичного волосяного покрова, прорезывание резцов, открытие глаз, мышечную силу) регистрировали со 2-го по 15-й день, созревание сенсорно-двигательных рефлексов (отрицательный геотаксис, реакция на акустический стимул, ползание, переворачивание в свободном падении) изучали со 2-го по 17-й день [6]. Статистическую обработку результатов исследований проводили в пакете прикладных программ «Statistik 10» с применением точного cp-критерия Фишера и /-критерия Стьюдента. 128 Выпуск 1 (49). 2014 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ В группе самок с неосложненной беременностью гибели потомства не наблюдалось. У самок с ЭГ 25,7 % крысят родились мертвыми, в различные сроки постнатального периода погибло 22,1 % особей от общего количества потомства. Соединение РГПУ-242 и препарат сравнения сулодексид достоверно снижали число мертворожденного потомства на 24,1 и 24,2 % соответственно и предотвращали гибель животных в постнатальном периоде в 1,3 и 7,1 раза (табл.). Г ибель потомства от самок с экспериментальным гестозом при рождении и в постнатальном периоде Группа животных Кол-во потомства в группе (на момент родов) Кол-во мертворо жденных крысят, (%) Кол-во крысят, погибших после рождения, (%) Самки без ЭГ 49 - - Самки с ЭГ + физ. р-р 86 22 (25,7)# 19 (22,1)# Самки с ЭГ + РГПУ-242 64 1(1,6)* 11 (17,2) Самки с ЭГ + сулодексид 65 1 (1,5)* 2 (3,1) * сравнения сулодексид способствовал увеличению мышечной силы крысят, время удержания их на горизонтальной сетке составило 28,9 ± 7,9 (р < 0,05), что было достоверно выше, чем у потомства группы негативного контроля (рис. 2). #р < 0,05 - данные достоверны по отношению к показателю группы животных позитивного контроля по ц-кри-терию Фишера; *р < 0,05 - данные достоверны по отношению к показателю группы животных негативного контроля по ц-кри-терию Фишера. Рис. 1. Сроки прорезывания резцов у потомства от самок с экспериментальным гестозом, получавших соединение РГПУ-242 и сулодексид с 7-го по 21-й день гестации #Различия достоверны по точному ц-критерию Фишера относительно группы позитивного контроля; *различия достоверны по точному ц-критерию Фишера относительно группы негативного контроля. Отлипание ушной раковины у всех крысят из группы позитивного контроля отмечалось на 3-и сут., в группе негативного контроля и обеих опытных группах-на 4-е. Первичный волосяной покров во всех сравниваемых группах животных появился на 4-е сут. постнаталь-ного развития. У потомства животных без ЭГ прорезывание резцов в 100 % случаев наблюдалось на 10-е сут., в то время как у крысят, рожденных от самок с ЭГ - на 13-е сут. В опытных группах резцы у всего потомства прорезались на 10-е сут. (рис. 1). Открытие глаз в 100 % случаев у крысят, рожденных от самок с неосложненной беременностью, произошло на 18-е сут., в группе негативного контроля - на 19-е сут. Крысята, рожденные от самок, получавших соединение РГПУ-242, в 100 % случаев открыли глаза на 18-е сут., получавших сулодексид - на 19-е сут. Время удержания на горизонтальной сетке в группе крысят позитивного контроля составило (28,2 ± 7,5) с, у потомства животных негативного контроля - (18,9 ± 6,4) с. Исследуемое соединение РГПУ-242 существенно не влияло на развитие мышечной силы, о чем свидетельствует практически одинаковое время удержания на горизонтальной сетке (21,2 ± 8,3) с по сравнению с животными, рожденными от самок с ЭГ. Препарат #р < 0,02 - данные достоверны по отношению к показателю группы животных позитивного контроля (f-критерий Стьюдента); *р < 0,02 - данные достоверны по отношению к показателю группы животных негативного контроля (f-критерий Стьюдента). Рис. 2. Оценка мышечной силы потомства от самок с экспериментальным гестозом в тесте удержания на горизонтальной сетке Для оценки развития сенсорно-двигательных рефлексов был проведен тест на наклонной плоскости, который позволяет выявить у новорожденного потомства способность адекватного восприятия положения вниз головой и возможность поворачиваться против вектора гравитации (реакция «отрицательный геотаксис»). Тест дает оценку вестибулярной функции, мышечной силе и координации движений. Крысята, рожденные от самок без ЭГ, выполняли тест «отрицательный геотаксис» в 100 % случаев на 8-е сут. постнатального периода, в группе негативного контроля - на 10-е сут. У потомства от самок с ЭГ, получавших соединение РГПУ-242, Выпуск 1 (49). 2014 129 формирование вестибулярной функции завершалось на 8-е сут., у крысят, рожденных от самок, получавших сулодексид - на 9-е сут. (рис. 3 А). Реакция на акустический стимул у всех крысят, рожденных от самок с неосложненной беременностью, наблюдалась на 10-е сут. В группе негативного контроля - на 13-е сут. Потомство от самок с ЭГ, получавших исследуемое соединение РГПУ-242 и препарат сравнения сулодексид, реагировало на акустический стимул в 100 % случаев на 11-е сут., данные достоверно отличались от группы негативного контроля (рис. 3 Б). Ползание в группе животных, рожденных от самок без ЭГ, отмечалось на 10-е сут. У крысят от самок с ЭГ в 100 % случаев ползание наблюдалось на 14-е сут. В опытных группах 1 и 2 100 % результата показатель достиг на 10-е сут. (рис. 3 В). Переворачивание в свободном падении у всех крысят из группы позитивного контроля отмечалось на 18-е сутки, в группе негативного контроля - на 20-е сут. Соединение РГПУ-242 и сулодексид оказывали положительное влияние на время появления данного показателя и в 100 % случаев он отмечался на 18-е сут. (рис. 3 Г). ж * - .ИГ .г- 20 ъ 0 -I-1-1-1-1-1-1 4 5 6 7 R 9 10 верчя, сутки •••*•• Потомство 01 самок без ЭГ ■ Потомство от самок с ЭГ + физ р-р. . -ч^-Потомствоот самок с ЭГ-РГПУ-242 -+ - Потомство от самок с ЭГ + сулодексид * ..... ■>......- -^ I 60 0 -I-1-1-1-1-1 8 9 10 И 12 13 время, сутки Потомство от самок без ЭГ Ш Потомство от самок с ЭГ-физ. р-р g «Потомство от самок с ЭГ + РГПУ-2'12 ~ Потомство от самок с ЭГ - сулодексид 8 9 10 И 12 13 14 время, сутки Потомство от самок без ЭГ 1 Потомство от сомок с ЭГ + фш. р-р. g • Чгш Потомство от самок с ЭГ + РГПУ-242 -• -Потомство от самок с ЭГ + сулодексид 0 J-1-1-1-1- 15 16 17 18 19 20 время, сутки • Потомствоот самокоеч ЗГ Ш Потомство от самок с ЭГ +физ р-р. р •^•Потомство от самок с ЭГ - РГПУ-242 “Потомствоот самок с ЭГ + сулодексид #р < 0,05 - данные достоверны по отношению к показателю группы животных позитивного контроля по ц-кри-терию Фишера; *р < 0,05 - данные достоверны по отношению к показателю группы животных негативного контроля по ц-кри-терию Фишера. Рис. 3. Сроки формирования сенсорно-двигательных рефлексов у потомства от крыс с экспериментальным гестозом, получавших соединение РГПУ-242 и сулодексид с 7-го по 21-й дни гестации: А - реакция на наклонной плоскости (тест «отрицательный геотаксис»); Б - реакция на акустический стимул; В - выполнение теста «ползание»; Г - вестибулярная реакция (тест «переворачивание в свободном падении») Очевидно, случаи мертворождения и гибели потомства от самок с ЭГ, отставание в физическом развитии и задержка формирования у них сенсорно-двигательных рефлексов связаны с внутриутробной гипоксией. По литературным данным, внутриутробная гипоксия и гипоксия в родах в 38,4 % случаев является причиной перинатальной смертности, а в 59 % - причиной мертворождений, приводит к нарушению физического и психического развития потомства [3]. Гипоксия, в свою очередь, может быть следствием эндотелиальной дисфункции, которая характеризуется генерализованным вазоспазмом, гиперагрегацией и гиперкоагуляцией, нарушением микроциркуляции, имеющих место при ЭГ, что было показано в ранее проведенных исследованиях [1]. Производное ГАМК, соединение РГПУ-242, способствует уменьшению количества летальных исходов у потомства при рождении и в постнатальном периоде, оказывает позитивное влияние на его физическое развитие и формирование сенсорно-двигательных рефлексов. Вероятно, это связано с его анти-гипок-сическим, антиагрегантным, вазодилатирующим и эндо-телио-протекторным действиями, характерными для многих производных ГАМК [5, 7, 9, 10]. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Таким образом, соединение РГПУ-242 и препарат сравнения сулодексид снижают число мертворожденного потомства у самок с экспериментальным гестозом, а также уменьшают процент его гибели в постнатальном периоде. Препараты оказывают положительное влияние на динамику физического развития крысят, рожденных от самок с экспе-риментальным гестозом, а также повышают скорость созревания сенсорно-двигательных рефлексов. 130

About the authors

L. I Mikhailova

Email: mih-li@mail.ru

G. A Zhakupova

References

Supplementary files