THE ACTIVITY OF REDOX ENZYMES OF THE GLYCOLYTIC AND PHOSPHATASE WITH GRANULOMATOUS PERIODONTITIS

Full Text

Околозубные гранулемы, как очаги хронической инфекции, вызывают аллергическую реакцию организма в результате непрерывного поступления из гранулемы микробов и продуктов распада тканей [6, 12, 15]. Морфологические особенности разных форм гранулем достаточно полно освещены в литературе [2, 5, 11, 13]. Также в литературе приводятся данные исследований, посвященных гистохимическому изучению ферментативных реакций в гранулемах [1, 4, 8], имеется ряд научных работ по изучению морфологии и гистохимии гранулематозных периодонтитов, в которых гранулема рассматривается как одонтогенный хрониосептический очаг [14]. Поскольку продукты распада микробов и тканей влияют на ферментативные процессы, ряд авторов рассматривает ферментативные сдвиги в гранулемах во взаимосвязи организмом в целом [3, 10]. Существует устойчивое мнение, что состояние ферментативной активности в соответствующих структурах отражает направленность, выраженность инфекционного процесса, а главное, до некоторой степени определяет сосудисто-тканевую проницаемость [7, 9, 16]. Последнее является одним из важнейших моментов в хроническом воспалительном процессе, позволяющим судить о связи длительно текущего продуктивного воспаления с другими органами и системами человеческого организма [8, 17]. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Исследование активности окислительно-восстановительных и фосфатазных ферментов в гранулемах, удаленных у больных, страдающих хроническим гранулематозным периодонтитом. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Всего изучено 67 гранулем. Большинство их (64 гранулемы, 95,5 %) взято после удаления зубов у лиц молодого и среднего возраста по соответствующим показаниям. Небольшая часть (3 гранулемы, 4,5 °%) получены при удалении молочных зубов. Проведены гистохимические реакции на окислительно-восстановительные ферменты по методам Нахласа, Фарбера, Муга и Пирса; на фосфатазы - Выпуск 4 (60). 2016 55 ЩШгорСз [ЩсмеТКЩ по методам Гомори и Таноуэ. Окислительно-восстановительный цикл ферментов включал: сукциндегидроге-назу, цитохромоксидазу, НАД- и НАДФ-диафоразу, алкоголь-дегидрогеназу и лактат-дегидрогеназу. Из гидролитических фосфатазных ферментов определялись кислая и щелочная фосфатазы. Все примененные методы выявления ферментов выполнялись по оригинальным прописям Э. Пирса (1988). Для гистологических исследований применяли окраску гематоксилином и эозином, по Массону-Голднеру. На основании общей морфологической картины все исследуемые гранулемы разделили на простые, эпителиальные и смешанные. Последние встречались наиболее часто (до 80 %) и представляли собой либо комбинации из простых и эпителиальных, либо характеризовались наличием одной капсулы, объединяющей разные гранулемы возле одного и того же зуба. Для реализации поставленной цели исследования все гранулемы дополнительно условно разделены на 3 группы в зависимости от характера патологического воспалительного процесса. В 1-ю группу вошли гранулемы с наиболее ранними фазами течения продуктивного воспаления, богатые сосудами и относительно молодыми клеточными элементами гистиогенного и гематогенного происхождения. Во 2-ю группу вошли препараты с гранулематозным воспалением, в котором преобладали фиброблас-тические реакции и явления коллагенизации и гиалино-за. Наиболее обширная, 3-я, группа включала гранулемы с рецидивами острого воспаления - свежими очагами воспалительной инфильтрации среди пучков зрелой волокнистой соединительной ткани. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Гистохимический анализ ферментов в гранулемах наиболее ранних фаз развития продуктивного воспале ния показал, что энзиматическая активность здесь исключительно высока и проявляется, по существу, почти во всех структурах. Ферменты окислительно-восстановительного цикла, среди них энзимы дыхательной цепочки - сукциндегидрогеназа, цитохромоксидаза, НАДи НАДФ-диафораза-характеризуются значительной активностью. Менее активными по сравнению с окислительно-восстановительными оказались гликолитические ферменты: алкоголь- и лактатдегідрогеназа. Высокий окислительно-восстановительный потенциал можно отметить в фибробластах, микрофагальных элементах и плазматических клетках. Более низкая ферментативная активность свойственна лейкоцитам, лимфоидным клеткам и макрофагам. Волокнистые структуры гранулемы, в том числе волокна, формирующие капсулу, не содержат зерен формазана, энзиматическая активность в них не определяется, однако внутренняя оболочка стенок средних и крупных кровеносных сосудов и в толще грануляционной ткани, и в капсуле, является ферментативно активной (рис. а). В эпителиальных гранулемах высокая ферментативная активность отмечается в цитоплазме эпителиальных клеток, она тем сильнее, чем ниже степень дифференцировки указанных элементов (рис. б). Активность ферментов гликолитического цикла в гранулематозных тканях проявляется в тех же структурах, что и у ферментов дыхания, однако она значительно ниже. Таким образом, при продуктивном воспалении, когда грануляционная ткань состоит в основном из круглых и полиморфных клеток и изобилует тонкостенными мелкими кровеносными сосудами, имеют место повышенные ферментативные реакции в большей мере окислительно-восстановительного цикла и в меньшей степени - гликолиза, причем проявляется энзиматическая активность в соединительнотканных и эпителиальных элементах. Рис. Эпителиальная гранулема: а - ферментативная активность внутренней оболочки кровеносного сосуда (1). Окраска по Массону Ок. 20, об. 40; б - высокая ферментативная активность в цитоплазме эпителиальных клеток (2). Окраска по Массону Ок. 10, об. 20 56 Выпуск 4 (60). 2016 Гистохимическое определение щелочной фосфа-тазы в гранулемах показало довольно высокое ее содержание в стенках капилляров, мелких и средних кровеносных сосудов. Накапливается щелочная фосфатаза в тонких волокнистых структурах, особенно активной оказывается оболочка гранулемы, где очень много мелких кровеносных сосудов. В эпителиальной петлистой сети щелочная фосфатаза почти отсутствует и только клеточные мембраны и ядра до некоторой степени обладают фосфатаз-ной активностью. Соединительнотканные клетки содержат этот фермент в небольших количествах; среди других соединительнотканных элементов, пожалуй, яснее всего выступают на препаратах фосфатазноак-тивные фибробласты и фиброциты. Другой фермент-кислая фосфатаза также отражает усиленный метаболизм в воспаленных тканях, однако повышенная активность данного фермента подчеркивает еще одну сторону воспалительного процесса - его пролиферативную стадию. Высокой активностью отличаются размножающиеся соединительнотканные клетки, их ядра, а также растущие и пролиферирующие эпителиальные тяжи. Много фермента и в эндотелии капилляров. В связи с наличием усиленных обменных процессов кислая фосфатаза в большей мере накапливается в лизосомах и эндоплазматической сети клеточных элементов хронического продуктивного воспаления. Во 2-й группе гранулем, в ходе развития которых воспаление стихло, а в клеточном составе преобладают гистиоциты и фибробласты, развернулись фибробла-стические реакции, сформировался очаг фиброзной соединительной ткани, а ферментативная активность уменьшилась. Это уменьшение свойственно всем клеточным и волокнистым структурам. Падает активность окислительно-восстановительных энзимов также в соединительнотканных и эпителиальных клетках. Гистио-цитарные и фибробластические элементы характеризуются крайне незначительной активностью. Запустева-ющие кровеносные сосуды, особенно вытянутые клетки и волокна капсулы гранулемы, совершенно не дают реакции на ферменты; в равной мере нет их и в местах гиалиноза, лишенных клеток. Слабая ферментативная активность обнаруживается в цитоплазме эпителия. В ткани гранулемы еще ниже активность ферментов гли-колитического пути - алкоголь- и лактатдегидрогеназ. В такой же мере снижается активность щелочной фос-фатазы. Правда, стенки средних и более крупных сосудов еще остаются фосфатазно-активными, в фиброзной же и гиалинизированной ткани щелочная фосфатаза, очевидно, отсутствует. Глубоко изменяется, как видно, и обмен кислой фосфатазы - ее активность сохраняется только в ядерных субстанциях клеток соединительной и эпителиальной ткани. Угнетение активности энзиматических реакций в ходе затихающего продуктивного периодонтита приводит к уменьшению сосудисто-тканевой проницаемости. В гранулемах 3-й группы вновь появляются воспа лительные фокусы, в них нарастает активность окислительно-восстановительных и фосфатазных ферментов. Усиление ферментативной активности происходит не только в местах лейкоцитарной и лимфоцитарной инфильтрации и круглоклеточной пролиферации, но также в эпителии и стенках сосудистых разветвлений гранулемы, клеточно-волокнистых ее структурах далеко за пределами воспалительных очагов. Темп и объем ферментативных реакций велик, и это, как нам кажется, свидетельствует об увеличении сосудисто-тканевой проницаемости при экзацербации воспалительного процесса в затихших до этого очагах. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Отсутствие надежных клинических критериев, подтверждающих ликвидацию патологического процесса в периапикальных тканях, вынуждает лечащих врачей весьма осторожно оценивать клинические результаты терапии гранулематозного периодонтита. Так называемые «спящие» гранулемы еще не свидетельствуют о благополучии. Следует всегда учитывать общее состояние, реактивность организма, особенно у детей, стремиться к радикальному лечению, удалению патологического очага во всех сомнительных или малоэффективных случаях терапии.

About the authors

N. I. Bykova

Kuban state medical University

T. L. Kobylkina

Stavropol State Medical University Ministry of health of Russia

Email: kobylkina1_1@mail.ru

F. M. Lajpanova

Stavropol State Medical University Ministry of health of Russia

A. A. Adamchik

Kuban state medical University

References

Supplementary files