ASSESSING CATECHINS AND LEUCOANTHOCYANINS INABOVEGROUNDAND UNDERGROUND PARTS OF ACONOGONON DIVARICATUM

Full Text

Aconogonon divaricatum, catechins, leucoanthocyanins, spectrophotometry. Среди растительных веществ фенольной природы важное значение имеют катехины и лейкоантоцианы [4]. Катехины (флаван-3-олы) являются достаточно обширной группой растительных органических соединений: число известных флаван-3-олов превышает 1000 [8]. В растениях катехины встречаются в изомерных формах, соответствующих (+)-катехину и (-)-эпикатехи-ну (рис. 1). Антиоксидантные свойства флаван-3-олов в 50 раз превышают показатели витамина E и в 20 раз - витамина С [12]. Кроме того, катехины обладают противо воспалительным, антимикробным, спазмолитическим и нейропротекторным действием [4]. Лейкоантоцианы (флаван-3,4-диолы) являются предшественниками катехинов и влияют на концентрацию этих соединений в растениях [5]. К наиболее распространенным в растениях лейкоантоцианам относятся лейкоцианидин и лейкодельфинидин (рис. 2). Лейкоантоцианы характеризуются противоопухолевой и радиозащитной активностью, обладают гипотензивным, капилляроукрепляющим, противосклероти-ческим действием, а также способствуют эффективному усвоению витамина С [6, 10, 11]. (+) катехин (2R,3S)-2-(3,4-dihydroxyphenyl)- -3,4-dihydro-2H-chromene-3,5,7-triol (-)эпикатехин (2R,3R)-2-(3,4-dihydroxyphenyl)- -3,4-dihydro-2H-chromene-3,5,7-triol Рис. 1 Структура и химическое название растительных катехинов 118 Выпуск 4 (60). 2016 ©зеторСз [gofiïijf3 леикоцианидин (2P,3S,4S)-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,4dihydro-2H-chromene-3A5,7-tetrol леИкодельфинидин (2P,3S,4S)-2-(3A5-tnhydroxyphenyl)-3Adihydro-2Hchromene-3,4,5,7-tetrol Рис. 2 Структура и химическое название растительных лейкоантоцианов Перспективным для внедрения в медицинскую практику в качестве источника катехинов и лейкоантоцианов является Aconogonon divaricatum L. (таран растопыренный, горец растопыренный) - многолетнее растение семейства Polygonaceae, которое культивируется в Омской области [7]. Ранее был установлен компонентный состав дубильных веществ и определено доминирующее присутствие конденсированных таннинов в таране растопыренном [1, 2]. Определение содержания катехинов и лейкоантоцианов в составе растения позволит обосновать рациональный подход к использованию горца растопыренного в качестве сырьевого источника для получения ценных полифенольных соединений. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Количественное определение катехинов и лейко-антоцианов в надземных и подземных органах Aconogonon divaricatum L. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Объектами для анализа послужили надземные и подземный части Aconogonon divaricatum L., заготовленные в период с 2013 по 2015 гг. Сушку сырья проводили воздушно-теневым способом. Высушенные части растения измельчали до размера частиц 3 мм. Количественное определение катехинов и лейко-антоцианов определяли спектрофотометрически. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Содержание катехинов проводили в соответствии со следующей методикой: навеску растительного сырья около 0,5 г (точная навеска) растирали до гомогенного состояния в присутствии подкисленного 95%-ного этанола (20:1), гомогенат центрифугировали при 5000 g в течение 10 минут. В мерную колбу на 5 мл (пикнометр) вносили 1 мл профильтрованного центрифугата и доводили до метки ванилиновым реактивом (5%-й спир-товый раствор ванилина в концентрированной соляной кислоте). Оптическую плотность замеряли через 5 мин после добавления ванилинового реактива к центрифу-гату. В качестве раствора сравнения использовали ра створ спирта с ванилиновым реактивом [3, 9]. Измерения вели при длине волны 500-505 нм. В качестве эталонного раствора использовали раствор стандартного образца (-)-эпигаллокатехингал-лата («Фитопанацея», Россия), приготовленного следующим образом: 0,001 г (точная навеска) (-)-эпигалло-катехингаллата растворяли в мерной колбе на 5 мл в 1 мл подкисленного 95%-го спирта и доводили до метки ванилиновым реактивом. Измерения проводили через 5 минут при длине волны 505 нм. Содержание катехинов (в %) в пересчете на (-)-эпигаллокатехингалат определяли по формуле: Х% =_ тст Х 4 Х Vx1 Х Vcm2 Х Vx3 Х 100 Х 100 т Х Аст Х Vcmi Х ¥х2 Х ¥ст3 Х (100 - W)’ где mx - навеска растительного сырья, г; тст- навеска стандартного образца (-)-эпигаллокатехингал-лата, г; Ах - значение оптической плотности испытуемого раствора; Аст - значение оптической плотности раствора стандартного образца (-)-эпигаллокатехингал-лата; Vx123 - объем разведений извлечения из растительного сырья, мл; Vct123 - объем разведений стандартного образца (-)-эпигаллокатехингаллата, мл; W- влажность сырья, %. Для определения лейкоантоцианов навеску растительного материала около 1,0 г (точная навеска) растирали до гомогенного состояния в присутствии подкисленного 95%-го этанола (20:1), гомогенат центрифугировали при 4500 g в течение 30 минут. Затем 1 мл профильтрованного центрифугата помещали в пробирку и добавляли 19 мл 5%-го раствора соляной кислоты в н-бутаноле, тщательно перемешивали. Пробирку помещали в кипящую водяную баню на 50 мин, по окончании термостатирования пробирку охлаждали и определяли оптическую плотность [3, 9]. Измерения вели при длине волны 534-546 нм, соответствующих спектральным максимумам цианидина и дельфинидина. В качестве эталонного раствора использовали раствор стандартного образца цианидина хлорида, приготовленного следующим образом: 0,02 г (точная навеска) цианидина хлорида помещали в мерную колбу на 100 мл и добавляли до метки подкисленный (рН = 3.0) 95%-й спирт этиловый (раствор А). 1 мл раствора А Выпуск 4 (60). 2016 119 ЩШгорСз [ЩсмеТКЩ помещали в мерную колбу на 25 мл и доводили до метки 5%-м раствором хлористоводородной кислоты в н-бу-таноле. Колбу термостатировали в кипящей водяной бане 50 мин, после чего охлаждали и определяли оптическую плотность. Измерения проводили при длине волны 534 нм. Процентное содержание лейкоантоцианов в пересчете на цианидина хлорид определяли по формуле: Х% = тст Х Ах Х Vx1 Х Vem2 Х Vx3 Х 100 Х 100 т х Ах V . х V 2 х V 3 х (100 - W ) ’ х от от1 х 2 оті v ' где mx - навеска растительного сырья, г; mCT- навеска стандартного образца цианидина хлорида, г; Ах - значение оптической плотности испытуемого раствора; Аст-значение оптической плотности раствора стандартного образца цианидина хлорида; Vx123 - объем разведений извлечения из растительного сырья, мл; VCT123 - объем разведений стандартного образца цианидина хлорида, мл; W-влажность сырья, %. Результаты количественного определения катехи-нов и лейкоантоцианов приведены в табл. Распределение катехинов и лейкоантоцианов по морфологическим группам Aconogonon divaricatum L.,%. Часть растения Год сбора Содержание катехинов Содержание лейкоантоцианов Корни и корневища 2015 9,85 ± 0,22 3,88 ± 0,08 2014 7,35 ± 0,18 2,68 ± 0,06 2013 8,10 ± 0,19 1,31 ± 0,02 Стебли 2015 0,74 ± 0,01 0,02 ± 0,001 2014 0,61 ± 0,01 0,26 ± 0,005 2013 0,55 ± 0,01 0,46 ± 0,01 Листья 2015 5,80 ± 0,16 0,45 ± 0,01 2014 4,32 ± 0,11 0,40 ± 0,01 2013 2,96 ± 0,09 0,35 ± 0,01 Цветки 2015 7,50 ± 0,26 1,47 ± 0,05 2014 6,38 ± 0,29 2,50 ± 0,12 2013 5,46 ± 0,15 3,00 ± 0,15 Плоды 2015 8,01 ± 0,35 1,33 ± 0,04 2014 6,22 ± 0,20 2,01 ± 0,10 2013 5,80 ± 0,20 2,46 ± 0,11 Плоды молочной спелости 2015 2,43 ± 0,09 0,46 ± 0,01 ЗАКЛЮЧЕНИЕ В результате проведенных исследований было установлено, что в подземной и надземной частях Aconogonon divaricatum L содержатся катехины и их предшественники лейкоантоцианы, которые установлены в растении впервые. Наибольшее содержание катехинов и лейкоантоцианов обнаружено в подземной части, цветках и плодах, наименьшее - в стеблях (как по содержанию катехинов, так и лейкоантоцианов). По содержанию кате-хинов в подземной части горца забайкальского и в листьях наиболее распространенного источника данных БАВ - зеленого чая, большой разницы обнаружено не было [содержание катехинов в листьях зеленого чая в пересчете на (-)-эпигаллокатехингаллат составило (10,16 ± 0,48) %]. В связи с этим, использование корней и корневищ Aconogonon divaricatum L. в качестве источника ка-техинов является перспективным направлением. ЛИТЕРАТУРА

About the authors

E. V. Ivanova

State Funded Educational Institution for Higher Professional Education Omsk State Medical University of the Ministry of Public Health of the Russian Federation

Email: daisy891@mail.ru

E. A. Luksha

State Funded Educational Institution for Higher Professional Education Omsk State Medical University of the Ministry of Public Health of the Russian Federation

G. I. Kalinkina

State Funded Educational Institution for Higher Professional Education Siberian State Medical University of the Ministry of Public Health of the Russian Federation

I. S. Pogodin

State Funded Educational Institution for Higher Professional Education Omsk State Medical University of the Ministry of Public Health of the Russian Federation

References

Supplementary files