EFFECTS OF PERCHLOZON AND ANTIBODIES AGAINST HUMAN GAMMA-INTERFERON AND CD4 GLYCOPROTEIN ON THE IMMUNE SYSTEM OF HIV-INFECTED PATIENTS WITH ASSOCIATED PULMONARY TUBERCULOSIS

Full Text

При ВИЧ-инфекции ускоряется прогрессирование ряда других патологий, в первую очередь, таких социально значимых заболеваний, как вирусный гепатит и туберкулез. В случае последнего также возможно увеличение рисков реинфицирования и эндогенных рецидивов, обусловленных нарушением способности организма сохранять длительный протективный иммунный ответ из-за угасания клеточного звена иммунитета [12, 14]. ВИЧ является наиболее сильным из известных факторов риска развития туберкулеза. Успешное сдерживание туберкулезной инфекции зависит от индукции адаптивного иммунного ответа первого типа, характеризующегося производством гамма интерферона СР4+ Т-клетками для активации макрофагов и последующего уничтожения внутриклеточных бактерий [11]. Существующие экспериментальные данные демонстрируют, что туберкулез способен увеличивать скорость репликации ВИЧ [15, 16]. Таким образом, актуальной задачей является расширение возможностей своевременной терапии сочетанной патологии, вызванной коинфекцией микобактериями туберкулеза и ВИЧ. Одним из перспективных направлений терапии может выступать терапия при помощи инновационных отечественных лекарственных средств - противоту беркулезного препарата Перхлозон и антител к гликопротеину CD4 и гамма-интерферону человека, для препарата которых было показано специфическое стимулирующее действие на клеточное звено иммунитета и цитокиновую регуляцию при моноинфекции ВИЧ [5, 6]. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Изучение влияния комбинированной терапии Пер хлозоном и препаратом антител к гликопротеину CD4 и гамма-интерферону человека на состояние иммунной системы у пациентов с коинфекцией ВИЧ и туберкулезом легких. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ В исследование было включено 57 пациентов в возрасте 18-55 лет с подтвержденным диагнозом ВИЧ и туберкулезом легких, без тяжелых поражений печени и сопутствующих заболеваний в стадии обострения. Беременные женщины, потребители инъекционных наркотиков и лица, не подписавшие информированное согласие, не включались в исследование. Работа проводилась после одобрения Региональным Независимым Этическим Комитетом (ГУ Волгоградский Медицинский Научный Центр) 42 Выпуск 2 (62). 2017 ©©tnlrf (регистрационный номер IRB 00005839 IORG 0004900 (OHRP)): протокол № 82-2014 от 20 июня 2014 г). Клинические и лабораторные исследования выполнены в ГКУЗ «Волгоградский областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями» и ГБУ «Волгоградский медицинский научный центр». В соответствии с патологией и схемой терапии, участники исследования были разделены на следующие группы: 1. ВИЧ-инфицированные пациенты с туберкулезом легких, получающие антиретровирусную терапию (АРВТ) и антитела к гамма-интерферону и гликопротеину CD4 человека (18 пациентов). 2. ВИЧ-инфицированные пациенты с туберкулезом легких, получающие АРВТ и антитела к гамма-интерферону и гликопротеину CD4 человека и Перхлозон (19 пациентов). 3. ВИЧ-инфицированные пациенты с туберкулезом легких, получающие только АРВТ (20 пациентов). Антиретровирусная терапия включала зидовудин (300 мг, 2 р./сут.), ламивудин (150 мг 2 р./сут.) и эфави-ренз (600 мг 1 р./сут.). Перхлозон назначался по 800- 1000 мг в сутки. Препарат антител к у-интерферону и гликопротеину CD4 (ПАТ) назначался 2 раза в день сублингвально до еды по две таблетки (0,03 мг) на прием до полного растворения. Исследовалась динамика клинико-лабораторных показателей, включавших субпопуляционный состав лимфоцитов (CD3, CD4, CD8), концентрации цитокинов (IL-2, IL-4, у-INF) и вирусную нагрузку ВИЧ. Срок наблюдения за больными составлял 3 месяца. Статистическую обработку результатов производили с помощью программ MS Excel, Satistica 8.0 и GraphPad Prism 5.0. Параметры распределения данных оценивали при помощи методов Колмогорова-Смирнова и Шапиро-Уилка. Межгрупповые различия по количественным показателям оценивали в ходе двухфакторного дисперсионного анализа; различия по качественным признакам оценивали по методу %2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Динамика субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови у пациентов исследуемых групп представлена на рис. 1. Несмотря на отсутствие статистически значимых различий между группами в общем количестве Т-лимфоцитов (рис. 1 А), соотношение CD4+ и CD8+ клеток значительно повысилось в группах, получавших препарат антител к гамма-интерферону и CD4 человека и его комбинацию с Перхлозоном (рис. 1 Г). Увеличение данного показателя было статистически значимым как по сравнению с исходными значениями в группах, так и по сравнению с группой, получавшей только АРВТ (p < 0,001); при этом изменения, произошедшие в группе, получавшей Перхлозон, оказались более выраженными и превосходили таковые в группе, получавшей ПАТ и АРВТ (p < 0,001). Произошедшее повышение иммунорегуляторного индекса, в первую очередь, связано с аналогичным ростом количества CD4+ клеток (рис. 1 Б). В группах, получавших препарат антител, также отмечалось снижение количества CD8+ клеток, статистически значимое по отношению к группе, получавшей только АРВТ (p < 0,01-0,05; рис. 1 В). *р < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001. Рис. 1. Динамика субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови у пациентов с коинфекцией ВИЧ/туберкулез на фоне проводимой терапии: А - CD3+ клетки, Б - CD4+ клетки, В - CD8+ клетки, Г - иммунорегуляторный индекс. Выполнен двухфакторный дисперсионный анализ (RANOVA) с пост-хок тестом Ньюмена-Кеулса; сравниваемые группы данных обозначены горизонтальными линиями Выпуск 2 (62). 2017 43 ІШторСз Добавление препарата антител к гамма-интерферону и CD4 сопровождалось также статистически значимым увеличением плазменных концентраций yIFN и IL-4 (р < 0,001 ; рис. 2 А, В), превосходящим изменения, произошедшие в группе больных, получавших исключительно АРВТ. Описанные изменения привели к статистически значимому снижению соотношения между yIFN и IL-4 в группах, получавших препарат антител (р < 0,05; рис. 2 Г). Статистически значимых изменений плазменных концентраций IL-2 во всех исследуемых группах выявлено не было (рис. 2 Б), что может быть связано с угнетением пролиферации Т-лимфоцитов микобактериями туберкулеза. Статистически значимых различий между эффектами препарата антител, а также препарата антител и Перхлозона на состояние цитокиновой регуляторной сети не выявлено. Снижение вирусной нагрузки было отмечено во всех группах больных (рис. 3 А), при этом доля больных со сни жением менее 50 мл-1 составила от 31,5 % до 45 % (рис. 3 Б). Достоверных межгрупповых различий выявлено не было. У больных с коинфекцией ВИЧ/туберкулез, получавших только АРВТ, отмечалось достоверное снижение вирусной нагрузки, которое, в то же время, не сопровождалось значимыми изменениями в клеточном звене иммунитета и в соотношении цитокинов. По-видимому, это связано с влиянием туберкулеза на Т-лимфо-циты и сопряженными с этим нарушениями в цитокиновой регуляторной сети [2, 3, 4, 7]. С этих позиций добавление препарата антител к гликопротеину CD4 и IFN-y человека к схеме терапии представляется оправданным в силу иммуномодулирующих эффектов, включающих достоверное увеличение CD4+ клеток, повышение отношения CD4+ к CD8+ клеткам, а также достоверный рост плазменных концентраций IFN-y и IL-4, участвующих в противовирусном и противомикробном иммунитете [10]. При этом отмечалось достоверное снижение соотноше- *р < 0,05; ***р < 0,001. Рис. 2. Динамика состояния цитокиновой регуляторной сети у пациентов с коинфекцией ВИЧ/туберкулез на фоне проводимой терапии: А - плазменные концентрации yIFN, Б - концентрации IL-2, В - концентрации IL-4, Г - соотношение плазменных концентраций yIFN и IL-4. Выполнен двухфакторный дисперсионный анализ (RANOVA) с пост-хок тестом Ньюмена-Кеулса; сравниваемые группы данных обозначены горизонтальными линиями А 61012 10000"! 25- Сй О х 20ф Г g 15' О а t 10* МЛМЛЧ1 МИШ ШШ шт шт шт АРВТ АРВТ+ПАТ АРВТ+ПАТ+Перхлозон Более 50 котш мл ЕЕЭ Менее 50 когай мл Рис. 3. Динамика вирусной нагрузки у пациентов с коинфекцией ВИЧ/туберкулез: А - вирусная нагрузка ВИЧ, данные представлены в виде медиан, числами обозначены максимальные значения, превышающие 10 тыс. мл-1; Б - соотношение пациентов по вирусной нагрузке ВИЧ 44 Выпуск 2 (62). 2017 ШЭэз'щшСз ния между данными цитокинами, что говорит о развитии противовоспалительных реакций. Несмотря на отсутствие достоверных различий между группами по вирусной нагрузке ВИЧ, изменения, произошедшие в гуморальном и клеточном звене, наиболее значимым из которых является увеличение пула CD4+ клеток, носят благоприятный прогностический характер [1, 8, 9, 13]. Это позволяет рекомендовать совместное использование противотуберкулезного препарата Перхлозон и препарата антител к гликопротеину CD4 и у-интерферону человека в качестве терапевтического средства у больных с коинфекцией ВИЧ/туберкулез легких. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Включение в схему терапии больных с коинфекцией ВИЧ и туберкулезом легких препарата антител к гликопротеину CD4 и у-интерферону человека и противотуберкулезного препарата Перхлозон не сопровождалось значимыми изменениями количества СD3+ и CD8+ клеток, а также концентрации IL-2, однако увеличение количества CD4+ клеток и отношения CD4+ клеток к CD8+ клеткам, а также значительное повышение концентрации IL-4 может рассматриваться как благоприятный признак в терапии пациентов с коинфекцией ВИЧ и туберкулезом легких. ЛИТЕРАТУРА

About the authors

A. V. Strygin

Volgograd State Medical University; Volgograd Medical Research Center

Email: drumsav@mail.ru

A. S. Klyausov

Volgograd State Medical University; Volgograd Medical Research Center

A. M. Dotsenko

Volgograd State Medical University; Volgograd Medical Research Center

A. O. Strygina

Volgograd State Medical University; Volgograd Medical Research Center

E. I. Morkovin

Volgograd State Medical University; Volgograd Medical Research Center

References

Supplementary files