STUDY OF SOME ASPETS NEUROPROTECTIVE ACTIVITY OF PHENYLACETIC ACID AMIDES UNDER CONDITIONS OF FOCAL BRAIN ISCHEMIA

Full Text

Инсульт продолжает оставаться важнейшей медико-социальной проблемой, что обусловлено его высокой долей в структуре заболеваемости и смертности населения, со значительными показателями временных трудовых потерь и первичной инвалидности [5]. Инвалидизация вследствие инсульта занимает первое место среди всех причин первичной инвалидности [2]. В Российской Федерации проживают свыше 1 млн человек, перенесших инсульт, при этом треть из них составляют лица трудоспособного возраста, к труду же возвращается только каждый четвертый больной [3]. Таким образом, с учетом высоких показателей заболеваемости, смертности, а также инвалидизации среди выживших после инсульта пациентов следует констатировать все еще огромный экономический и социальный ущерб от этого заболевания. Таким образом, исходя из высокой медикосоциально-экономической роли ишемического инсульта, совершенствование уже имеющихся и разработка новых путей профилактики и фармакокоррекции церебральной ишемии считают одной из приоритетных задач современной медицины [4]. Недавние исследования в вопросе о постинсультной реабилитации укрепили идею о том, что нейропротективное воздействие в сочетании В качестве препарата сравнения использован пирацетам (800 мг/кг, Мосхимфарм-препараты, Россия) [9]. Препарат сравнения и исследуемые соединения вводили интрагастрально на следующие сутки после воспроизведения ишемии и далее на протяжении 3 суток. Исследуемые соединения, под лабораторными шифрами FacAc, FacPr, FisBut, Faib, вводили животным в дозе 30 мг/кг [12]. На четвертые сутки после моделирования церебральной ишемии проводили УРПИ и ТЭИ. Далее, крыс декапитировали под хлоралгидратным наркозом (350 мг/кг) и проводили оценку изменений величины зоны некроза. Оценку зоны некроза производили трифенил-тетразолиевым методом [8]. Обработку результатов эксперимента проводили методом вариационной статистики с применением пакета прикладных программ STATISTICA 6.0 (StatSoft, Inc., США для операционной системы Windows). Cравнение средних значений производили методом ANOVA с апостериорным критерием Ньюмена - Кейсла. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ В тесте УРПИ у крыс, получавших пирацетам, было установлено увеличение латентного периода первого захода в темный отсек в 4,0 раза (р < 0,05) по сравнению с группой крыс НК. Значительное увеличение времени захода в темный отсек также было замечено у группы, которой вводили исследуемое соединение под лабораторным шифром FacAC, -в 4,2 раза р < 0,05) относительно группы животных НК. На фоне введения соединений FacPr, FisBut отмечено повышение латентного времени захода в темный отсек по отношению к НК группе крыс в 3,8 (р < 0,05) и 3,9 раза (р < 0,05) соответственно. При введении животным исследуемого соединения под лабораторным шифром Faib статистически значимых изменений относительно НК животных не наблюдалось (рис. 1). со специфической терапией может снизить частоту ин-валидизации после перенесенного инсульта [1]. Актуальным для исследователей является поиск соединений, способных минимизировать последствия острых нарушений мозгового кровообращения, улучшая когнитивные процессы лиц, перенесших инсульт. К числу таких потенциально эффективных нейропротекторов можно отнести диамиды карбоновых кислот, действие которых направлено на восстановление митохондриальной функции [12]. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Оценить нейропротекторное действие амидов фенилуксусной кислоты в условиях фокальной ишемии головного мозга. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Эксперимент был проведен на 30 крысах-самцах линии Wistar массой 220-240 г, разделенных на 5 равных групп (п = 6). Эксперимент выполнен в соответствии с требованиями Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей. Предварительно животные были рандомизированы по поведенческой активности в тесте условный рефлекс пассивного избегания (УРПИ) [8] и тесте экстраполяционное избавление (ТЭИ), а также массе [13]. Согласно протоколу исследования, были сформированы следующие экспериментальные группы: первая группа крыс -ложнооперированные (Л/О) животные; вторая группа животных - группа негативного контроля (НК) - получала 0,9%-й раствор натрия хлорида в эквивалентном объеме группы крыс, которым вводили референтный препарат и исследуемые соединения. Второй и последующим группам крыс воспроизводили ишемию головного мозга методом необратимой правосторонней термокоагуляции средней мозговой артерии [3]. “Статистически значимо относительно НК группы крыс Рис. 1. Поведенческая активность экспериментальных животных в тесте «УРПИ» ВЕСТНИК Во н ГМУ под лабораторным шифром FacPr, FacAC и FisBut время «подныривания» было сокращено в 2,4 раза (р < 0,05); 2,2 раза (р < 0,05) и 2,3 раза (р < 0,05) соответственно в сравнении с группой животных НК (рис. 2). Время «подныривания» в тесте эктраполяционного избегания у группы, получавшей пирацетам, уменьшилось в 3,4 раза (р < 0,05) относительно группы крыс НК. После введения животным исследуемого соединения “Статистически значимо относительно НК группы крыс (р < 0,05) Рис. 2. Поведенческая активность экспериментальных животных в тесте «ТЭИ» раторными шифрами FacPr, FacAC, FisBut и Faib также вызывало уменьшение зоны некроза на 19,6 % (р < 0,05); 16,7 % (р < 0,05); 20,2 % (р < 0,05) и 19,8 % (р < 0,05) в сравнении с группой животных НК соответственно (рис. 3). При введении пирацетама крысам в течение трех дней наблюдалось уменьшение зоны некроза мозговой ткани: на 22,2 % (р < 0,05) относительно группы крыс НК. Введение животным исследуемых соединений под лабо “Статистически значимо относительно НК группы крыс (критерий Ньюмена - Кейсла; р < 0,05) Рис. 3. Влияние исследуемых соединений и пирацетама на некроз мозговой ткани в условиях фокальной ишемии эффективный тромболизис имеет ряд существенных недостатков (малое «терапевтическое окно», риск геморрагических осложнений), которые могут быть скорректированы путем применения соединений, обладающих нейропротекторной активностью [10]. Данное исследование было посвящено изучению нейропротекторного потенциала амидов фенилуксусной кислоты в условиях перманентной фокальной Несмотря на достигнутые успехи в профилактике, диагностике и лечении нарушения мозгового кровообращения, ишемический инсульт по-прежнему остается одной из ведущих медико-социально-экономических проблем современной медицины. Во многом данный факт связан со сложностью патогенеза и лечения данного патологического состояния. Известно, что ведущий метод терапии ишемического инсульта - ишемии у крыс. В итоге, было установлено, что введение исследуемых соединений способствовало восстановлению памятного следа у животных, что подтверждалось результатами, полученными в тестах «условный рефлекс пассивного избегания» и «экстраполяционное избавление». Также на фоне применения изучаемых веществ было отмечено снижение зоны некроза мозговой ткани по отношению к крысам, не получавшим фармакологическую поддержку. При этом подобное действие исследуемых амидов фенилуксусной кислоты может быть связано с влиянием данных соединений на несколько патогенетических механизмов повреждения головного мозга при ишемии. Так, в ранее проведенных исследованиях было установлено, что применение изучаемых веществ в условиях церебральной ишемии способствовало восстановлению митохондриальной функции, сопряженной с увеличением синтеза макроэргических фосфатов и подавлением реакций апоптоза [12]. Согласно литературным данным изучаемые вещества, как представители ряда производных фенилуксусной кислоты, вероятно, могут подавлять реакции воспаления в мозговой ткани и лимитировать глутаматно-кальциевую эксайтотоксичность. В работе Wang Y. и соавт. (2012), было установлено, что ами-дированные производные фенилуксусной кислоты проявляют свойства антагонистов рецепторов DP1 (рецепторов простагландина D2) [14], блокада которых существенно уменьшает интенсивность нейровоспаления и эксайтотоксичность [7]. Кроме того, на фоне введения исследуемых соединений возможно подавление окислительного стресса, что связано с наличием у производных фенилуксусной кислоты антиоксидантных свойств [11]. ЗАКЛЮЧЕНИЕ 1. Воспроизведение фокальной ишемии головного мозга вызывает некроз мозговой ткани у крыс (52,38 %), а также когнитивные нарушения, что подтверждается в тестах УРПИ и ТЭИ, проведенных после операции. 2. Введение крысам пирацетама (800 мг/кг) приводило к уменьшению зоны некроза головного мозга у животных на 22,2 % (р < 0,05), а также восстановлению памятного следа у животных. 3. Применение исследуемых соединений также способствовало уменьшению величины зоны некроза мозговой ткани - FacPr - 19,6 % (р < 0,05); FacAC - 16.7 % (р < 0,05); FisBut - 20,2 % (р < 0,05) и Faib - 19.8 % (р < 0,05) - и восстановлению когнитивных функций у крыс. 4. Таким образом, полученные результаты позволяют говорить о перспективности дальнейшего углубленного изучения диамидов карбоновых кислот на предмет нейропротекторной активности.

About the authors

M. V. Chernikov

Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute affiliate of the FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation

A. V. Sosnovskaya

Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute affiliate of the FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation

D. I Pozdnyakov

Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute affiliate of the FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation

Email: pozdniackow.dmitry@yandex.ru

References

Supplementary files