СОДЕРЖАНИЕ ЦИТОКИНОВ В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БЕРЕМЕННЫХ ЖЕНЩИН С СИНДРОМОМ ПОТЕРИ ПЛОДА В АНАМНЕЗЕ

Аннотация

Исследование основано на определении сывороточного уровня цитокинов у женщин с физиологическим течением беременности и с синдромом потери плода в анамнезе; проведен сравнительный анализ с содержанием цитокинов у соматически здоровых женщин контрольной группы.

Полный текст

Проблема невынашивания беременности в насто- В последние годы внимание исследователей приящее время является не только медицинской, но и со- влекает роль естественных Т-регуляторных клеток в инциальной, что связано со снижением естественного дукции толерантности к аллоантигенам плода, которые прироста населения. Таким образом, возникает необхо- в свою очередь позволяют расценивать их в качестве димость поиска новых путей к изучению и решению основных претендентов на роль клеток, контролируюпроблемы синдрома потери плода. Особое значение щих баланс в системе «мать-плод», а также предполоимеют прогнозирование и доклиническая диагностика жить их участие в патогенезе невынашивания беременнарушений развития беременности, а усилия, направ- ности [7, 9]. Однако сообщения об этом в доступной ленные на ее сохранение и полноценное течение, дол- литературе практически отсутствуют. В этом аспекте жны прилагаться еще до ее наступления [4, 5, 6]. представляет интерес изучение функции Th1 и Th2 в Несмотря на мультифакторную природу невына- плане оценки местного цитокинового статуса, баланса шивания беременности, одними из первостепенных и синтеза цитокинов периферической крови [2, 3]. причин являются иммунные механизмы, которые в свою очередь активируют клеточные и биохимические реак- ЦЕЛЬ РАБОТЫ ции, запускающие каскад патофизиологических процес- Количественное определение сывороточного сов, приводящих к отторжению плода [1, 8]. уровня провоспалительных и противовоспалительных Выпуск 2 (46). 2013 131 цитокинов в периферической крови беременных женщин с физиологической беременностью и с синдромом потери плода в анамнезе во втором триместре беременности, а также сравнение полученных данных с популяционными. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Обследовано 192 пациентки, наблюдающихся в МУЗ «Женская консультация № 5» и МУЗ «Женская консультация № 6» г. Волгограда. Все обследуемые были разделены на три группы. Первую группу составили 39 женщин с физиологическим течением беременности, вторую — 64 беременных с синдромом потери плода в анамнезе. Группы были репрезентативны по возрасту (29 ± 4,05) лет и сроку гестации (18 ± 3,2) недель. Контрольную группу составили 89 небеременных соматически здоровых женщин без репродуктивных потерь в анамнезе [средний возраст (27,8 ± 5,06) лет]. У всех пациенток было получено информированное согласие на использование данных обследования в научных целях и согласие этического комитета на проведение исследования. Материалом для исследования послужила периферическая кровь пациенток, полученная при плановом посещении врача без проведения дополнительных манипуляций. Цитокины определялись с помощью наборов реактивов для иммуноферментного анализа производства ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург): «ИФА-^-4», «ИФА-IL-e», «ИФА-^-17А», «ИФА-IL-W», «ИФА-^-1в», «ИФА-IFN-gamma», «ИФА-TNF-alpha» на фотометре им-муноферментном планшетном «Эфос» 9305 (ОАО «Московский завод Сапфир», Москва). В наборах использован «сэндвич»-вариант твердофазного иммуноферментного анализа. Концентрация интерлейкинов в определяемых образцах рассчитывалась на основании калибровочной кривой, построенной по полученным значениям калибровочных проб. Статистические расчеты производили с помощью пакета прикладных программ Statistica 6.0 фирмы StatSoft, Inc. (США). Значимость различий при сравнении групп оценивалась непараметрическим U-критерием Манна-Уитни, достоверность различия частот встречаемости оценивали с помощью критерия ч2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Анализ содержания провоспалительных (ИЛ-1 в, ИЛ- 6, ИЛ-17а, IFNn TNF6) и противовоспалительных цитокинов (ИЛ-10, ИЛ-4) в сыворотке крови обследуемых групп женщин показал значимое увеличение количества TNF6 [(18,7 ± 4,2) пг/мл, р < 0,05] и ИЛ-17а (4,3 ± 1,0) пг/мл во второй группе беременных с синдромом потери плода в анамнезе по сравнению с первой группой женщин с физиологическим течением беременности [(7,4 ± 1,0) и (1,2 ± 0,2) пг/мл соответственно]. Отмечено, что в контрольной группе небеременных соматически здоровых женщин уровень ИЛ-17а практически не отличался от такового в первой группе обследуемых (1,3 ± 0,1) пг/ мл), в то время как средние значения показателя TNF6 были ниже в 1,5 и 4 раза у беременных первой и второй групп [(4,73 ± 0,5) против (7,4 ± 1,0) и (18,7 ± 4,2) пг/мл соответственно, р < 0,05]. В работе установлено, что среднее содержание IFN в сыворотки крови достигает своего максимума у обследуемых первой группы с физиологической гестации [(7,1 ± 1,4) пг/мл, р < 0,05] со снижением уровня интерферона во второй и контрольной группах [(4,2 ± 1,0) и (2,2 ± 1,4) пг/мл соответственно] (табл. ). Периферический уровень цитокинов у обследуемых групп женщин, M ± m, пг/мл Показа тель Группы обследуемых контрольная группа группа 1 (женщины с физиологическим течением беременности) группа 2 (беременные женщины с синдромом потери плода в анамнезе) ИЛ-10 2,2 ± 0,3 4,2 ± 0,1 6,5 ± 1,4* ИЛ-1в 7,4 ± 0,8 8,0 ± 1,0 5,9 ± 0,9 ИЛ-6 5,0 ± 1,5 4,3 ± 1,1 6,4 ± 1,6 ИЛ-17а 1,3 ± 0,1 1,2 ± 0,2 4,3 ± 1,0 * ИЛ-4 2,2 ± 0,6 7,4 ± 1,7* 6,9 ± 1,7* !ПМг 2,2 ± 1,4 7,1 ± 1,4* 4,2 ± 1,0 TNF6 4,7 ± 0,5 7,4 ± 1,0 18,7 ± 4,2* *р < 0,05, сравнение с контрольной группой по U-критерию Манна-Уитни. Согласно литературным данным, определенный уровень TNF6 необходим для нормального развития беременности, так как ограничивает процессы синтеза ДНК клетками трофобласта, которые экспрессируют рецепторы для TNF6. Однако избыточная продукция TNF6 приводит к нарушению микроциркуляции и тканевой гипоксии, что может негативно сказываться на развитии беременности. В результате происходит прогрессивное снижение маточно-плацентарного кровотока и нарушение метаболической, трофической, гормональной функции плаценты. ИЛ-17а стимулирует выработку ИЛ-6, ИЛ-8, Г-КСФ, TNF6, простаглан-дина Е2 клетками эпителия, эндотелия и фиброблас-тами, проявляет выраженную провоспалительную активность. Следовательно, повышенный уровень ИЛ-17а свидетельствует о наличии воспалительного компонента в сыворотке крови беременных женщин с синдромом потери плода в анамнезе. Для анализа баланса периферического уровня цитокинов оценивалось содержание противовоспалительных ИЛ-10 и ИЛ-4. При этом наблюдалось статистически значимое увеличение содержания ИЛ-10 [(6,5 ± 1,4) пг/мл, р < 0,05] и ИЛ-4 [(6,9 ± 1,7) пг/мл, р < 0,05] в группе женщин с синдромом потери плода в анамнезе по отношению к контрольной группе [в среднем (2,2 ± 0,5) пг/мл]. Обращает на себя внимание, что у женщин с физиологическим течением беременности наблюдались более вы 132 Выпуск 2 (46). 2013 сокие значения уровня ИЛ-4 (7,4 ± 1,7) пг/мл по сравнению с таковыми показателями во второй группе обследуемых (6,9 ± 1,7) пг/мл. Сравнительные данные уровня цитокинов в группах обследуемых женщин показали (рис.), что при физиологической беременности наиболее высокие показатели выявлены у ИЛ-1 в (8,0 ± 1,0) и ИЛ-4 (7,4 ± 1,7) пг/мл, при синдроме потери плода — ИЛ-10 (6,5 ± 1,4), ИЛ-6 (6,4 ± 1,6), ИЛ-17а (4,3 ± 1,0) и TNF6 (18,7 ± 4,2) пг/мл, у небеременных соматически здоровых женщин — достоверно высоких показателей цитокинов не выявлено. пг/мл 20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 шей □ Контрольная группа ■ 1 группа □ 2 группа ИЛ-10ИЛ-1В ИЛ-6 ИЛ- ИЛ-4 IFN TNFa 17а Рис. Сравнительные данные уровня цитокинов в группах обследуемых женщин (*р < 0,05, при сравнении с группой женщин с физиологической беременностью; #р < 0,05 при сравнении с контрольной группой) ИЛ-4 и ИЛ-10 являются противовоспалительными цитокинами, повышенное содержание которых во время беременности является благоприятным прогностическим признаком, обеспечивая иммуносупрессию по отношению к развивающейся фетоплацентарной единице. Напротив, сохраняющийся высокий уровень про-воспалительных цитокинов TNF6 и ИЛ-17а в группе женщин с синдромом потери плода в анамнезе свидетельствует о неустановившемся ко второму триместру иммунном балансе в системе мать-плод-плацента. Данное состояние может провоцировать угрозу прерывания беременности, наблюдающуюся в данной группе. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Таким образом, установлено, что в процессе физиологической беременности продукция цитокинов в различной степени повышается, особенно за счет ИЛ-1 в и ИЛ-4. У беременных женщин с синдромом потери плода в анамнезе наблюдаются нарушения баланса про- и противовоспалительных цитокинов, что проявляется повышением уров ня ИЛ-10, ИЛ-6, ИЛ-17а, TNF6. Преобладание провоспали-тельных компонентов (TNF6 и ИЛ-17а) на фоне высокого уровня противовоспалительных цитокинов (ИЛ-10 и ИЛ-4) свидетельствует о несовершенности системы перестройки иммунной системы в сторону преобладания иммуносуп-рессорных механизмов ко второму триместру беременности. При физиологическом течении гестационного процесса иммунный баланс устанавливается к 10—12 неделе. Сохраняющееся состояние угрозы выкидыша во втором триместре у большинства женщин с синдромом потери плода в анамнезе может быть спровоцировано атакой про-воспапительных факторов на трофобласт Следовательно, обнаружение цитокинового дисбаланса наряду с тщательным сбором акушерско-гинекологического анамнеза позволяет своевременно предупредить развитие осложнений во время беременности, в том числе во втором триместре. Особенно важным представляется определение уровня цитокинов на этапе прегравидарной подготовки, что позволит провести своевременную профилактику нарушения течения беременности, в том числе и потерю плода.