ФИЗИЧЕСКОЕ РАЗВИТИЕ И ОБЩЕЕ СОСТОЯНИЕ ПОТОМСТВ ОТ КРЫС САМОК С АЛИМЕНТАРНОЙ ГИПОМАГНЕЗИЕМИЕЙ

Полный текст

Исследованиями показано, что прогрессирующая угрозе прерывания беременности, фетоплацентарной гипомагнезиемия в анамнезе беременных женщин недостаточности, преждевременным родам [1]. Данное может способствовать повышению тонуса матки, состояние зачастую негативно сказывается и на качестве антенатального развития плода: способствует задержке роста и развития, нарушению терморегуляции, может вызвать частичную редукцию отдельных сегментов пальцев или, наоборот, полидактилию [2] и, вероятно, впоследствии негативно влиять на гармонизацию постнатального развития плода. Однако в доступных литературных источниках сведений на данную тему представлено недостаточно [3]. В некоторых источниках [4] у потомств отмечено снижение веса и увеличение гибели. В этой связи сочли целесообразным в экспериментах на животных исследовать физическое развитие потомства в онтогенезе, рожденных от крыс-самок с алиментарной гипомагнезиемией различной степени тяжести. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Исследовать влияние алиментарной гипомагнезие-мии на родоразрешение крыс-самок и постнатальное развитие их потомств. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Исследования проведены на потомствах (п = 48), рожденных от белых беспородных крыс-самок (п = 80) с экспериментально воспроизведенной моделью алиментарной гипомагнезиемии. Для проведения экспериментов самки крыс были разделены на 4 группы -2 контрольные и 2 опытные. Опытные группы крыс-самок предварительно находилась на магнийдефицит-ной диете [5] в течение 2 (1-я опытная группа, п = 20) и 4 (2 опытная группа, п = 20) месяцев, контрольные группы 1 и 2 (п = 20 в каждой) в этот же период времени находились на стандартном рационе питания [ГОСТ 34566-2019; ГОСТ Р 51232-98]. Наличие состояния гипомагнезиемии у крыс-самок отслеживали по уровню магния в плазме крови и эритроцитах по окончанию 2 и 4 месяцев содержания животных на магнийдефицитной диете. Снижение данного нутриента в плазме крови от 0,7 молль/л и в эритроцитах от 1,7 ммоль/л [6] являлось показанием для проведения спаривания крыс-самок с интактными самцами. Спаривание проводили по стандартной методике [7]. После обнаружения сперматозоидов в вагинальном мазке (1-й день беременности) крыс-самок отсаживали в индивидуальные клетки. При этом самки опытных групп продолжали находиться на магнийдефицитной диете до родов. Наблюдения за потомствами после рождения проводили в течение 2 месяцев. Отмечали: выживаемость, общее состояние, прирост массы тела, физическое развитие и формирование сенсорно-двигательных рефлексов [7]. Статистическую обработку результатов проводили в программе Microsoft Excel. Достоверность изменений в опытной группе относительно группы контроль оценивали с помощью t-критерия Стьюдента. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ По результатам измерений уровня магния в плазме крови и эритроцитах, проведенных по окончанию 2 месяцев эксперимента, установлено, что по сравнению с группой интактного контроля 1 у крыс-самок опытной группы 1 уровень магния в плазме крови снизился на 54,5 % р < 0,001), а в эритроцитах - на 38,2 % р < 0,001), что соответствовало у них содержанию уровня магния в плазме крови - 0,65 ммоль/л и в эритроцитах - 1,39 ммоль/л. По окончанию 4 месяцев эксперимента у крыс-самок в опытной группе 2 по сравнению с группой контроля 2 уровень магния в плазме крови снизился на 77,2 % р < 0,001), в эритроцитах - на 41,3 % (р < 0,001), что соответствовало у них содержанию уровня магния в плазме крови - 0,33 ммоль/л и в эритроцитах - 1,32 ммоль/л. Забеременевших самок после спаривания с интактными самцами распределяли по группам, отсаживали в индивидуальные клетки, следили за их состоянием и регистрировали количество разродившихся особей. По результатам родоразрешения выявлено, что у крыс-самок 1-й опытной группы из 15 забеременевших разродилось 12 особей, с общим количеством крысят, равным 84. Во 2-й опытной группе и з 15 забеременевших разродилось 6 самок с общим количеством крысят, равным 42. В контрольных группах 1 и 2 разродились все забеременевшие самки (по 15 в каждой группе) с общим количеством крысят, равным 131 и 111 соответственно. Таким образом, полученные результаты могут свидетельствовать о повреждающем влиянии гипомагнезиемии на антенатальное развитие плода. По результатам наблюдений за потомствами от этих самок до 2-месячного возраста установлено, что жизнеспособность крысят от самок крыс в опытных группах была отчетливо ниже, чем в контрольных группах (табл. 1). Индекс выживаемости потомства в 1-й опытной группе составил 31,0 %, во 2-й опытной группе - 69,0 %, в контрольных группах 1 и 2 - 95,4 и 94,0 % соответственно. Таблица 1 Влияние 2- и 4-месячной алиментарной гипомагнезиемии на выживаемость потомства (М ± m) Исследуемые параметры Контрольная группа Опытная группа 2-месячный курс магнийдефицитной диеты Общее количество крысят при рождении 131 84 Общее количество выживших крысят по окончанию 1-го месяца наблюдений 125 37 Общее количество выживших крысят по окончанию 2-х месяцев наблюдений 125 26 Индекс выживаемости потомства, % 95,4 31,0 4-месячный курс магнийдефицитной диеты Общее количество крысят при рождении 111 42 Общее количество выживших крысят по окончанию 1-го месяца наблюдений 104 35 Общее количество выживших крысят по окончанию 2 месяцев наблюдений 104 26 Индекс выживаемости потомства (%) 94,0 62,0 Прирост массы тела у потомств крыс опытных групп был положительным, но значительно отставал от контрольных значений (табл. 2). В сравнении с группой контроль 1 у потомств от самок крыс 1-й опытной группы прирост массы тела был ниже: в одномесячном возрасте на 48,7 Д% (р < 0,001), в 2-месячном возрасте - на 49,9 Д% (р < 0,001). У потомств от самок крыс 2-й опытной группы прирост массы тела также отставал от контрольных значений: в одномесячном возрасте на 65,1 Д% (р < 0,001), в 2-месячном - на 57,0 Д% (р < 0,001). Таблица 2 Прирост массы тела потомств, от самок крыс с 2- и 4-месячной алиментарной гипомагнезиемией, г, М ± m Периоды измерений Контрольная группа Опытная группа 2-месячный курс магнийдефицитной диеты 4 дня 8,40 ± 0,13 7,00 ± 0,13*** 1 месяц 43,80 ± 0,92 22,10 ± 0,62*** 2 месяца 115,70 ± 1,36 51,80 ± 1,81*** 4-месячный курс магнийдефицитной диеты 4 дня 8,30 ± 0,14 7,30 ± 0,13*** 1 месяц 46,90 ± 0,92 19,10 ± 0,77*** 2 месяца 114,70 ± 0,93 47,50 ± 1,28*** ***p < 0,001 различия достоверны по сравнению с интактным контролем. Наряду с этим также выявлено, что физическое развитие по сравнению с контролем 1 у потомств 1-й опытной группы отчетливо запаздывало, но при этом по отдельным параметрам было сформировано к 2-месячному возрасту. В половом развитии - сроки опущения семенников у самцов отставали от значений контроля на 8,3 дня (р < 0,001), а открытия влагалища у самок - на 8,5 дня (р < 0,001). Также у этих крысят обнаружено запаздывание открытия глаз - на 1,9 дня (р < 0,001), появления резцов - на 1,5 дня (р < 0,001), обрастания шерстным покровом - на 1,5 дня (р < 0,001), отлипания ушной раковины - на 0,1 дня (р < 0,001). У потомств крыс от самок 2-й опытной группы прослеживалось еще большее отставание сроков физического развития от контрольной группы 2, чем в 2-месячных исследованиях. Опущение семенников у самцов запаздывало относительно контроля на 8,8 дня (р < 0,001), открытие влагалища у самок - на 10 дней (р < 0,001), открытие глаз - на 3,1 дня (р < 0,001), появление резцов - на 2,5 дня (р < 0,001), обрастание шерстным покровом - на 2,1 дня (р < 0,001), отлипание ушной раковины запаздывало на 0,9 дня (р < 0,001). В развитии сенсорно-двигательных рефлексов у потомств в опытной группе 1 по сравнению с контролем 1 наблюдалось запаздывание сроков формирования таких рефлексов, как «переворачивание на плоскости» (на 1,4 дня; р < 0,001), «отрицательный геотаксис» (на 1 день; р < 0,001), «избегание обрыва» (на 0,3 дня; р < 0,001), «зрачковый» рефлекс и «избегание обрыва, вызванного визуальным стимулом» (на 2,1 дня; р < 0,001), «мышечная сила» (на 2,6 дня; р < 0,001), «переворачивание в свободном падении» (на 1,6 дня; р < 0,001). Во второй опытной группе по сравнению с контролем 2 формирование рефлекса «переворачивание на плоскости» запаздывало на 2,1 дня (р < 0,001), «отрицательный геотаксис» - на 1,5 дня (р < 0,001), «избегание обрыва» - на 1,7 дня (р < 0,001), «зрачкового» рефлекса - на 3,1 дня (р < 0,001), «избегание обрыва, вызванного визуальным стимулом» - на 3,5 дня (р < 0,001), «мышечной силы» - на 3,6 дня (р < 0,001), «переворачивание в свободном падении» - на 2,9 дня (р < 0,001). Таким образом, можно предположить, что наличие у крыс-самок гипомагнезиемии различной степени тяжести негативно сказывается на пренатальном развитии плодов, что впоследствии влияет на состояние плодов и их физическое развитие в постнатальном периоде. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Из проведенных исследований можно предположить, что под действием алиментарной гипомагне-зиемии у беременных крыс-самок нарушаются процессы антенатального формирования плодов, влияющие на массу тела потомств и снижение индекса их рождаемости. В свою очередь, пренатально-повреждающие эффекты негативно отражаются на выживаемости, общем состоянии и физическом развитии потомств в постнатальном онтогенезе. Полагаем, что проведенные исследования и полученные данные можно использовать в качестве экспериментальной модели для оценки влияния новых магнийсодержащих препаратов на фертильность крыс-самок, протекание у них беременности и развития их потомств в постнатальный период.

Об авторах

Т. М Коржова

Волгоградский медицинский научный центр инновационных лекарственных средств с опытно-промышленным производством; Волгоградский медицинский научный центр

Email: bundikova1@mail.ru
младший научный сотрудник лаборатории токсикологии Волгоград Россия

Л. И Бугаева

Волгоградский медицинский научный центр инновационных лекарственных средств с опытно-промышленным производством; Волгоградский медицинский научный центр

Email: li_bugaeva@mail.ru
доктор биологических наук, заведующая лабораторией токсикологии Волгоград Россия

С. А Лебедева

Волгоградский медицинский научный центр инновационных лекарственных средств с опытно-промышленным производством; Волгоградский медицинский научный центр

Email: lebedeva.farm@mail.ru
кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, лаборатория синтеза инновационных лекарственных средств Волгоград Россия

А. Ю Гетманенко

Волгоградский медицинский научный центр инновационных лекарственных средств с опытно-промышленным производством; Волгоградский медицинский научный центр

Email: dustgod@mail.ru
научный сотрудник лаборатории токсикологии Волгоград Россия

А. А Спасов

Волгоградский медицинский научный центр инновационных лекарственных средств с опытно-промышленным производством; Волгоградский медицинский научный центр

Email: aspasov@mail.ru
академик РАМН, Заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой фармакологии и биоинформации Волгоград Россия

Список литературы

Дополнительные файлы