The genetic heterogeneity of Streptococcus pyogenes strains of emml2 genotype

Abstract


Streptococcus pyogenes strains of emml 2 genotype, isolated from children in Saint-Petersburg in 2007, were investigated employing different molecular-genetic approaches. Smal restriction patterns of genomic DNA of the strains were analyzed. Distribution of the phage genes, including virulence genes and integrase genes, was studied. The significant genetic heterogeneity was observed. The transposon gene, which has not been previously discovered in S. pyogenes strains, was identified.

Full Text

ВВЕДЕНИЕ Streptococcus pyogenes или стрептококк группы А (СГА) - патогенный микроорганизм человека, вызывающий локальные, генерализованные и системные заболевания. Начиная с середины 1980-х гг., во многих странах наблюдалось увеличение числа тяжелых инвазивных инфекций (некротический фасцит и миозит), вызванных СГА и носивших эпидемический характер [2, 5, 13, 15, 17, 18, 21]. В настоящее время распространенность снизилась до умеренных цифр, а сами заболевания являются спорадическими. Все СГА разделяют на М-серотипы или етт-генотипы, в зависимости от антигенной специфичности М-белка или нуклеотидной последовательности 5’-конца кодирующего его етт-тена соответственно [10]. Определенные М-серотипы (или еот/77-генотипы) S. pyogenes нередко ассоциируются с развитием того или иного осложнения. В зависимости от характера пострептококкового осложнения штаммы S. pyogenes подразделяют на ревматогенные и нефритогенные. Так, штаммы серотипов М5, Мб и М18 часто связаны с развитием ревматизма, а штаммы серотипов Ml, М2, М4, Ml2, М25, М42, М49, М56, М57 и М60 - с развитием гломерулонефрита [6]. Кроме упомянутых М-серотипирования и emm- генотипирования, для сравнительной характеристики штаммов S. pyogenes используют разнообразные методы исследования, позволяющие оценить степень их генетической гетерогенности, такие как электрофорез в пульсирующем электрическом поле (pulsed field gel electrophoresis, PFGE), ПЦР со «случайной» затравкой (randomly amplified polymorphic DNA, RAPD) и др. Геномы штаммов 5. pyogenes содержат большое количество генов умеренных бактериофагов, включая гены, кодирующие разнообразные токсины, экспрессия которых повышает вирулентность штаммов [3, 11,26]). Суммарный размер ДНК профагов может достигать 12% общего размера генома S. pyogenes [3, 11, 26]. При этом показано, что значительная часть отличий между штаммами S. pyogenes связана с различиями в составах и последовательностях профагов, содержащихся в их геномах [3]. Поэтому наличие или отсутствие фаговых генов в бактериальном геноме рассматривается в качестве одной из важных генетических характеристик штаммов S. pyogenes. Цель данной работы заключается в генетической характеристике штаммов S. pyogenes, генотипа етт12, выделенных от детей в Санкт-Петербурге в течение 2007 г. По существу, в настоящей работе продолжается изучение вопроса о наличии или отсутствии связи между генетической гетерогенностью и профилем фаговых генов штаммов одного и того же етт типа, но выделенных в разных географических зонах. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Объектами исследования служили 18 эпидемически несвязанных штаммов S. pyogenes, выделенных от детей-носителей, а также от больных скарлатиной, острым и хроническим тонзиллитом и гнойным синуситом в Санкт-Петербурге в течение 2007 г. (табл. 1). Принадлежность штаммов к СГА устанавливалась в реакции коаглютинации посредством диагностикума «Стреп-тест А» («Аквапаст», Санкт-Петербург). Культуры S. pyogenes выращивали в бульоне Todd-Hewitt («HiMedia», Индия) в течение 18 ч при 37 °С. Хромосомную ДНК выделяли фенолхлорофор- менной экстракцией, ел/т-генотип определяли согласно методике, опубликованной на сайте Centers for Disease Control and Prevention (www.cdc.gov/ncidod/ biotech/strep/protocol_emm-type.htm). Фрагменты ДНК выделяли из агарозного геля посредством набора «Bacterial Genomic DNA Miniprep kit» («Axygen», США). Секвенирование ДНК выполняли на секвена- торе АВІ Prism 3100 Perkin-Elmer (США). Таблица 2 Профили фаговых генов штаммов S. pyogenes Гены Номер профиля число штаммов) A1 (10) A2 (2) A3 (1) A4 (1) A5 (1) A6(l) A7 (1) A8 (1) speA - - - - - + + spel, speH + + + + - + + + speL, sdci - - - - - - - speCJ - - - - + - + ssa - + - - - + - + speC + + + - - + + + sla - - - - - + - smeZ + + + + + + + + inti, int2 - - - - - + - int3 + + - - - + + int4 - + - - - + + + Ш5 + + + + - + + + Ш6 - - - - - - - int7 - - + - + + + - Ш8 - - - - - + - - Ш9 - - - - - - - - Символы «+» и «-» - соответственно наличие или отсутствие фагового гена в бактериальном геноме. Таблица 1 Штаммы S. pyogenes генотипа етт!2, использованные в работе Номер штамма Диагноз Материал 12 Синусит Гной 94, 114, 118 Скарлатина Мазок из зева 97 Острый тонзиллит 120, 135, 137, 139, 143, 144, 152, 153, 155, 164, 170, 171 Носительство 128 Хронический тонзиллит Амплификацию фрагментов фаговых генов, кодирующих токсины и интегразы (табл. 2), проводили с использованием праймеров, опубликованных ранее [27]. Для анализа штаммов методом RAPD проводили ПЦР с использованием праймера Н2 (5’-CCTCCCGCCACC-3’) [23] в смеси объемом 50 мкл, содержащей 20 нг хромосомной ДНК. Амплификацию осуществляли в следующем режиме: первичная денатурация ДНК - 3 мин при 95 °С; 30 циклов - 15 сек при 95 °С; 1 мин при 38 °С; 1 мин при 72 °С; и окончательная достройка - 10 мин при Таблица 3 Сопоставление результатов анализов штаммов S. pyogenes методами ПЦР, RAPD и PFGE Номер штамма Профиль фаговых генов Паттерн RAPD Паттерн PFGE 97 А2 В1 СЗ 171 118 А1 С С1 137 152 153 155 164 170 94 В2 С2 114 120 С5 139 А6 В4 С1 143 А8 В1 12 АЗ С4 128 А4 С6 144 А7 В5 С8 135 А5 ВЗ С7 Рис. 1. Паттерны RAPD штаммов S. pyogenes. Треки 1-5 соответствуют паттернам RAPD В1 - В5. Трек 6 - ДНК маркер (400 п.н., 800 п.н., 1200 п.н. и 2000 п.н. -400, 800, 1200 и 2000 пар нуклеотидов соответственно). Стрелками обозначены фрагменты ДНК, секвенированные в настоящей работе 72 °С. Электрофорез ПЦР продуктов проводили в 1% агарозном геле, и ДНК визуализировали бромистым этидием в проходящем УФ-свете. Электрофорез в пульсирующем электрическом поле проводили согласно методике [9]. Для рестрикции хромосомной ДНК использовали фермент Smal. Разделение фрагментов осуществляли в электрофоретической камере CHEF-DR-III («Віо-Rad», США) в 1% агарозном геле в течение 30 ч, в интервале пульсов от 4 до 40 сек при напряжении 6 В/см2. РЕЗУЛЬТАТЫ Гетерогенность штаммов S. pyogenes генотипа етт12 по наличию фаговых генов. В ходе работы первоначально была использована коллекция из 173 штаммов S. pyogenes. У случайно отобранных 64 штаммов был изучен елгот-генотип, и 18 штаммов 5. pyogenes генотипа етт12, наиболее часто встречающегося среди исследованных штаммов, были выбраны для дальнейшей работы. Данные штаммы были проанализированы методом ПЦР на наличие в геноме фаговых генов. В результате исследования оказалось, что во всех исследованных штаммах генотипа етт12 присутствовал ген smeZ, кодирующий токсин Z (табл. 2). Большинство штаммов содержали гены spel (94,4%), speH (94,4%) и speC (88,9%), кодирующие пирогенные токсины СГА типов I, Н и С соответственно. Фаговые гены speA (ген пирогенного токсина А), ssa (ген суперантигена) и sla (ген фосфолипазы А2) обнаруживались значительно реже и присутствовали у 11,1%, 22,2% и 5,6% штаммов соответственно (табл. 2). Геномы большинства исследованных штаммов (14 из 18) содержали от двух до трех генов, кодирующих различные фаговые интегразы. Наиболее распространенными были гены int5 (94,4%) и іпіЗ (77,8%), в то время как гены inti (5,6%) и Ш8 (5,6%) обнаруживались крайне редко (табл. 2). Гены int.6 и int9 отсутствовали у всех исследованных штаммов. В целом, среди 18 исследованных штаммов было выявлено 10 профилей (А1 - А10) фаговых генов (табл. 3). Профиль А1 оказался доминирующим. Он был характерен для 10 исследованных штаммов. Анализ штаммов методом RAPD. При изучении этих же 18 штаммов методом RAPD было выявлено 5 различных паттернов (В 1 - В5), два из которых были характерны для 83,3% штаммов (паттерн В1 - для 12 штаммов, паттерн В2 - для 3 штаммов) (рис. 1). При анализе паттернов RAPD выявлено несколько фрагментов ДНК, встречающихся не у всех штаммов (рис. 1). Первый фрагмент размером около 550 п.н. присутствовал только в паттернах В2 (3 штамма) и ВЗ (1 штамм); второй фрагмент размером около 1100 п.н. - только в паттерне ВЗ (1 штамм). В результате секвенирования оказалось, что последовательность фрагмента размером около 550 п.н. гомологична последовательности одного из генов (ORF24, локус - СР001015) транспозона, который, в основном, встречается среди штаммов S. pneumoniae и никогда ранее не был обнаружен у 5. pyogenes [7]. Секвенирование второго фрагмента показало, что его последовательность гомологична последовательности одного из фаговых генов, функция которого в настоящий момент неизвестна [15]. Анализ штаммов методом PFGE. В результате исследования штаммов методом электрофореза в пульсирующем электрическом поле было выявлено 8 паттернов (Cl - С8) (рис. 2). Паттерн С1 был обнаружен у 9 из 18 штаммов, по 2 штамма имели паттерны С2 и СЗ, по 1 штамму - паттерны С4, С5, С6, С7, С8. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ Изучение распространенности генов фаговых токсинов и интеграз. В результате исследования оказалось, что геномы большинства штаммов генотипа етт12 (17 из 18, 94,4%) содержали гены spel и speH, кодирующие пирогенные токсины СГА типов I и Н соответственно (табл. 2). Высокая распространенность гена speH среди исследованных штаммов (94,4%) согласуется с данными литературы в отношении штаммов генотипа етт12 (81,5%), а также с данными, полученными нами ранее (100%) [1,7]. В то же время, согласно литературным данным, ген spel практически не был распространен среди штаммов генотипа етт12\ он встречался лишь у 1,8% штаммов [8], в отличие от штаммов, исследованных в настоящей работе. Это не удивительно, если допустить, что у исследованных нами штаммов гены spel и speH принадлежат одному и тому же профагу (поэтому их распространенность одинаково высока), а у штаммов, изученных другими авторами, - разным профагам. Основанием для этого предположения являются также данные, согласно которым у штаммов Manfredo и MG AS9429 [4] все три гена {spel, speH и int5) входят в состав профагов МапЗ и 9429.2 соответственно. В то же время у ряда штаммов, например SF370, данные гены принадлежат разным профагам [4, 11], что может объяснить различную распространенность генов spel, speH и int.5, отмеченную ранее [1, 7, 8]. У всех исследованных нами штаммов генотипа етт12 присутствие генов spel и speH коррелировало с присутствием гена, кодирующего фаговую интегразу in(5. Таким образом, представляется обоснованным, что 17 из 18 исследованных штаммов содержат в геноме профаг, сходный с профагом МапЗ или 9429.2, ранее описанными в литературе [4]. В настоящем исследовании показано, что 16 из 18 штаммов (88,9%) содержали ген speC, кодирующий пирогенный токсин типа С. В настоящее время ген speC широко распространен среди штаммов S. pyogenes различных генотипов, в том числе генотипа еттП [8, 12, 16, 29]. Возможно, это обусловлено тем, что профаг, содержащий ген speC, является более ранним приобретением по сравнению с другими профагами S. pyogenes. Геномы большинства исследованных штаммов содержали от двух до трех генов, кодирующих различные фаговые интегразы. К настоящему времени не обнаружены штаммы У pyogenes, содержащие в геноме менее двух или более шести профагов [3]. Однако в настоящей работе в геноме двух штаммов (№ 128 и № 135) было обнаружено только по одному гену интегразы. Это может быть вызвано тем, что геномы данных штаммов содержат ген интегразы с неизвестной в настоящее время нуклеотидной последовательностью. В одном из штаммов (№143) было обнаружено 7 генов интеграз, что указывает на возможность присутствия 7 профагов. При этом, несмотря на наличие генов семи интеграз, в геноме данного штамма не было обнаружено большого числа генов токсинов, которые обычно присутствуют в профагах (табл. 2). Согласно результатам PFGE, данный штамм обладал таким же паттерном рестрикции, как и штаммы №118, 137, 139, 152, 153, 155, 164, 170 (рис. 2, табл. 3), содержащие меньшее число генов интеграз (табл. 2). Вероятнее всего, в геноме штамма №143 в основном присутствуют фрагменты профагов (в частности, гены интеграз), а не полноразмерные фаговые геномы, в противном случае ожидаемый размер генома этого штамма был бы существенно большим, чем геномы остальных исследованных штаммов. В целом, среди 18 исследованных штаммов было выявлено 10 профилей фаговых генов (табл. 2). Профиль А1 доминировал и был характерен для 10 исследованных штаммов. По-видимому, приобретение штаммом-рецепиентом S. pyogenes фаговых генов, характерных для данного профиля, привело к появлению клона с рядом селективных преимуществ, что повысило его адаптивность к человеческому организму и привело к более широкому распространению среди людей. Значение метода RAPD для оценки гетерогенности штаммов S. pyogenes и выявления генетических маркеров. В ходе проведенного исследования был использован метод RAPD. Основанием для этого явились публикации, указывающие на невысокую воспроизводимость и невозможность сопоставления результатов RAPD [19, 21, 24]. Перед нами стояла задача выяснить, действительно ли результаты RAPD плохо воспроизводимы или причиной этого является нестандартизованность условий реакций, применяемых в разных лабораториях. В результате проведенного исследования оказалось, что число, размер и интенсивность амплификатов, получаемых для одного и того же штамма (паттерн RAPD), практически не зависят от концентрации ДНК в ПЦР смеси (10-кратное разведение ДНК не оказывало влияния на результат). В то же время было показано, что результат ПЦР в первую очередь зависит от модели амплификатора, а также реагентов, входящих в состав ПЦР смеси (данные не приведены). Таким образом, представляется вполне закономерным, что у разных исследователей, использующих различные условия (реагенты, оборудование) для исследования штаммов методом RAPD, возникают трудности при сопоставлении полученных результатов [19, 21, 24]. В ходе данного исследования все эксперименты были проведены по 3 раза в одних и тех же условиях, в результате чего была отмечена 100%-ая воспроизводимость результатов. Таким образом, нам удалось показать, что использование данного метода в стандартизованных условиях должно найти применение в целях молекулярной эпидемиологии. Кроме того, метод RAPD позволяет выявить маркеры, которые дают возможность оценить генетическую гетерогенность популяции S. pyogenes и охарактеризовать гены (например, ген транспозона), ранее не обнаруженные у S. pyogenes. Штаммы S. pyogenes гетерогенны по Smal рестрикционным паттернам. В результате исследования с использованием метода электрофореза в пульсирующем электрическом поле было выявлено 8 различных паттернов (Cl - С8) (рис. 2). Выявленные паттерны существенно отличались друг от друга как по числу рестрикционных фрагментов, так и по их молекулярным весам. Интересно, что паттерны С2 и С5 были практически идентичны. Единственным отличием было присутствие в паттерне С5 рестрикционного фрагмента размером около 200 т.п.н., отсутствующего в паттерне С2. Возможно, это обусловлено значительными геномными перестройками у штаммов S. pyogenes, по-видимому, Рис. 2. Smal паттерны хромосомной ДЫК S. pyogenes. Треки 1-8 соответствуют паттернам С1 -С8 соответственно. Трек 9 - маркер молекулярного веса. Размеры приведены в тысячах пар нуклеотидов (т.п.н.) связанными с приобретением или утратой больших участков ДНК в результате дупликаций, делеций или инсерции фаговой ДНК. Комплексный анализ штаммов. При сопоставлении данных о генетической гетерогенности, полученных с использованием трех разных подходов, оказалось, что для штаммов № 118, 137, 152, 153, 155, 164, 170 был характерен один и тот же профиль по набору фаговых генов (А1), а также одинаковые паттерны по данным RAPD (В1) и по данным PFGE (С1) (табл. 3). Та же закономерность была характерна для штаммов № 97, 171 (профиль А2, паттерны В1 и СЗ соответственно) и для штаммов № 94, 114 (профиль А1, паттерны В2 и С2) (табл. 3). Учитывая сходство генетических характеристик (один и тот же профиль профаговых генов, одинаковые паттерны RAPD и PFGE), можно предположить, что каждая из трех перечисленных групп включает генетически близкородственные штаммы. Однако ряд штаммов (№ 12, 120, 139, 143, 128) отличались по результатам одного или двух из методов исследования. Так, штаммы № 12 и № 128 обладали идентичным паттерном RAPD (В 1), но имели различные паттерны PFGE (С4 и С6) и профили фаговых генов (АЗ и А4). В то же время штаммы № 135 и № 144 обладали уникальными профилями фаговых генов и паттернами RAPD и PFGE, каждый из которых не встречался у других штаммов. Так, штамм № 135 характеризовался профилем фаговых генов А5, паттерном RAPD - ВЗ и паттерном PFGE - С7 (табл. 3). Таким образом, в ходе проведенного исследования обнаружена значительная генетическая гетерогенность штаммов S. pyogenes генотипа етт12, выделенных в Санкт-Петербурге в 2007 г. Убедительно показана достоверность RAPD-анализа при соблюдении стандартных условий постановки реакции. Посредством данного метода выявлен ген, характерный для транспозона, ранее не описанного у S. pyogenes. Показано, что использование комплекса подходов позволяет точнее оценить степень генетической гетерогенности клинических изолятов S. pyogenes. Дальнейшие исследования штаммов S. pyogenes различных Є/77/Л-ГЄНОТИПОВ посредством сочетания нескольких подходов помогут в будущем установить, существует ли взаимосвязь между генетическими особенностями штаммов, их ешлг-генотипом, характером вызываемых заболеваний и ареалом распространения. Такая постановка вопроса поможет выявлению связи между особенностями циркулирующих штаммов и условиями их среды обитания.

About the authors

E M Polyakova

Email: katerinapolyakova@rambler.ru

E S Mnatsakanyan

L A Burova

A V Dmitriev

References

  1. Полякова Е.М., Гао В., Янг Я. и др. Молекулярногенетическое сравнение штаммов Streptococcus pyogenes типов еттl и еттl 2 по набору профаговых генов // Журн. микробиол. 2009. Т. 2. С. 18-24.
  2. Banks D.J., Lei В. & Musser J.M. Prophage induction and expression of prophage-encoded virulence factors in group A streptococcus serotype М3 strain MGAS315 // Infect. Imirnin. 2003. Vol. 71. № 12. P. 7079-7086.
  3. Beres S.B., Sylva G.L., Barbian K.D. et al. Genome sequence of a serotype М3 strain of group A Streptococcus: phage-encoded toxins, the high-virulence phenotype, and clone emergence // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. Vol. 99. № 15. P. 10078-10083.
  4. Beres S.B., Musser J.M. Contribution of Exogenous Genetic Elements to the Group A Streptococcus Metagenome // PLoS ONE 2: e800.
  5. Carapetis J., Robins-Browne R., Martin D. et al. Increasing severity of invasive group A streptococcal disease in Australia: clinical and molecular epidemiological features and identification of a new virulent M- non-typeable clone // Clin. Infect. Dis. Vol. 21. № 5. P. 1220-1227.
  6. Cunningham M.W. Pathogenesis of Group A Streptococcal diseases // Clin. Microbiol. Rev. 2000. Vol. 13. №3. P.470-511.
  7. Dopazo J., Mendoza A., Herrera.1. et al. Annotated draft genomic sequence from a Streptococcus pneumoniae type 19F clinical isolate // Microbiol. Drug. Resist. 2001. Vol. 7. № 2. P. 99-125.
  8. Ekelund K., Skinhoj P., Madsen J. et al. Reemergence of emm and a changed superantigen profile for group a streptococci causing invasive infections: results from a nationwide study // J. Clin. Microbiol. 2005. Vol. 43. №4. P. 1789-1796.
  9. Elliot J.A., Farmer K.D., Facklam R.R. Sudden increase in isolation of group В streptococci, serotype V, is not due to emergence of a new pulsed-fteld gel electrophoresis type // J. Clin. Microbiol. 1998. Vol. 36. P.2115-2116.
  10. Facklam R.F., Martin D.R., Lovgren M. et al. Extension of the Lancefield classification for group A streptococci by addition of 22 new M protein gene sequence types from clinical isolates: emml03 to emml24 // Clin. Infect. Dis. 2002. Vol. 34. № 1. P. 28-38.
  11. Ferretti J.J., McShan W.M., Ajdic D. et al. Complete genome sequence of an M1 strain of Streptococcus pyogenes 11 Proceeding of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2001. Vol. 98. № 8. P. 4658-4663.
  12. Green N.M., Beres S.B., Graviss E.A. et al. Genetic diversity among type emm28 group A Streptococcus strains causing invasive infections and pharyngitis // J. Clin. Microbiol. 2005. Vol. 43. № 8. P. 4083-4091.
  13. Holden M.T., Scott A., Cherevach I. et al. Complete genome of acute rheumatic fever-associated serotype M5 Streptococcus pyogenes strain manfredo 11 J. Bacterid. 2007. Vol. 189. № 4. P. 1473-1477.
  14. Holm S.E., Norrby A., Bergholm A.M. et al. Aspects of pathogenesis of serious group A streptococcal infections in Sweden 1988-1989//.1. Infect. Dis. 1992. Vol. 166. № 1. P.31-37.
  15. Ho P.L., Johnson D.R., Yue A.W.Y. et al. Epidemiologic analysis of invasive and noninvasive group A streptococcal isolates in Hong Kong // J. Clin. Microbiol. 2003. Vol. 41. № 3. P. 937-942.
  16. Jing H., Ning В., Hao H. et al. Epidemiological analysis of group A streptococci recovered from patients in China // Med. Microbiol. 2006. Vol. 55. № 8. P. 1101-1107.
  17. Kaul R.A., McGeer A., Low D.E. et al. Population- based surveillance for group A Streptococcal necrotizing fasciitis, clinical features, prognostic indicators, and microbiologic analysis of seventy-seven cases // Am. J. Med. 1997. Vol. 103. № 1. P. 18-24.
  18. Kiska D.L., Thiede B., Caracciolo J. et al. Invasive group A streptococcal infections in North Carolina: epidemiology, clinical features, and genetic and serotype analysis of causative organisms // J. Infect. Dis. 1997. Vol. 176. №4. P.992-1000.
  19. Matthews R.C. PCR fingerprinting microbes by random amplification of polymoiphic DNA // J. Med. Microbiol. 1993. Vol. 39. № 3. P. 161-162.
  20. Musser J.M. and Krause R.M. The revival of group A streptococcal diseases, with a commentary on staphylococcal toxic shock syndrome // Emerging Infections. 1998. P. 185-218.
  21. Nandi S., Ganguly N., Kumar R. et al. Genotyping of group A streptococcus by various molecular methods // Indian J. Med. Res. 2008. Vol. 127. № 1. P. 71-77.
  22. O’Brien K.L. et al. Epidemiology of invasive Group A Streptococcus disease in the United States, 1995-1999 I I Clin. Infect. Dis. 2002. Vol. 35. № 11. P. 268-276.
  23. Rogers S., Commons R., Danchin M. et al. Strain prevalence, rather than innate virulence potential, is the major factor responsible for an increase in serious group A streptococcus infections // J. Infect. Dis. 2007. Vol. 195. № 11. P. 1625-1633.
  24. Seppala H., He Q., Osterblad M. et al. Typing of group A streptococci by random amplified polymorphic DNA analysis // J. Clin. Microbiol. 1994. Vol. 32. № 8. P. 1945-1948.
  25. Sharkawy A. et al. Severe group A streptococcal soft tissue infections in Ontario: 1992-1996 // Clin. Infect. Dis. 2002. Vol. 34. № 4. P. 454-460.
  26. Smoot J.C., Barbian K.D., Van Gompel J.J. et al. Genome sequence and comparative microarray analysis of serotype Ml8 group A Streptococcus strains associated with acute rheumatic fever outbreaks // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. Vol. 99. № 7. P. 4668-4673.
  27. Suvorov A., Polyakova E., McShan W. & Ferretti J. Bacteriophage content of M49 strains of Streptococcus pyogenes // FEMS microbiology letters. In press.
  28. Vlaminckx B.J., Schuren F.H., Montijn R.C. et al. Determination of the relationship between group A streptococcal genome content, M type, and toxic shock syndrome by a mixed genome microarray // Infect. Immunol. 2007. Vol. 75. № 5. P. 2603-2611.
  29. Wahl R.U., Ltitticken R., Stanzel S. et al. Epidemiology of invasive Streptococcus pyogenes infections in Germany, 1996-2002: results from a voluntary laboratory surveillance system // Clin. Microbiol. Infect. 2007. Vol. 13. № 12. P. 1173-1178.

Statistics

Views

Abstract - 44

PDF (Russian) - 1

Cited-By


PlumX

Refbacks

  • There are currently no refbacks.

Copyright (c) 2010 Polyakova E.M., Mnatsakanyan E.S., Burova L.A., Dmitriev A.V.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies