Отправить статью по E-mail 
Микрофлора инкубационных яиц и пути ее формирования
- Авторы: Горфункель Е.П.1, Ильина Л.А.1
-
Учреждения:
- Научно-производственная компания «БИОТРОФ»
- Выпуск: Том 5, № 2 (2023)
- Страницы: 65-69
- Раздел: Актуальные проблемы: дискуссионная трибуна
- URL: https://journals.eco-vector.com/PharmForm/article/view/352544
- DOI: https://doi.org/10.17816/phf352544
- ID: 352544
Цитировать
Полный текст
Аннотация
В данном исследовании были получены результаты, отражающие содержание генетического материала бактерий в инкубационных яйцах. Учитывая широкое применение куриных эмбрионов в медицине, ветеринарии и фармакологии, выявление и идентификация микроорганизмов является важной задачей. В ходе исследования был проведен количественный и качественный анализ состава бактерий в различных тканях инкубационных яиц. Были отобраны три среднесмешанные пробы каждой типичной категории: хорион-аллантоисная оболочка (ХАО) на 8-й день инкубации, желточные мешки на 13-й, 18-й и 20-й дни инкубации. Исследование проводилось с использованием метода ПЦР в реальном времени (real-time PCR). Сбор проб и подготовка образцов осуществляли в соответствии с установленными стандартами, что позволило обеспечить надежность и точность полученных данных.
Ключевые слова
Полный текст
СОКРАЩЕНИЯ
КЭ – куриные эмбрионы
ХАО – хорион-аллантоисная оболочка
ПЦР – полимеразная цепная реакция.
ВВЕДЕНИЕ
Куриные эмбрионы – уникальная биологическая модель, широко применяемая в медицине, фармакологии и ветеринарии. Куриные эмбрионы (КЭ) являются хорошо изученной системой часто применяемой для получения биопрепаратов, в т. ч. вакцин [1, 2]. В частности, использование этого объекта происходит для оценки механизмов действия, выявления свойств препаратов нового поколения, что связано с невероятно высокой чувствительность зародыша к внешним воздействиям любого генеза [3–6]. Так же КЭ это основа для экспериментального изучения физиологии и патологии сердечно-сосудистой системы. Именно на КЭ изучались роль клеток эндокарда в закладке коронарных сосудов во время трабекуляции миокарда и механизм образования аорты, а так же формирование проэпикарда и эпикарда [7].
Такое широкое использование куриных эмбрионов в различных областях медицины и ветеринарии обусловлено рядом преимуществ, таких как: высокая чувствительность к широкому спектру вирусов; надежные защитные оболочки объекта – скорлупа и подскорлупная оболочки; КЭ легкодоступны и экономичны. К отрицательным сторонам относится нестерильность этого объекта и возможность присутствия в содержимом яиц патогенных агентов (вирусы инфекционного бронхита кур, ньюкаслской болезни, гриппа, лейкоза), в том числе и микроорганизмов, что может явиться причиной искажения результатов исследования. Для определения наличия генетического материала бактерий в структурах инкубационных яиц и тканях зародыша в компании ООО «БИОТРОФ» были проведены молекулярно-генетические исследования куриных эмбрионов. В опыте были исследованы эмбрионы 8-, 13-, 18-, 20-суточного возраста.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В исследовании был проведен количественный и качественный состав бактерий в различных тканях инкубационных яиц. В опыте были отобраны по 3 среднесмешанные пробы: хорион-аллантоисной оболочки (ХАО) от эмбрионов на 8 сутки инкубации, желточных мешков на 13, 18 и 20 сутки инкубации. Исследование проводили методом ПЦР в реальном времени (real-time PCR). Отбор проб и подготовку образцов осуществляли в соответствии с установленными правилами [8].
РЕЗУЛЬТАТЫ
Вне зависимости от срока инкубации во всех образцах были выявлены бактерии, характерные для микробного сообщества желудочно-кишечного тракта в количестве от 5,00 × 104 до 1,13 × 105 геном/г. На 8, 13, 20 сутки в образцах выявлены микроорганизмы, относящиеся к сем. Veillonellaccea до 2,5 × 104 геном/г, выполняющих трансформацию органических кислот. На всех сроках инкубации в исследуемых образцах был выделен генетический материал бактерий относящихся к сем. Enterobacteriaceae от 4,0 × 104 до 1,55 × 105 геном/г, Bacteroides от 6,3 × 104 до 3,52 × 105 геном/г, Eubacteriaceae от 4,0 × 104 до 1,5 × 105 геном/г и дрожжи Candida spp от 2,5 × 104 до 7 × 104 геном/г. Семейство энтеробактерий включает большое число представителей нормофлоры организма и, в то же время, значительное количество патогенных бактерий. Бактероиды вовлечены в процессы сбраживания углеводов, утилизации белков и биотрансформации желчных кислот.
В образцах желточного мешка на всех сроках инкубации, помимо представителей нормофлоры, были выявлены условно-патогенные микроорганизмы Staphylococcus spp. от 1,0 × 104 до 1,09 × 105 геном/г.
ВЫВОДЫ
Полученные данные свидетельствуют о наличие генетического материала микроорганизмов в глубинных структурах инкубационных яиц. Предположительно, попадание микроорганизмов в желточные фолликулы возможно еще в организме несушки благодаря механизму бактериальной транслокации. Проникновение бактерий в толщу скорлупы и на поверхность подскорлупной оболочки возможно в первые часы после снесения, в результате остывания яйца и образования воздушной камеры. Выбирая инкубационные яйца как биологическую модель для экспериментов необходимо принимать во внимание возможное наличие не только представителей облигатной микрофлоры ЖКТ, но и условно-патогенной и патогенной микробиоты внутри инкубационных яиц. Так же при выборе поставщика инкубационных яиц следует учитывать зоосанитарный статус птицеводческого предприятия.
Об авторах
Елена Павловна Горфункель
Научно-производственная компания «БИОТРОФ»
Автор, ответственный за переписку.
Email: elena@biotrof.ru
SPIN-код: 2958-6204
специалист по качеству
Россия, Санкт-Петербург, ПушкинЛариса Александровна Ильина
Научно-производственная компания «БИОТРОФ»
Email: biotrof@biotrof.ru
доктор биологических наук, начальник молекулярно-генетической лаборатории научно-производственной компании
Россия, Санкт-Петербург, Пушкин
Список литературы
- Шмаров М. М., Логунов Д. Ю., Черенова Л. В., Пикер Е. Г. Технология получения рекомбинантных аденовирусов CELO в куриных эмбрионах в препаративных количествах // Биомедицина. – 200 – № 1 – С. 112–113.
- Строганова И. Я. Куриные эмбрионы и их использование в вирусологии: метод. указания к лабораторным занятиям / И. Я. Строганова; Красноярcкий Государственный Аграрный Университет. – Красноярск, 2013. – 19 с.
- Монстакова Т. В., Азарнова Т. О., Кочиш И. И. Перспективы и преимущества использования эмбрионов кур как модельных систем для фармацевтических исследований на примере глициана кобальта // Ветеринарный фармакологический вестник – 2021 – № 2 – С .84–91.
- Нургазиев Р. З. Отработка оптимальных условий культивирования штамма вируса болезни Ньюкасла в развивающихся куриных эмбрионах / Р. З. Нургазиев, А. Р. Нургазиева, Е. Д. Крутская [и др.] // Вестник НГАУ (Новосибирский государственный аграрный университет). – 2019. – № 1(50). – С. 148–152. – doi: 10.31677/2072-6724-2019-50-1-148-152.
- Князева В. А. Исследование влияния магнитного поля и лазерного излучения на развитие опорно-двигательного аппарата куриного эмбриона / В. А. Князева, А. Г. Шутенков; науч. рук. Ф. И. Сулейманов // Молодежь – науке и практике АПК: материалы 102-й Международной научно-практической конференции студентов и аспирантов, Витебск, 29–30 мая 2017 г. / Витебская государственная академия ветеринарной медицины. – Витебск: ВГАВМ, 2017. – Ч. 1: Ветеринарная медицина и биологические науки. – С. 179.
- Пяткина А. А, Предельные дозы пенициллина, стрептомицина и амфотерицина-в для SPF-эмбрионов кур, рекомендуемые для вирусологических работ / А. А. Пяткина, Н. В. Мороз, Т. Н. Зыбина [и др.] // Ветеринарная патология. – 2020. – № 4(74). – С. 5–12. – doi: 10.25690/VETPAT.2020.51.32.005.
- Каде А. Х. Куриный эмбрион как объект эксперимента для изучения развития сердечно-сосудистой системы / А. Х. Каде, А. И. Трофименко, А. Ю. Туровая [и др.] // Российский медико-биологический вестник имени академика И. П. Павлова. – 2018. – Т. 26, № 4. – С. 538–546. – doi: 10.23888/PAVLOVJ2018264538-546.
- Пяткина А. А. Предельные дозы пенициллина, стрептомицина и амфотерицина-в для SPF-эмбрионов кур, рекомендуемые для вирусологических работ / А. А. Пяткина, Н. В. Мороз, Т. Н. Зыбина [и др.] // Ветеринарная патология. – 2020. – № 4(74). – С. 5–12. – doi: 10.25690/VETPAT.2020.51.32.005.
Дополнительные файлы
