Email this article Molecular epidemiology of malaria vector mosquitoes in coastal areas of Southern Vietnam
- Authors: Luong M.T.1, Romanenko V.A.2, Solovyev A.I.2, Gudkov R.V.2, Kozlov K.V.2, Ovchinnikov D.V.2, Rakin A.I.2, Khalin A.V.3, Aybulatov S.V.3
-
Affiliations:
- Joint Russian-Vietnamese Tropical Research and Technological Center, Southern Branch
- Military Medical Academy
- Zoological Institute of the Russian Academy of Sciences
- Issue: Vol 44, No 4 (2025)
- Pages: 465-473
- Section: Original articles
- URL: https://journals.eco-vector.com/RMMArep/article/view/691276
- DOI: https://doi.org/10.17816/rmmar691276
- EDN: https://elibrary.ru/YEPPWN
- ID: 691276
Cite item
Open Access
Access granted
Subscription or Fee Access
Abstract
BACKGROUND: This study presents the results of morphological genus-level identification of mosquitoes and molecular-genetic species-level identification of female Anopheles mosquitoes — the primary malaria vectors — collected in the Can Gio Biosphere Reserve, Ho Chi Minh Province. In addition, five species of human malaria parasites of the genus Plasmodium (P. falciparum, P. vivax, P. ovale, P. malariae, and P. knowlesi) were screened in the collected material.
AIM: To assess the species composition of vectors responsible for the most relevant and socially significant vector-borne infections in southern Vietnam during the dry and rainy seasons, and to identify active malaria foci.
METHODS: Arthropod collection was carried out in October 2024 and May 2025 in the Can Gio Biosphere Reserve (Ho Chi Minh Province). Adult hematophagous dipterans were collected using aspirators from hosts, entomological nets from vegetation, as well as from external surfaces of residential and utility buildings. Immature stages were collected by filtering water samples from natural and artificial water bodies suitable for mosquito breeding. Species identification of arthropods was performed based on morphological characteristics using dichotomous keys. Mosquito species identification and Plasmodium detection were conducted using polymerase chain reaction (PCR). Confirmation of Plasmodium ovale was performed by Sanger sequencing.
RESULTS: A total of 414 Anopheles mosquitoes were identified, of which 356 specimens (86%) belonged to An. epiroticus. DNA of Plasmodium parasites was detected in 32 mosquito samples: 17 (53.1%) positive for P. falciparum and 15 (46.9%) for P. ovale.
CONCLUSION: Despite a general decline in malaria incidence in Vietnam, foci of “forest malaria” remain active. In coastal areas of southern Vietnam, An. epiroticus plays an important role in maintaining active malaria transmission. In addition to spreading the causative agent of tropical malaria (P. falciparum), these vectors may also contribute to the transmission of P. ovale, thus sustaining foci of tertian malaria and potentially leading to cases of mixed infections.
Keywords
Full Text
АКТУАЛЬНОСТЬ
Вьетнам — государство Юго-Восточного Азии, одного из гиперэндемичных регионов нозоареала малярии. В 2000–2010 гг. на территории страны существовали многочисленные активные очаги тропической, трехдневной и четырехдневной малярии, а в субрегионе Большого Меконга регистрировались случаи заболевания, вызванные Plasmodium knowlesi. На протяжении более десяти лет Вьетнам добивался и продолжает добиваться значительных успехов в борьбе с малярией, что привело к уменьшающимся с каждым годом числом случаев заболевания и смертей от малярии. Тем не менее заболевание по-прежнему представляет собой важную проблему общественного здравоохранения. Это связано с сохранением активных очагов малярии, регулярным трансграничным переносом инфекции, обусловленным сезонной трудовой миграцией населения, а также с лекарственной устойчивостью малярийных плазмодиев к основным противомалярийным препаратам и широким распространением высокоэффективных переносчиков — комаров Anopheles. Исследования также показывают, что изменение климатических факторов и воздействие человека изменили природные условия и среду, что повлияло на распределение, поведение, видовой состав, а также на роль различных видов Anopheles в передаче возбудителей. Основные векторные виды переносчиков малярии, такие как An. minimus, An. dirus, An. epiroticus, а также An. gigas, изменяют поведенческие характеристики, период их суточной активности смещается на более ранние часы и становится более продолжительным, что снижает эффективность мер по защите восприимчивого населения от их нападения.
Таким образом, возрастает значение эффективной оценки инфицированности кровососущих членистоногих малярийными плазмодиями. Это имеет значение как для определения риска заражения во времени и пространстве, так и для понимания экологии, географического распределения, численности и поведенческой активности векторных видов переносчиков.
Цель
Настоящее исследование преследовало цель с использованием морфологических и молекулярно-генетических методов оценить видовой состав переносчиков малярии в прибрежных районах Южного Вьетнама, а также определить инфицированность комаров малярийными плазмодиями.
МЕТОДЫ
Дизайн исследования
Дизайн исследования включал сбор и идентификацию переносчиков, а также исследование их инфицированности малярийными плазмодиями (рис. 1).
Рис. 1. Дизайн исследования.
Место сбора переносчиков
Объектом исследования служили взрослые комары Anopheles, собранные в пунктах исследования. Сбор переносчиков проводился в биосферном заповеднике Кан Зьо (Can Gio), провинция Хошимин (Ho Chi Minh) (10°27'17.588'' с. ш. 106°53'30.669'' в. д.), в октябре 2024 г. (начало сухого сезона), а также в мае 2025 г. (начало сезона дождей) (рис. 2).
Рис. 2. Заповедник Кан Зьо (Can Gio), провинция Хошимин (Ho Chi Minh) — место сбора кровососущих переносчиков.
Методы отлова
Переносчики отлавливались с помощью ловушек «Москито-MV-01» (SITITEK, аттрактант (приманка) — октенол), устанавливаемых в местах проживания людей и близ хозяйственных построек. С животных-прокормителей насекомые собирались энтомологическими сачками (диаметр обруча 30 см) и мануальными однокамерными эксгаустерами. Отлов членистоногих производился в сумерках, в период времени 18.00–20.00 и 5.00–7.00, а также в темное время суток — с 20.00 до 5.00. Насекомые замаривались парами этилацетата, фиксировались и сохранялись на ватных матрасиках.
Морфологическая идентификация
Морфологическая идентификация членистоногих выполнялась поэтапно. Сразу после сбора комаров в полевых условиях вследствие ограниченных технических возможностей проводилось их определение до рода, в стационарных условиях осуществлялась видовая идентификация с использованием стереомикроскопа (Leica MZ 6). В работе использовались стандартные дифференциальные признаки [1, 2].
Молекулярная идентификация
При проведении молекулярно-генетических исследований выделение ДНК производилось фенол-хлороформным методом [3]. На этапе видовой идентификации переносчиков образцы генетического материала были получены путем обработки одной из конечностей членистоногого [4]. Для других исследований использовался биологический материал, полученный путем полной дезинтеграции насекомого. Для молекулярно-генетической идентификации переносчиков использовались специфичные праймеры, которые подбирались и выравнивались в программе MEGA 6.06 на основе известных последовательностей гена 18s rRNA Anopheles, полученных из базы данных NCBI (табл. 1).
Таблица 1. Праймеры и зонды для идентификации членистоногих
Праймеры | Последовательность | Длина bp | Ампликон bp |
An. minimus | F: TTATTGTACCTTGTGTATCAG | 14 | 51 |
R: GCTCATCCCTTAAAATATTAC | 14 | ||
An. dirus | F: AAAATTTAATTTATTGTCCCTTGG | 18 | 55 |
R: GCTCATCCCTTAAAATATAATTTT | 18 | ||
An. epiroticus | F: GTTTATTTATTTTATTAAATTAATTGACC | 25 | 61 |
R: CTTCATTAAAACCTTTCAAATTAAC | 20 | ||
An. gigas | F: ATAGTAGAAAATGGAGCTGGG | 21 | 55 |
R: GTGTATCAACGTCTATCCCG | 20 | ||
Anopheles spp. | F: GAATGGTTGAATGAGATATATACT | 24 | 57 |
R: CTTTTTTATCGATATGAACTCTCT | 24 | ||
Culex spp. | F: AATAAAAAATTTTATTGGGGTGA | 23 | 51 |
R: TTTTTGTCGATATGAACTCTAA | 22 | ||
Aedes spp. | F: TGGTTGAATGAGATATATACTGTC | 24 | 59 |
R: CAAATATTCATATATTAATGTAAATAAATAA | 31 |
Для идентификации простейших (P. falciparum, P. vivax, P. ovale, P. malariae, P. knowlesi) с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ПЦР-РВ) использовались специфичные праймеры и зонды, подобранные в программе BLAST NCBI на основе известных последовательностей гена 18s rRNA Plasmodium (табл. 2).
Таблица 2. Праймеры и зонды для идентификации малярийных плазмодиев
Вид / род | Праймер/зонд | Последовательность |
Plasmodium spp. | PlsmU | F: GTTAAGGGAGTGAAGACGATCAGATA |
PlsmU | R: AAAGACTTTGATTTCTCATAAGG | |
P. falciparum | Fal | F: CCGACTAGGTGTTGGATGAATATAAAAA |
P. knowlesi | Kno | F: CCGACTAGGCTTTGGATGAAAGATTTTA |
P. vivax | Viv | F: CCGACTAGGTTTTGGATGAAAGTTAAAC |
P. ovale | Ova | F: CCAACTAGGTTTTGGATGAAAAGTTTTT |
P. malariae | Mal | F: CCGACTAGGTGTTGGATGATAGAGTAAA |
P. spp. | MP R | R: CAGAACCCAAAGACTTTGATTTCTC |
P. falciparum | MP fal | ROX – GCATTTCTTAGGGAATGTTGA – BHQ2 |
P. knowlesi | MP kno | HEX – GAGTTTTTCTTTTCTCTCCGGAG – BHQ2 |
P. vivax | MP viv | Cy5 – GGATAGTCTCTTCGGGGATAGTCC – BHQ2 |
P. ovale | MP ova | FAM – AGAAAATTCCTTTTGGAAATT – BHQ1 |
P. malariae | MP mal | JOE – GAGACATTCATATATATGAGTGTTTC – BHQ1 |
Таргетное секвенирование по Сэнгеру ПЦР-фрагментов P. ovale выполнялось на генетическом анализаторе 3500 × L Applied Biosystems специалистами НПО «Евроген». Филогенетические и молекулярные эволюционные анализы проводились с использованием программного обеспечения MEGA версии 6.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Анализ родового состава отловленных членистоногих показал, что в общей структуре сообщества кровососущих комаров прибрежной зоны Южного Вьетнама доля потенциальных переносчиков малярийных паразитов (комары рода Anopheles) может составлять до 46%. На долю комаров рода Culex и Aedes приходится около 35,5 и 3,4% соответственно. Среди собранных экземпляров членистоногих 14,8% идентифицированы как не имеющие медицинского значения (не передающие возбудителей инфекционных заболеваний), среди них наиболее часто регистрировались комары рода Armigeres (табл. 3).
Таблица 3. Результаты родовой идентификации переносчиков, имеющих медицинское значение
Сбор | Всего | Anopheles | Culex | Aedes | Другие | ||||
абс. | % | абс. | % | абс. | % | абс. | % | ||
Ноябрь | 355 | 257 | 39,2 | 365 | 55,7 | 3 | 0,5 | 30 | 4,6 |
Май | 251 | 157 | 62,5 | 62 | 24,7 | 9 | 3,6 | 23 | 9,2 |
Итого | 606 | 414 | 68,3 | 127 | 21,0 | 12 | 2,0 | 53 | 8,7 |
Полученные данные показали, что в общей структуре кровососущих комаров встречаемость переносчиков малярийных плазмодиев может иметь сезонные особенности. Так, при сборе в ноябре 2024 г. доля комаров рода Anopheles составила лишь 39%, при этом Culex и Aedes регистрировались в 55,7 и 0,5% случаях соответственно. В мае 2025 г. Anopheles доминировали (62,5%) по сравнению с другими группами переносчиков, Culex (24,7%) и Aedes (3,6%).
В ходе анализа видового состава переносчиков малярийных плазмодиев из 166 анализируемых образцов 20 (12,0%) сохранили специфические морфологические признаки и были идентифицированы как An. epiroticus (рис. 3).
Рис. 3. Отличительные морфологические особенности An. epiroticus (группа Pyretophorus): a — крыло, ASP на жилке R1; b — максиллярный щупик; c — сегменты VI, VII и половые органы; d — проэпистернальные щетинки; e — тарсомеры и светлые чешуйки на голени.
В девяти образцах (5%) выявлены морфологические признаки An. gigas. Дифференциальными признаками служили жилкование крыльев, строение и форма максиллярных щупиков, тарсомеров, половых органов, проэпистернальных щетинок, а также характерные чешуйки на голени (рис. 4).
Рис. 4. Отличительные морфологические особенности комаров An. gigas (группа Gigas): a — крыло, жилки С и R-R1; b — заднее бедро; c — PSP и HP жилки C; d — край крыла; e — жилка А1.
Комары, идентифицированные по морфологическим признакам как An. epiroticus и An. gigas, были дезинтегрированы и обследованы посредством ПЦР с использованием специально разработанных праймеров. Анализ полученных результатов показал полное совпадение данных морфологической и молекулярно-генетической идентификации членистоногих. Это послужило основанием для проведения молекулярно-генетической идентификации и других собранных образцов, утративших характерные специфические морфологические признаки вследствие повреждений, возникающих при отлове, транспортировке и хранении членистоногих. Сводные результаты видовой идентификации комаров представлены в табл. 4.
Таблица 4. Видовой состав Anopheles
Сбор | Всего | An. epiroticus | An. gigas | Не дифференцированы | |||
абс. | % | абс. | % | абс. | % | ||
Ноябрь | 257 | 213 | 82,9 | 31 | 12,1 | 13 | 5,1 |
Май | 157 | 143 | 91,1 | 10 | 6,4 | 4 | 2,5 |
Итого | 414 | 356 | 86,0 | 21 | 5,1 | 17 | 4,1 |
В результате проведенных исследований идентифицирован 91,1% образцов, большинство из них относилось к An. epiroticus (86%) и An. gigas (5,1%). Не удалось установить видовую принадлежность 17 образцов (4,1%). Основной проблемой при этом могла служить низкая концентрация выделенной ДНК в пробах. В этой связи для дальнейшего обследования на маркеры малярийных паразитов отобраны пробы, в которых концентрация общей ДНК была 50 нг/мкл и выше.
На наличие генетических маркеров малярийных плазмодиев обследован биологический материал 151 насекомого, в том числе An. epiroticus — 142, An. gigas — 9 особей. Все пробы An. gigas оказались отрицательными, что указывало на отсутствие в организме переносчиков малярийных паразитов. Положительный результат на родовые маркеры Plasmodium spp. получен в 32 пробах (21,2%) от An. epiroticus. Среди комаров, отловленных в начале сухого сезона (ноябрь 2024 г.), инфицированными оказались 8 особей (9,7%). В сезон дождей (май 2025 г.) генетические маркеры плазмодиев выявлены в 24 образцах (34,7%) (табл. 5).
Таблица 5. Результаты оценки инфицированности комаров Anopheles epiroticus
Сбор | Всего проб | Plasmodium spp. | |
абс. | % | ||
Ноябрь | 82 | 8 | 9,7 |
Май | 143 | 24 | 34,7 |
Итого | 151 | 32 | 21,2 |
Результаты исследования видового состава малярийных плазмодиев показали, что генетические маркеры возбудителей тропической малярии выявлялись в 17 случаях (53,1%). В 15 образцах (36,9%) ПЦР дала положительные результаты с праймерами к маркерам генома P. ovale (табл. 6).
Таблица 6. Видовой состав Plasmodium spp.
Сбор | Всего проб | Plasmodium spp. | P. falciparum | P. ovale | |||
абс. | % | абс. | % | абс. | % | ||
Ноябрь | 82 | 8 | 9,8 | 2 | 25,0 | 6 | 75,0 |
Май | 143 | 24 | 34,7 | 15 | 62,5 | 9 | 37,5 |
Итого | 151 | 32 | 21,2 | 17 | 53,1 | 15 | 46,9 |
В литературе встречаются лишь единичные сообщения о выявлении на территории Вьетнама случаев ovalе-малярии, поэтому для проверки полученных результатов были предприняты дополнительные исследования. Проведено таргетное секвенирование проб биологического материала от двух особей An. epiroticus. Для амплификации нуклеотидной последовательности, включающей маркеры видовой принадлежности к P. ovale, использовались родоспецифичные праймеры Plasmodium spp. Полученный сиквенс, длина которого составляла 313 bp, сравнивался с последовательностями геномов малярийных плазмодиев, депонированными в GenBank NCBI (табл. 7).
Таблица 7. Результаты сравнения полученного сиквенса с последовательностями, депонированными в GenBank (NCBI)
Plasmodium | Количество совпадений в NCBI | Средняя длина совпадающих фрагментов | Доля совпадений, % | Общий балл | Ожидаемое значение |
Falciparum | 76 | 50,33 | 83,82 | 50,24 | 0,013 |
Vivax | 1 | 0 | 87,5 | 41,00 | 0,006 |
Ovale | 713 (100) | 59,52 | 84,3 | 72,38 | 0,002 |
Malariae | 46 | 50,21 | 81,2 | 54,63 | 0,020 |
Knowlesi | 100 (7699) | 47 | 83,8 | 37,52 | 0,020 |
Наименьший показатель E-value (ожидаемое значение) указывает на то, что сходство между полученным сиквенсом и последовательностью P. ovale в базе данных скорее связано с реальными биологическими отношениями, а не со случайностью. С использованием программного обеспечения MEGA v. 6 проведен филогенетический и молекулярный эволюционный анализ нуклеотидной последовательности полученного сиквенса. Показаны значения бутстрепа более 50% для 1000 повторений. В анализ включены четыре последовательности типовых штаммов, депонированных в GenBank NCBI (рис. 5).
Рис. 5. Филогенетическое дерево, построенное на основе сравнения частичных последовательностей нуклеотидов гена 18s rRNA исследуемой последовательности, полученной из образца самки комара рода Anopheles, с частичными последовательностями 18s rRNA пяти видов плазмодиев — возбудителей малярии человека с помощью метода максимального правдоподобия.
Таким образом, в результате проведенных исследований показано значение комаров An. epiroticus как переносчиков малярийных плазмодиев в прибрежных зонах Южного Вьетнама. Выявлены отличия уровня инфицированности кровососущих членистоногих в различные периоды малярийного сезона. Обнаружены генетические маркеры P. ovale в образцах общей ДНК, полученных от комаров An. epiroticus, обитающих в районе Кан Зьо (провинция Хошимин) на территории биосферных мангровых лесов Южного Вьетнама.
ОБСУЖДЕНИЕ
В условиях Вьетнама основными переносчиками малярии считаются три вида комаров рода Anopheles, среди них An. dirus Peyton and Harrison, An. minimus Theobald и An. epiroticus Linton and Harbach (комплекс Sundaicus) [7, 8]. Эти кровососущие членистоногие обеспечивают поддержание очагов лесной малярии. В передаче инфекции также участвуют An. aconitus Dönitz, An. campestris Linnaeus, An. culicifacies Giles, An. indefinitus Ludlow, An. interruptus Puri, An. jeyporiensis James, An. maculatus Theobald, An. lesteri Baisas and Hu, An. nimpe Nguyen, Tran and Harbach, An. sinensis Wiedemann, An. subpictus Grassi и An. vagus Dönitz. Эти виды насекомых могут рассматриваться как способствующие передаче малярии за пределами лесных районов [9].
Установлено, что среди трех основных переносчиков малярии комплекс An. minimus, включающий три вида комаров An. minimus Theobald (ранее An. minimus A) и An. harrisoni Harbach and Manguin (ранее An. minimus C) [10], имеет повсеместное распространение в холмистых лесных районах. Комары An. dirus и An. minimus размножаются в небольших, медленно текущих ручьях с водной растительностью и чистой водой при полном солнечном свете [11]. An. dirus преимущественно распространен в лесистых районах Центрального и Южного Вьетнама и практически не встречается в северных областях страны. An. epiroticus (ранее An. sundaicus species A) — менее распространенный вид. Эти насекомые размножаются в хорошо прогреваемых водоемах со стоячей слегка солоноватой водой и встречаются только в прибрежных районах Южного Вьетнама [11].
Многочисленными исследованиями показана роль An. dirus и An. minimus — переносчиков в активном распространении P. knowlesi, P. falciparum и P. vivax [12]. При этом в литературе имеются лишь единичные сообщения, посвященные исследованию An. epiroticus с популяциями малярийных плазмодиев. При этом нам не удалось найти в литературе сообщений, конкретизирующих вид комаров, осуществляющих трансмиссию P. ovale.
Из четырех видов Plasmodium, известных как истинные паразиты человека, во Вьетнаме доминируют P. falciparum (64%) и P. vivax (35%) [5]. При этом P. ovale и P. malariae выявляются значительно реже [5]. В 2009 г. был обнаружен пятый вид паразитов, P. knowlesi, паразит макак. Это возбудитель впервые стал причиной заболевания малярией у девятилетнего ребенка в Кханьфу (Khanh Phu) в провинции Кханьхоа (Khanh Hoa) во Вьетнаме [6].
В настоящее время устоялось мнение, что вид P. ovale в своем ареале ограничен Западной Африкой, Филиппинами, Восточной Индонезией и Папуа — Новой Гвинеей. Вместе с тем случаи заболевания ovale-малярией зарегистрированы в Бангладеш, Камбодже, Индии, Таиланде и Вьетнаме. Согласно сообщениям, распространенность P. ovale низкая (< 5%), за исключением Западной Африки, где она превышает 10% от случаев малярийной инфекции. Эпидемиология этого паразита нуждается в дополнительном изучении, поскольку самая последняя глобальная карта его распространения была составлена в 1969 г. В период с января 1966 по март 1969 г. сообщалось о четырех случаях заболевания малярией, вызванной P. ovale, среди военнослужащих США, дислоцированных во Вьетнаме [13]. В сочетании с другими случаями, приведенными авторами, они представляют убедительные доказательства существования (иногда оспариваемого) этого плазмодия в континентальной части Юго-Восточной Азии.
Таким образом, результаты проведенных исследований согласуются с данными других исследователей, накопленными за последние десятилетия. Полученные материалы расширяют представление о структуре популяций кровососущих переносчиков, обеспечивающих функционирование паразитарных систем малярии в прибрежных районах Южного Вьетнама и Юго-Восточной Азии.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Несмотря на снижение уровня заболеваемости малярией, во Вьетнаме сохраняются отдельные очаги этой инфекции. В прибрежных районах Южного Вьетнама An. epiroticus играют значимую роль в сохранении активных очагов малярийной инфекции. Помимо распространения возбудителей тропической формы малярии (P. falciparum) эти переносчики могут обеспечивать передачу P. ovale и сохранение очагов трехдневной формы заболевания, а также возникновение случаев микст-инфекции. Полученные данные свидетельствуют о необходимости проведения дальнейших исследований и целесообразности совершенствования системы противомалярийных мероприятий.
Полученные последовательности участка гена 18s rRNA выявленных штаммов P. ovale депонированы в GenBank (NCBI) под общим номером BioProject PRJNA1284194.
ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ
Вклад авторов. Все авторы внесли существенный вклад в проведение исследования и подготовку статьи, прочли и одобрили финальную версию перед публикацией.
Финансирование. Поисково-аналитическая работа проведена с использованием материальных ресурсов, предоставленных в рамках научно-исследовательской работы «Изучение фазовых (сезонных) преобразований вирулентности и резистентности Plasmodium falciparum в организме переносчиков-комаров рода Anopheles», шифр «Эколан М-1.2».
Заявление об оригинальности. Оригинальная работа (использованы впервые собранные сведения).
Доступ к данным. Авторы предоставляют ограниченный доступ к данным (по запросу).
Генеративный искусственный интеллект. При создании настоящей статьи технологии генеративного искусственного интеллекта не использовали.
Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.
ADDITIONAL INFO
Author contributions: All authors made a substantial contribution to the conception of the study, acquisition, analysis, interpretation of data for the work, drafting and revising the article, final approval of the version to be published and agree to be accountable for all aspects of the study.
Funding sources: The research and analytical work was carried out using material resources provided within the framework of the scientific research project “Study of the Phase (Seasonal) Transformations of Virulence and Resistance of Plasmodium falciparum in the Organism of Anopheles Mosquito Vectors”, code — “Ekolan M-1.2”.
Statement of originality: This is an original work (based on newly collected data).
Data availability statement: The authors provide limited access to the data (upon request).
Generative AI: Generative AI technologies were not used for this article creation.
Consent for publication: Written consent was obtained from the patients for publication of relevant medical information within the manuscript.
About the authors
Mo Thi Luong
Joint Russian-Vietnamese Tropical Research and Technological Center, Southern Branch
Email: vmeda-nio@mil.ru
ORCID iD: 0000-0002-6035-5933
SPIN-code: 3460-3083
Cand. Sci. (Chemistry)
Viet Nam, Ho Chi Minh CityVladimir A. Romanenko
Military Medical Academy
Author for correspondence.
Email: vmeda-nio@mil.ru
ORCID iD: 0000-0001-5900-9008
SPIN-code: 9855-9483
Lecturer
Russian Federation, Saint PetersburgAleksei I. Solovyev
Military Medical Academy
Email: vmeda-nio@mil.ru
ORCID iD: 0000-0002-3731-1756
SPIN-code: 2502-8831
MD, Dr. Sci. (Medicine), Associate Professor
Russian Federation, Saint PetersburgRoman V. Gudkov
Military Medical Academy
Email: vmeda-nio@mil.ru
ORCID iD: 0000-0001-5498-0479
SPIN-code: 8311-6296
MD, Cand. Sci. (Medicine), Associate Professor
Russian Federation, Saint PetersburgKonstantin V. Kozlov
Military Medical Academy
Email: vmeda-nio@mil.ru
ORCID iD: 0000-0002-4398-7525
SPIN-code: 7927-9076
MD, Dr. Sci. (Medicine), Professor
Russian Federation, Saint PetersburgDmitrii V. Ovchinnikov
Military Medical Academy
Email: vmeda-nio@mil.ru
ORCID iD: 0000-0001-8408-5301
SPIN-code: 5437-3457
MD, Cand. Sci. (Medicine), Associate Professor
Russian Federation, Saint PetersburgAleksandr I. Rakin
Military Medical Academy
Email: vmeda-nio@mil.ru
ORCID iD: 0000-0001-9085-1287
SPIN-code: 2511-4127
Senior Lecturer
Russian Federation, Saint PetersburgAlexey V. Khalin
Zoological Institute of the Russian Academy of Sciences
Email: hallisimo@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-0662-8857
SPIN-code: 4751-1120
Cand. Sci. (Biology)
Russian Federation, Saint PetersburgSergey V. Aybulatov
Zoological Institute of the Russian Academy of Sciences
Email: Sergei.Aibulatov@zin.ru
ORCID iD: 0000-0002-0699-1701
SPIN-code: 6765-3577
Cand. Sci. (Biology)
Russian Federation, Saint PetersburgReferences
- Stone A. Preliminary keys to the mosquitoes of Vietnam. South East Asia Mosquito Project, Department of Entomology, Smithsonian Institution, US National Museum, 1966. 92 p.
- Panthusiri P, Harrison BA, Harbach RE, et al. Illustrated keys to the mosquitoes of Thailand IV. Anopheles. Southeast Asian J Trop Med Public Health. 2006;37 Suppl 2:1–128. PMID: 17262930
- Guha P, Das A, Dutta S, Chaudhuri TK. Rapid and efficient protocol for DNA extraction from fresh and frozen human blood samples. J Clin Lab Anal. 2018;32(1):e22181. doi: 10.1002/jcla.22181
- Gilbert MT, Moore W, Melchior L, Worobey M. DNA extraction from dry museum beetles without conferring external morphological damage. PLoS One. 2007;2(3):e272. doi: 10.1371/journal.pone.0000272
- Van Long B, Allen G, Brauny M, et al. Molecular surveillance and temporal monitoring of malaria parasites in focal Vietnamese provinces. Malar J. 2020;19(1):458. doi: 10.1186/s12936-020-03561-6
- Van den Eede P, Van HN, Van Overmeir C, et al. Human Plasmodium knowlesi infections in young children in central Vietnam. Malar J. 2009;8:249. doi: 10.1186/1475-2875-8-249
- Obsomer V, Defourny P, Coosemans M. Anopheles species associations in Southeast Asia: indicator species and environmental influences. Parasit Vectors. 2013;6:136. doi: 10.1186/1756-3305-6-136
- Huynh LN, Tran LB, Nguyen HS, et al. Mosquitoes and Mosquito-Borne Diseases in Vietnam. Insects. 2022;13(12):1076. doi: 10.3390/insects13121076
- Ngo CT, Dubois G, Sinou V, et al. Diversity of Anopheles mosquitoes in Binh Phuoc and Dak Nong Provinces of Vietnam and their relation to disease. Parasit Vectors. 2014;7:316. doi: 10.1186/1756-3305-7-316
- Garros C, Nguyen CV, Trung HD, et al. Distribution of Anopheles in Vietnam, with particular attention to malaria vectors of the Anopheles minimus complex. Malar J. 2008;7:11. doi: 10.1186/1475-2875-7-11
- Huynh LN, Tran LB, Nguyen HS, et al. Mosquitoes and mosquito-borne diseases in Vietnam. Insects. 2022;13(12):1076. doi: 10.3390/insects13121076
- Marchand RP, Culleton R, Maeno Y, et al. Co-infections of Plasmodium knowlesi, P. falciparum, and P. vivax among Humans and Anopheles dirus Mosquitoes, Southern Vietnam. Emerg Infect Dis. 2011;17(7):1232–1239. doi: 10.3201/eid1707.101551
- Gleason NN, Fisher GU, Blumhardt R, et al. Plasmodium ovale malaria acquired in Viet-Nam. Bull World Health Organ. 1970;42(3):399–403. PMID: 4392940
- Thanh PV, Van Hong N, Van Van N, et al. Epidemiology of forest malaria in Central Vietnam: the hidden parasite reservoir. Malar J. 2015;14:86. doi: 10.1186/s12936-015-0601-y
- Maude RJ, Ngo TD, Tran DT, et al. Risk factors for malaria in high incidence areas of Viet Nam: a case-control study. Malar J. 2021;20(1):373. doi: 10.1186/s12936-021-03908-7
- World Health Organization (WHO). Guidelines for malaria. Geneva: World Health Organization; 2022.
- Sanh NH, Van Dung N, Thanh NX, et al. Forest malaria in central Vietnam. Am J Trop Med Hyg. 2008;79(5):652–654. PMID: 18981498
- Hung le Q, Vries PJ, Giao PT, et al. Control of malaria: a successful experience from Viet Nam. Bull World Health Organ. 2002;80(8):660–666. PMID: 12219158
- Maeno Y. Molecular epidemiology of mosquitoes for the transmission of forest malaria in south-central Vietnam. Trop Med Health. 2017;45:27. doi: 10.1186/s41182-017-0065-6
- Gleason NN, Fisher GU, Blumhardt R, et al. Plasmodium ovale malaria acquired in Viet-Nam. Bull World Health Organ. 1970;42(3):399–403. PMID: 4392940
- Tamura K, Stecher G, Peterson D, et al. MEGA6: Molecular Evolutionary Genetics Analysis version 6.0. Mol Biol Evol. 2013;30(12):2725–2729. doi: 10.1093/molbev/mst197
Supplementary files
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).