ПРОТИВОГРИБКОВАЯ АКТИВНОСТЬ АКТИНОМИЦЕТОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ С ПОВЕРХНОСТИ КОРНЕЙ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ



Цитировать

Полный текст

Аннотация

Необходимость в использовании противогрибковых препаратов существенно возросла в связи с увеличением распространенности микозов, что обусловлено повышенным числом пациентов с иммуносупрессией. Внедрение новых противогрибковых препаратов, а, следовательно, предварительное изучение поставленной темы, расширяет возможности лечения грибковых инфекций. Актиномицеты являются продуцентами большинства противомикробных средств, среди имеющихся на рынке препаратов. Цель исследования: определение антагонистических взаимоотношений актиномицетов, выделенных с поверхности корней лекарственных растений с патогенными грибами мицелиального и немицелиального строения. Были поставлены задачи: 1) изучить антагонистическую активность актиномицетов по отношению к патогенным грибам; 2) выявить активные штаммы актиномицетов для дальнейшего изучения состава и механизмов действия их метаболитов; 3) определить наилучший метод для изучения антагонистической активности; 4 ) рассмотреть стабильность биологически активных веществ, синтезируемых актиномицетами, при наличии положительных антагонистических взаимоотношений. Изучение противогрибковой активности в отношении дрожжевых грибов проводили 2-мя методами: перпендикулярных штрихов» и «блочков», с целью выявить наилучший. В параллельном исследовании методом «блочков» мы изучали « длительность сохранения активности метаболитов актиномицетов, для чего проводили измерения диаметра зоны подавления роста вокруг блоков в течение 1 недели. Активность актиномицетов в отношении мицелиальных грибов определяли методом блоков. Все исследования проводили в двукратной повторности. Результаты: 1) из 16-ти изученных штаммов актиномицетов противогрибковая активность хотя бы к одной тест-культуре выявлена у 9 изолятов, что составляет около 56%; 2) наилучшим методом изучения являлся метод «блочков», позволивший выявить среди изучаемых штаммов 50% антагонистов, тогда как метод «штриха», что составляет только 19%; 3) наиболее активным изолятом актиномикромицетов являлся штамм Streptomyces sp. с индексом 3-ПП;

Полный текст

Среди множества разных видов заболеваний особое место занимают грибковые поражения. Следует отметить, что 75-80% всех производимых фарминдустрией антибиотических субстанций - естественные или химически модифицированные продукты метаболизма актиномицетов. В нашей стране широкое распространение имеют вторичные эндогенные микозы - кандидоз и аспергиллез, что, как правило, является следствием длительного и бесконтрольного применения антибиотиков, синтетических препара- тов, цитостатиков. Отметим, что в настоящее время изучение биохимии актиномицетов приобретает все большее значение [2]. Материалы и методы. Объект исследования - 16 штаммов актиномицетов, выделенных с поверхности корней лекарственных растений с разных местообитаний северо-востока европейской части России, а также 4 тест-культуры дрожжевых грибов рода Candida, и 2 тест-культуры мицелиальних грибов рода Aspergillus (табл. № 1, 2, 3). Выбор штаммов для изучения противогрибковой активности основывался на наличии у них антагони- стической активности по отношению к некоторым бактериям 4 группы патогенности. Эти штаммы были отмечены авторами исследования как перспективные для более подробного изучения [3]. Candida albicans один из организмов флоры кишечника, который также встречается в полости рта, пищеводе и влагалище. При нормальных обстоятельствах, C.albicans присутствует у 80 % людей, не вы- зывая заболеваний, хотя чрезвычайное увеличение его количества вызывает кандидоз [5]. Candida krusei не содержится в составе микрофлоры здорового человека. На фоне ослабленного иммунитета возбудитель инфекции поражает слизистые оболочки желудочно-кишечного тракта, носо- глотки, репродуктивных органов и мочеполовой системы [1]. Два штамма (с индексами- 6ПОУ и ЗПП) проявляли выраженную антагонистическую активность по отношению к Candida krusei. Но, к большому сожалению, о наличии достоверного метода мезотерапии говорить сложно, по причине отсутствия фармакологического анализа метаболитов, внимание которому мы уделим в последующих публика- циях. С.glabrata является вторым или третьим по частоте встречаемости возбудителем кандидоза. C. tropicalis является одним из самых распространенных колонизаторов, вызывающих заболевания кожных покровов, желудочно-кишечного тракта, а также в женских мочеполовых путях [8]. Aspergillus flavus - сапротрофный гриб третьей категории (умеренная индивидуальная опасность, низ- кая общественная опасность) [4]. Наиболее известен своей колонизацией злаков, бобовых и орехов. Он вызывает предуборочные и послеуборочные инфекции, производит значительное количество микоток- синов, которые при употреблении опасны. Инфекции часто не проявляют ярко выраженных симптомов (табл. № 4). Aspergillus niger - мицелиальный гриб четвертой группы патогенности (отсутствие или низкая индивиду- альная и общественная опасность) [4]. Он в наименьшей степени способен причинить вред человеку. Но при заражении Aspergillus niger при- водит к серьезному заболеванию легких - аспергиллезу. Результаты. Изучение противогрибковой активности актиномицетов в отношении дрожжевых патогенов методом штриха позволило выявить среди них 3 антагониста в отношении дрожжей, что составило 19% от всех изученных изолятов (табл. № 5). Изучение противогрибковой активности актиномицетов методом блочков позволило выявить 8 изолятов, в большей или меньшей степени проявлявших антагонизм в отношении дрожжей (табл. № 6, 7, 8, 9), что составляет 50% от всех исследованных культур актиномицетов. Очевидно, это связано с составом питательной среды, на которой культивировали актиномицеты. По всей видимости, традиционная для актиномицетов среда - овсяный агар - более, чем среда Сабуро, подходит не только для их роста, но и накопления вторичных метаболитов. Интересно отметить, что противогрибковая активность штамма Streptomyces sp. 3-ПП в отношении всех тест-культур проявлялась независимо от метода определения. Вероятно, синтез противогрибковых соединений этой культурой в меньшей степени зависит от состава среды культивирования либо данный штамм синтезирует очень широкий спектр различных метаболитов. Изучение изменения размера диаметра зоны подавления роста тест-культур при совместном культи- вировании их с штаммами-антагонистами в течение недели показало, что уже через 3-е суток у 75% штаммов-антагонистов противогрибковая активность не обнаруживалась (табл. 6). Антагонистическая активность у 2-х штаммов снижалась постепенно, причем менее значительно - у Streptomyces sp. с ин- дексом 3-ПП, что свидетельствует о достаточно высокой стабильности его метаболитов. Противогрибковая активность в отношении мицелиальных грибов рода Aspergillus выявлена только у 2-х культур актиномицетов, что составило 13% от всех изученных изолятов. При этом к обоим видам аспер- гиллов противогрибковую активность проявлял опять же изолят Streptomyces sp. (индекс 3-ПП) (табл. 10). Выводы: . Из 16-ти изученных штаммов актиномицетов противогрибковая активность хотя бы к одной тест- культуре выявлена у 9 изолятов, что составляет около 56%. . Наиболее приемлемым методом изучения антагонистической активности являлся метод «блочков», позволивший выявить среди изучаемых штаммов 50% антагонистов, тогда как метод «штриха» - только 9%. . Наиболее активным изолятом в отношении всех протестированных культур актиномицетов являлся 1213штамм Streptomyces sp. с индексом 3-ПП. Данный штамм представляет интерес для изучения состава его метаболитов и скрининга веществ с антимикробной активностью, в т. ч. противогрибковой.
×

Об авторах

А. А Хазиев

ФГБВОУ ВО «Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова» МО РФ

Санкт-Петербург, Россия

О. Б Рябова

ФГБОУ ВО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Пермь, Россия

Е. А Казакова

ФГБВОУ ВО «Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова» МО РФ

Санкт-Петербург, Россия

Список литературы

  1. Быков, А.С. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология / А.С. Быков, В.В. Зверев. - М.: Изд-во МИА, 2018. - 336 с.
  2. Гукова, Е.С. Проблемы медицинской микологии / Е.С. Гукова // Сборник работ Всероссийского конгресса по медицинской микробиологии, клинической микологии и иммунологии (СПб., НИИ Медицинской микологии им. П.Н. Кашкина, 2017 г.). - СПб., 2017. - С.18-23.
  3. Дягтерева, А.С. Численность и структура актиномицетных комплексов корней некоторых видов лекарственных травянистых растений. Биосистемы: организация, поведение, управление / А.С. Дягтерева, М.А. Демидова, О.В. Рябова // Тезисы докладов 72-й Всероссийской с международным участием школы-конференции молодых ученых. - Нижний Новгород, 2019. - 74 с.
  4. Санитарные Правила РФ №1.3.2322-08 от 15.08. - 2014 г. 5. Сбойчаков, В.Б. Медицинская микробиология: Учебник для курсантов и студентов факультетов подготовки врачей / В.Б. Сбойчаков. - СПб.: ВМедА, 2017. - 448 с.
  5. Лабинская, А.С. Частная медицинская микробиология с техникой микробиологических исследований: Учебное пособие / А.С. Лабинская, А.С. Ещина, Л.П. Блинкова. - СПб., Изд-во Лань, 2017. - 608 с.
  6. Jose, T. Candida albican; probale role in ecology of Early Childhood Caraies / T. Jose // Microbiology. - 2015. - 96 с. 8. Zuza-Alves D.L. An Update on Candida tropicalis Based on Basic and Clinical Approaches / D.L. Zuza-Alves, G.M. Chaves, W.P. Silva-Rocha // Microbiology. - 2017. - №8. - Р.4-9.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Хазиев А.А., Рябова О.Б., Казакова Е.А., 2020

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.

СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС 77 - 77760 от 10.02.2020.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах