Методика оценки сшивающего эффекта консервирующих растворов

Цель исследования - разработка методики оценки сшивающего эффекта консервирующих растворов на основе анализа изменения электрофоретических спектров белка и регистрации образования межмолекулярных сшивок. Материал и методы. Для оценки сшивающего эффекта использовали свежеприготовленный консервирующий раствор Мельникова-Разведенкова, содержащий глицерин и уксуснокислый калий, и аналогичный консервирующий раствор, в котором длительное время сохранялся биологический материал, содержащий костную, хрящевую и мышечную ткани человека. Осуществляли электрофорез бычьего сывороточного альбумина (обработанного консервирующими растворами) по методу Лэммли в пластинах полиакриламидного геля с концентрацией акриламида 5-20%. В качестве маркёрных белков для определения относительной молекулярной массы использовали лизат белков мышцы сердца крысы. Результаты. На основе анализа изменения электрофоретического спектра белка разработана методика, позволяющая выявлять в консервирующих растворах вещества, обладающие сшивающим эффектом в отношении белковых молекул. Изменение относительной молекулярной массы бычьего сывороточного альбумина позволяет регистрировать наличие в растворах формальдегида и глицеринового альдегида на уровне сотых долей процента. Инкубация бычьего сывороточного альбумина в консервирующем растворе, находившимся в контакте с биологическим материалом, приводит к появлению высокомолекулярных фракций, свидетельствующих об образовании меж- и внутримолекулярных сшивок.

консервирующий раствор, бычий сывороточный альбумин, формальдегид, глицериновый альдегид, электрофорез в полиакриламидном геле