Том 23, № 10 (2020)

Адаптация организма человека к изменчивым факторам внутренней и внешней среды невозможна без нормальной регуляции деятельности органов и систем. Нейропептиды - биологически активные соединения, синтез которых происходит преимущественно в клетках центральной нервной системы, играют определяющую роль в механизмах памяти, обучения, сна, регулируют процессы обмена веществ, поддержания гомеостаза. Эти соединения используются в качестве лекарственных препаратов -нейропротекторов при нейродегенерации. Проведен анализ отечественной и зарубежной литературы, содержащей информацию о современном состоянии и перспективах развития нейропептидомики, ориентированной на изучение спектра пептидов головного мозга в норме и при патологии. Нейропептиды являются регуляторами функциональной активности клеток центральной нервной системы в норме и при патологии, активно участвуя в патогенезе нарушений развития, ишемического и травматического повреждения головного мозга, хронической нейродегенерации. Авторами рассмотрены возможности применения модификаций различных аналитических методов (хроматографических, масс-спектрометрических и хромато-масс-спектрометрических) и их комбинаций в биомедицинских исследованиях и при поисках биомаркеров. Пептидомика позволяет получить информацию о белках малой массы и продуктах протеолитической деградации белков. Нейропептиды обладают избирательной проницаемостью через гематоэнцефалический барьер, поэтому комплекс пептидов может служить индикатором патологических процессов и использоваться в качестве маркеров ранних стадий заболевания или медиаторов патологических процессов. Из множества чувствительных и специфичных методов исследования нейропептидов масс-спектрометрия (МС) становится ведущей технологией в пептидомике. Эта платформа идеально подходит для анализа метаболизма лекарственных средств, терапевтического мониторинга лекарственных средств, протеомики, метаболомики, анализа объектов окружающей среды, пищевой продукции, токсикологии и клинических применений. Таким образом, одной из важнейших прикладных целей нейропептидомики является лабораторная диагностика новых биомаркеров, обладающих ультрачувствительностью, высокой специфичностью и прогностической значимостью для создания новых алгоритмов диагностики и для оценки риска развития заболевания в контексте превентивной персонализированной медицины.

Представлены результаты оценки диагностической значимости показателей функциональной активности альбумина, биомаркеров сепсиса и состояния системы гемостаза у онкологических больных с гнойно-септическими осложнениями. Показатель детоксикационной эффективности сывороточного альбумина, определяемый уже в первые сутки развития гнойно-септических осложнений и в динамике в течение 20 суток после операции, является лабораторным индикатором прогноза течения данных осложнений у онкологических больных. У онкологических больных наблюдается значительное повышение пресепсина (раннего маркера сепсиса) уже с первых суток развития гнойно-септических осложнений (до 1986 пг/мл) и через 1-2 сутки повышается прокальцитонин (до 112 нг/мл). Значительную активацию свертывания крови и развитие различных форм синдрома ДВС с потреблением естественных ингибиторов тромбина, компонентов фибринолиза и тромбоцитов необходимо учитывать в комплексной терапии септических состояний. Результаты оценки эффективности детоксикационной активности альбумина, уровня пресепсина и прокальцитонина, оценка интенсивности внутрисосудистого свертывания крови могут быть использованы для своевременного выявления гнойно-септических осложнений, которые значительно отягощают течение послеоперационного периода, удлиняют время пребывания больных в стационаре и увеличивают затраты на лечение.

Эффект Рамана, предсказанный в 1918 г. и экспериментально подтвержденный в 1928 г., заключается в способности молекул к неупругому рассеянию монохроматического света. Для сбора спектральной информации об исследуемом образце рамановские лучи, полученные после контакта с веществом, отделяют от рэлеевских при помощи светофильтра и фиксируют их частоты. Основанная на этом принципе рамановская спектроскопия представляет собой экспрессный неразрушающий и универсальный метод анализа для идентификации объектов в биологии, медицине, фармации, криминалистике, геммологии, пищевой промышленности и др. Активное внедрение в фармацевтическое производство системы процессно-аналитической технологии (РАТ) как инструмента обеспечения соответствия стандартам GMP требует разработки методик анализа, позволяющих быстро и полно контролировать качество выпускаемых препаратов на всех стадиях производственного процесса. Одним из перспективных методов анализа, способных успешно решать задачи современной фармацевтической промышленности, является рамановская спектроскопия. В отличие от традиционных методов фармацевтического анализа ключевыми достоинствами рамановской спектроскопии являются отсутствие пробоподготовки и малые количества объекта исследования, возможность получения информации из дальней инфракрасной области. К недостаткам рассматриваемого метода можно отнести высокую стоимость оборудования, которая, однако, компенсируется при длительном постоянном применении за счет отсутствия расхода дополнительных реактивов, например органических растворителей. Метод позволяет устанавливать качество фармацевтических субстанций как химического, так и биологического происхождения, оценивать их чистоту, определять количественное содержание целевого компонента. С помощью рамановской спектроскопии, совмещенной с современными математическими методами обработки данных, можно определять момент окончания идущих в закрытых реакторах процессов, а также оперативно сигнализировать об отклонениях в них. Приведены результаты обзора данных литературы, отражающих возможности рамановской спектроскопии (спектроскопии комбинационного рассеяния) для контроля качества лекарственных веществ и препаратов в рамках технологии анализа процессов (РАТ).

Актуальность. Основу клинического эффекта любого репаранта определяют биохимические механизмы, лежащие в основе его стимулирующего действия. Известно, что матриксные металлопротеиназы (ММП) и тканевые ингибиторы металлопротеиназ (ТИМП) играют центральную роль в обмене белков соединительной ткани, в процессах нормального развития и ремоделирования клеточного матрикса, эмбриогенезе, репарации тканей, неоангиогенезе. В связи с этим изучение прорегенераторных свойств нового производного N-ацетил-б-аминогексановой кислоты, проведенное параллельно с определением активности ММП и их тканевых ингибиторов, является актуальной задачей для патогенетического обоснования применения данного вещества для лечения термических ожогов кожи. Цель работы. Изучение в эксперименте на крысах эффективности использования нового производного N-ацетил-б-аминогексановой кислоты при заживлении ожоговых ран кожи, оценка динамики активности ММП и их тканевых ингибиторов в крови и регенерирующих тканях на этапах раневого процесса. Материал и методы. Новое производное N-ацетил-б-аминогексановой кислоты использовали местно в виде 2%-ной мази на основе полиэтиленгликоля. Оценку его репаративных свойств выполняли на белых крысах, у которых моделировали термический ожог кожи. Референтным препаратом служил полиэтиленгликоль. Мониторинг регенерации ожога по сокращению площади термического дефекта осуществляли планиметрическим методом. В образцах сыворотки крови и гомогенатах регенерирующих тканей животных методом иммуноферментного анализа определяли уровни ММП 9-го типа и ТИМП 1-го типа. Результаты. Планиметрический мониторинг показал быстрое сокращение площади дефектов у животных и полное его рубцевание на два дня раньше, чем при использовании полиэтиленгликоля. Динамика концентраций ММП 9-го типа и ТИМП 1-го типа выражалась в достоверном снижении их соотношения, то есть ослаблении протеолиза при продолжении процессов ремоделирования регенерирующих тканей. Выводы. Прорегенераторные свойства исследуемого вещества проявились в достоверном ускорении заживления экспериментальных термических ожогов кожи и нормализации протеолитической активности и свободно-радикальных процессов в организме.