Method for determining the functional state of peripheral nerves after their restoration in an experiment

Full Text

Введение. Совершенствование подходов хирур- гического лечения пациентов с обширными дефек- тами периферических нервов неразрывно связано с выполнением экспериментальных исследований лабораторных животных. Оценка изменений функци- онального состояния восстановленного нерва в по- слеоперационном периоде сопряжена с проведением комплексных клинических, электрофизиологических и лучевых исследований [1, 2]. Нами разработан простой клинический способ, позволяющий без ис- пользования дополнительной диагностической аппа- ратуры оценивать функциональное состояние общего малоберцового нерва лабораторных животных. Наиболее часто для отработки различных рекон- структивно-пластических вмешательств на перифери- ческих нервах исследователи прибегают к моделиро- ванию травмы нервного ствола на седалищном нерве и его ветвях у лабораторных животных. Выполнение односторонних вмешательств на общем малоберцо- вом нерве позволяет решить большинство задач при экспериментальном моделировании травмы и рекон- структивно-пластических вмешательств на перифери- ческих нервах [4]. Вместе с тем в послеоперационном периоде сохраняется возможность оценки функционального состояния восстановленного общего мало- берцового нерва на стороне операции в сравнении с контрлатеральной конечностью. Минимальный объем операционной травмы и высокая приспособляемость животных позволяют сохранить высокую двигатель- ную активность в послеоперационном периоде, что положительно сказывается на состоянии животных и заживлении послеоперационных ран. Неоспоримым подтверждением положительных исходов микрохирургической реконструкции нерв- ного ствола является восстановление проводимости периферического нерва и сократительной актив- ности мышц-мишеней. Золотым стандартом оценки функционального состояния периферических нервов является электронейромиография. Однако проведе- ние данного исследования лабораторным животным, особенно с применением игольчатых электродов, сопровождается высоким уровнем дискомфорта, что требует предварительной медикаментозной подго- товки седативными средствами, а нередко и введения животного в поверхностный наркоз. Цель исследования. Разработать простой способ клинического контроля функционального состояния ВЕСТНИК РОССИЙСКОЙ ВОЕННО-МЕДИЦИНСКОЙ АКАДЕМИИ 3 (63) - 2018 141 Экспериментальные исследования а б Рис. 1. Исследование функционального состояния общего малоберцового нерва: а - симметричное разведение пальцев стопы на обеих конечностях у интактного животного; б - отсутствие разведения пальцев стопы слева после пересечения общего малоберцового нерва восстановленных в эксперименте периферических нервов лабораторных животных. Материалы и методы. Исследование прово- дилось в 2 этапа. Топографо-анатомический этап исследования выполнен на 20 трупах лабораторных животных (кроликов), выведенных из опыта после отработки всех мероприятий по темам практических занятий с курсантами и слушателями. Для анатомиче- ского обоснования экспериментальной модели трав- мы периферического нерва выполняли прецизионную препаровку тазовых конечностей с использованием средств оптического увеличения. Экспериментальный этап исследования выпол- нен на 34 кроликах породы «Шиншилла» обоего пола - зрелых, фенотипически здоровых особях. Содер- жание животных и выполнение экспериментальных микрохирургических вмешательств соответствовало международным рекомендациям по проведению медико-биологических исследований с использо- ванием животных. У животных исследуемой группы (n=24) после моделирования травмы общего мало- берцового нерва выполняли пластическое замещение дефекта нервного ствола. В группе сравнения (n=10) замещение дефекта общего малоберцового нерва не производили. В послеоперационном периоде (от 1 до 290 суток) определяли морфофункциональное состояние восстановленных периферических нервов клиническими, лучевыми и электрофизиологическими методами. Результаты и их обсуждение. Нами разработан простой и наглядный способ определения функционального состояния общего малоберцового нерва [3]. Суть способа заключается в визуальной оценке и протоколировании (при необходимости) посредством видеосъемки или серийной фотосьемки амплитуды разведения пальцев стопы на стороне операции в мо- мент исследования у подопытного животного безус- ловного статокинетического рефлекса приземления. Перед началом исследования животное удержива- ют в вертикальном положении без опоры на тазовые конечности, дожидаясь прекращения двигательной реакции на изменение положения тела. Затем, имити- руя свободное падение, смещают животное по верти- кали вниз с замедлением в нижней точке без призем- ления. В момент перемещения фиксируют амплитуду разведения пальцев стопы на стороне оперативного вмешательства. Симметричное разведение пальцев стопы наблюдается у здоровых животных, а в случае Рис. 2. Внешний вид тыла стопы кролика после удаления поверхностных слоев. Стрелками отмечены сухожилия наружного разгибателя пальцев стопы 142 3 (63) - 2018 ВЕСТНИК РОССИЙСКОЙ ВОЕННО-МЕДИЦИНСКОЙ АКАДЕМИИ Экспериментальные исследования выполнения односторонних экспериментальных вмешательств на общем малоберцовом нерве свиде- тельствует о полном восстановлении проводимости нервного ствола (рис. 1а). Отсутствие разведения пальцев стопы свидетельствует о полном нарушении проведения нервного импульса по общему малобер- цовому нерву (рис. 1б). При неполном восстановлении иннервации отмечается разведение пальцев стопы на стороне операции с меньшей, чем на интактной конеч- ности, амплитудой. Повторение пробы более 2-3 раз обычно вызывает выраженное беспокойство живот- ного и сопровождается беспорядочным движением конечностей, что требует перерыва в исследовании. Разведение пальцев стопы у кроликов обусловлено сокращением наружного разгибателя пальцев стопы, расположенного в переднем костно-фасциальном футляре голени (рис 2.). Данная мышца берет свое начало от обеих костей голени и межкостной мем- браны, а ее сухожилие прикрепляется к наружным поверхностям фаланг двух латеральных пальцев стопы. Иннервация наружного разгибателя пальцев стопы обеспечивается глубокой ветвью общего мало- берцового нерва. Сокращение наружного разгибателя пальцев приводит к разгибанию 3 и 4 пальцев с одно- временным их отведением. Наиболее показательным является выполнение односторонних экспериментальных реконструктивно- пластических вмешательств на общем малоберцовом нерве. При длительном наблюдении лабораторных животных в послеоперационном периоде и много- кратном повторении разработанного нами способа удается зафиксировать постепенное увеличение амплитуды разведения пальцев стопы на стороне операции при сравнении с интактной конечностью. Попытки разведения пальцев стопы становятся заметными примерно на 2 недели позднее появления признаков реиннервации мышц соответствующего костно-фасциального футляра на электронейро- миограммах. Процесс полного восстановления периферических нервов после травмы чрезвычайно длительный, поэтому разница в 2-3 недели между клиническими и инструментально подтвержденными признаками восстановления двигательной иннерва- ции не столь существенна, особенно при наблюдении животных в послеоперационном периоде до 6 месяцев и более. Таким образом, при выполнении эксперименталь- ных оперативных вмешательств на периферических нервах лабораторных животных разработанный спо- соб позволяет в послеоперационном периоде с высо- кой достоверностью и без существенных трудностей оценивать изменения функционального состояния общего малоберцового нерва. Будучи основанным на безусловной рефлекторной реакции, предлага- емый способ не требует дополнительного обучения животного, а также не подвержен угнетению у здо- ровых животных. Преимуществами предлагаемого способа являются высокая скорость постановки и простота выполнения, а также демонстративность при сравнении оперированной и интактной конечностей у одного животного.

About the authors

A Yu Nisht

Email: vmeda-nio@mil.ru

References

Supplementary files