Открытый доступ
Доступ предоставлен
Доступ платный или только для подписчиков
Том 21, № 6 (2023)
Обзоры
Дисбаланс иммунорегуляторных молекулярно-клеточных механизмов как причина привычного невынашивания беременности
Аннотация
Введение. Привычное невынашивание беременности (ПНБ) - раннее спонтанное прерывание беременности на сроке до 20 нед, которое определяют как два и более выкидыша. Большинство известных причин, связанных с патофизиологией ПНБ, включают эндокринные расстройства, антифосфолипидный синдром, внутриутробную инфекцию, анатомические дефекты матки и др. Однако примерно в 50% случаев причина патогенеза ПНБ остается невыясненной и может быть связана с нарушением иммунных механизмов, таких как материнская толерантность к аллоантигенам плода и контролируемое воспаление, играющих определяющую роль в успешной беременности.
Цель обзора. Обобщить современные знания о молекулярно-клеточных иммунных механизмах, обеспечивающих индукцию и поддержание материнско-фетальной толерантности и подчеркнуть ассоциацию между нарушением иммунорегуляции и развитием ПНБ.
Методы. Материалами послужили результаты исследований по теме за последние 23 года. Анализировались публикации, входящие в базы данных Pubmed и eLibrary.ru.
Результаты. В представленном обзоре приводятся сведения об иммунной регуляции беременности, осуществляемой при взаимодействии молекулярных медиаторов и клеток-эффекторов врожденного и адаптивного иммунитета. Имеющиеся в настоящее время данные указывают на ключевую роль иммунной системы в патофизиологии ПНБ. Успешная беременность требует тонкорегулируемого и жесткоконтролируемого баланса между иммунной активацией и толерантностью к эмбриональным антигенам.
Заключение. Основные события происходят в маточно-плацентарной зоне, где клетки трофобласта и материнские лимфоциты вступают в тесный контакт. Поиск биомаркеров при осложнениях беременности находится в центре внимания ученых.
3-12
Индексы вариабельности гликемии как основа построения прогностической модели развития диабетических осложнений
Аннотация
Введение. Использование математических индексов вариабельности гликемии (ИВГ) открывает новые возможности в прогнозировании диабетических осложнений, что позволяет скорректировать терапию и профилактировать развитие острых и хронических состояний.
Цель исследования. Проанализировать прогностические возможности ИВГ для оценки развития и прогрессирования диабетических осложнений
Материал и методы. В исследование было включено 307 пациентов с сахарным диабетом типа 1 (СД1). У всех пациентов были оценены гликированный гемоглобин (HbA1c), а также основные показатели гликемического контроля и ИВГ, которые были выбраны для прогнозирования формирования и прогрессирования диабетических осложнений. Статистический анализ проводился с помощью программы SPSS 23.0. Для построения модели предсказания диабетических осложнений был использован метод логистической регрессии.
Результаты. В ходе работы отмечалось снижение HbA1c с 9,0 до 8,0% (р<0,005), а также изменение основных параметров углеводного обмена и ИВГ. Модель предсказания диабетических осложнений была построена на основании показателей HbA1c, среднего уровня гликемии и ИВГ - SD, CONGA, LI, LBGI, HBGI, MODD, MAGE, ADDR, MAG в первый визит исследования. Прогностическую модель развития диабетических осложнений считали значимой при p<0,05. Полученная модель показала высокую чувствительность
92% и достаточную специфичность 85%. Не все параметры оказались статистически значимы, однако при исключении некоторых, чувствительность и специфичность модели снижаются, что говорит о значимости каждого из ИВГ в прогнозировании диабетических осложнений.
Заключение. Анализируя ИВГ, а не только стандартные методы оценки углеводного обмена, врач может более точно судить о компенсации СД и дать пациенту индивидуальные рекомендации в лечении. Оценка ВГ, в частности ее математических индексов имеют значимую роль в прогнозировании развития и прогрессирования диабетических осложнений у пациентов с СД1 в детском и подростковом возрасте.
13-19
Влияние дипептидного ретро-аналога тетрапептида холецистокинина (ГБ-115) на поведение макак-резус в условиях изоляции
Аннотация
Введение. Разработанный отечественный дипептидный ретро-аналог тетрапептида холецистокинина (ХЦК) (амид N-(6-фенилгексаноил)-глицилтриптофана, соединение ГБ-115) с антагонистическими свойствами по отношению к ХЦК1-рецепторам, обладает анксиолитической активностью, показанной ранее в доклинических и клинических исследованиях.
Цель исследования. Оценка анксиолитического действия ГБ-115 в таблетированной лекарственной форме при субхроническом пероральном введении в сравнении с феназепамом у лабораторных приматов.
Методы. Эксперимент выполнен на четырех самцах макак-резус (Macaca mulatta) в возрасте 5,7–6,7 лет. После 30-дневного периода адаптации к условиям индивидуального содержания выполняли опыт с ГБ-115 (таблетки по 0,001 г) и далее с феназепамом (таблетки по 0,0005 г). Оба препарата давали по одной (7 сут), а затем по 2 таблетки (7 сут). Поведение оценивали методом наблюдения за объектом с регистрацией по принципу «Да-Нет» элементов этограммы в фоновых периодах, при введении препаратов и при их отмене. Методом иммуноферментного анализа в сыворотке крови определяли содержание биомаркеров стрессовой реакции: кортизола и дегидроэпиандростерон сульфата (ДГЭА-С).
Результаты. ГБ-115 (по 0,001 г) и феназепам (по 0,001 г) уменьшали пребывание животных в верхней части клетки по сравнению с фоновым периодом, что указывает на снижение стрессовой реакции. ГБ-115 (по 0,002 г) уменьшал соотношение кортизол/ДГЭА-С. Феназепам дозо-зависимо снижал уровень кортизола в сыворотке крови, не влияя на содержание ДГЭА-С; при введении феназепама (по 0,001 г) также регистрировали снижение соотношения кортизол/ДГЭА-С.
Заключение. Выявлено положительное влияние ГБ-115 при субхроническом введении на ослабление эмоционально-стрессовой реакции и восстановление адаптивного поведения у макак-резус, сопоставимое с действием феназепама, что подтверждает возможность использования блокады ХЦК1-рецепторов как одного из подходов для лечения тревожных расстройств.
20-26
Сравнение чувствительности рестрикционного анализа и ПЦР с анализом кривых плавления в высоком разрешении для выявления мутации R882H в гене DNMT3A
Аннотация
Введение. DNMT3A является одним из наиболее часто мутирующих генов при остром миелоидном лейкозе (ОМЛ), а замена R882H (G>A) является одной из наиболее частых мутаций в этом гене. Рестрикционный анализ и анализ кривых плавления с высоким разрешением (high resolution melting, HRM) являются наиболее распространенными методами, используемыми для выявления этой мутации, однако чувствительность этих подходов сильно варьирует от исследования к исследованию.
Цель исследования. Определение чувствительности широкораспространенных методов для оценки содержания мутации R882H в пробе в контролируемых условиях.
Методы. Мы сравнили чувствительность рестрикционного анализа и HRM на образцах заранее синтезированной ДНК с различным содержанием мутантной матрицы в образце и привели подробные протоколы для воспроизведения наших результатов другими исследователями.
Результаты. Установлено, что предел обнаружения мутации R882H в гене DNMT3A составляет 20% для рестрикционного анализа и 40% для HRM.
Заключение. Полученные в данной работе результаты важны для определения рестрикционного анализа и HRM как подходящих методов для использования в лабораторной диагностике мутации R882H для пациентов с ОМЛ при высокой мутационной нагрузке.
27-32
Коэффициент Пуассона кристаллов фторапатита
Аннотация
Введение. Известно, что в патогенезе кариеса и некариозных поражений зубов важная роль отводится резистентности эмали, которая определяется многочисленными факторами, среди которых структура и физико-механические свойства тканей зуба считаются одними из первостепенных. В данном сообщении обобщены литературные данные о коэффициенте Пуассона фторапатита (FAp) - биоматериала и одной из минеральной составляющей твердых тканей зуба. Поиск литературы осуществлялся в электронных базах данных Scopus, Web of Science, PubMed, Medline, ELibrary, MatWeb за период с января 1970 г. по март 2023 г. включительно. Часть данных дополнена собственными расчетами на основании формул для кристаллических гексагональных систем (сингоний). Как известно коэффициент Пуассона определяет объемную реакцию материалов и биотканей на механическую нагрузку, однако его анизотропные свойства детально не изучены.
Материал и методы. Расчеты коэффициента Пуассона фторапатита производили в системе компьютерной алгебры Mathcad 15.0, с помощью онлайн-анализа тензоров упругости ELATE, применяли интегрированную систему молекулярного моделирования - графический пакет VESTA (Visualisation for Electronic and STructural Analisis).
Результаты и обсуждение. Значения коэффициента Пуассона кристаллов фторапатита варьировали: минимальные значения - 0,057–0,283, максимальные - 0,302–0,494, средние значения, полученные интегрированием по всем направлениям,
0,24–0,308. Коэффициент упругой анизотропии кристаллической решетки фторапатита, вычисленный исходя из значений коэффициента Пуассона, составил 1,21–5,29. Полученные результаты сравнивались с таковыми у кристаллов гидроксиапатита (HAp), дентина, эмали и пломбировочных материалов. Наибольшие значения параметров μ и μmax установлены у дентина (0,312 и 0,54), наименьшие μmin - также у дентина (0,13).
Заключение. Кристаллы фторапатита упруго анизотропны, а коэффициент Пуассона μmax/μmin изменяется в широких пределах. Коэффициент Пуассона фторапатита обнаружил близость с коэффициентом поперечной деформации изоморфных кристаллов гидроксиапатита (0,207–0,374), дентина (0,13–0,54), эмали (0,16–0,47) и стоматологических композитных пломбировочных материалов (0,24–0,35). Последнее должно способствовать повышению качества реставраций пломбировочными материалами для замещения твердых тканей зубов. Установлено, что органическая составляющая дентина повышает его коэффициент Пуассона как биокомпозита и анизотропию упругих свойств.
33-40
Молекулярно-биологический анализ клинико-патогенетических особенностей формирования послеоперационных осложнений при боевой травме
Аннотация
Введение. Патологические рубцы (ПР) возникают после травматических повреждений, хирургических вмешательств, ожогов и др. приводят к функциональным нарушениям, косметическим дефектам, а также значительно влияют на качество жизни. Результаты исследований по определению генетической детерминированности и связи с клинико-морфологическими показателями ПР имеют противоречивый характер и требуют дальнейшего изучения.
Цель исследования: определить связь полиморфизма rs1800471 гена TGFB1 с развитием ПР и изучить влияние генотипов на особенности клинико-морфологического состояния рубцов.
Материал и методы. В исследование включены 196 человек (148 мужчин и 48 женщин) в возрасте от 18 до 56 лет после оперативного вмешательства. Сформированы 2 группы: 1-я группа (97 человек) со сроком заживления ран <14 сут и 2-я группа (99 человек) - более 14 сут. Состояние рубца оценивали врач и пациент через 3, 6, 9 и 12 мес после выписки с помощью шкалы POSAS. Полиморфизм rs1800471 гена TGF-β1 определяли методом полимеразной цепной реакции с электрофоретической детекцией тест-системой НПФ Литех (Россия). Для статистической обработки данных использовали программу Statistica 10 (StatSoft, Inc., США).
Результаты. Анализ распределения генотипов и аллелей rs1800471 гена TGFB1 показал наличие связи генотипов и аллелей с развитием ПР (χ2=6,31; p=0,045 и χ2=5,114; р=0,025, соответственно). Предковый генотип GG и аллель G rs1800471 гена TGFB1 увеличивали шансы развития ПР в 2,34 раза и в 1,97 раза, соответственно (ОШ=2,34; 95% ДИ 1,2–4,59 и ОШ=1,97; 95% ДИ 1,1–3,59) и являлись факторами риска фибропролиферативного рубцового поражения кожи.
Влияние полиморфизма rs1800471 гена TGFB1 установлено в отношении общего балла POSAS при оценке врачом (р<0,001), васкуляризации (р<0,001), высоты (р=0,004), плотности (р<0,001), площади (р=0,015) и оценки внешнего вида рубца (р=0,008) с увеличением медианных значений у носителей генотипа G/G. Также влияние полиморфизма rs1800471 установлено в отношении общего балла POSAS при оценке пациентом (р<0,001), болезненности (р=0,011), зуда (р<0,001), цвета (р=0,004), плотности (р=0,008), толщины (р=0,026), рельефа (р=0,003) и оценки внешнего вида рубца (р=0,024) и увеличением показателей при наличии генотипа G/G.
Заключение. Полиморфизм rs1800471 гена TGF-β1 имел связь с развитием ПР, значительное увеличение показателей шкалы POSAS наблюдалось у носителей генотипа GG с более выраженным фиброзированием рубцов.
41-47
Диагностическая значимость показателей антиоксидантной защиты для оценки течения постковидного синдрома
Аннотация
Введение. Возрастающее число сообщений о длительных негативных последствиях перенесенного COVID-19, характеризуемых хроническим воспалением, тканевой гипоксией, окислительным стрессом, обменными сдвигами на уровне всех систем организма обусловливает поиски критериев оценки длительного постковидного синдрома (ПКС). Показан высокий уровень информативности слюны в качестве образцов для лабораторной диагностики респираторных синдромов. Факт присутствия SARS-CoV-2 в слюне в высокой концентрации позволяет полагать, что исследования слюны обеспечат быстрое получение полезной информации о патогенезе ПКС, выявить наиболее уязвимые участки обменных процессов и направленно их корригировать в комплексе с другими реабилитационными мероприятиями.
Цель исследования: оценить состояние антиоксидантной защиты (АОЗ) и показателей устойчивости к гипоксии у пациентов в постковидном периоде через полгода после манифестации инфекционного процесса, вызванного SARS-CoV-2, по данным биохимического анализа слюны.
Материал и методы. В исследовании участвовали 58 пациентов: 28
группа контроля, отрицавшие факт заболевания; 30
группа сравнения, перенесшие новую коронавирусную инфекцию средней степени тяжести, подтвержденную при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР). В слюне определяли концентрацию пировиноградной кислоты, молочной кислоты, восстановленного глутатиона, активность глутатионредуктазы, глутатионпероксидазы, миелопероксидазы (МПО), церулоплазмина (ЦП).
Результаты. В слюне у пациентов в постковидном периоде отмечается выраженной рост активности МПО, что свидетельствует о воспалительном процессе хронического течения. Увеличение активности ЦП указывает на дефицит железа и меди, необходимых для окислительного фосфорилирования и клеточного дыхания. Изменение соотношения лактата и пирувата указывает на накопление НАДН2, т.е. на изменение Redox статуса организма, характерного для гипоксических состояний. Отмечено снижение активности ферментов системы глутатиона, что отражает угнетение процессов АОЗ и митохондрильного окисления.
Заключение. Комплекс показателей, характеризующих АОЗ, соотношение процессов аэробной и анаэробной направленности, транспорта железа и меди несет информацию об особенностях течения ПКС, что обосновывает пути коррекции, связанные с восстановлением уровня глутатиона, показателей обмена железа и меди и повышением устойчивости к гипоксическим процессам.
48-53
Экспериментальное замещение различных объемов мочевого пузыря аллогенными тканеинженерными конструкциями
Аннотация
Введение. Представлены результаты экспериментального замещения стенки мочевого пузыря вплоть до субтотального с применением многокомпонентных тканеинженерных конструкций.
Цель. Разработка и экспериментальное применение тканеинженерной конструкции для замещения различных объемов стенки мочевого пузыря.
Материал и методы. Исходная матрица из поли-L,L-лактида укреплена фиброином шелка. В конструкции введены мезенхимные клетки. 6 интактным животным выполнена цистометрия наполнения. Максимальная цистометрическая емкость составила 11,2±0,97 мл. У этих же 6 животных выполнено измерение анестетической емкости мочевого пузыря, которая составила 23,83±0,71 мл. 36 животным выполнена реконструкция мочевого пузыря приготовленной тканеинженерной конструкцией после резекции соответствующего объема органа. Группам по 9 животных замещен объем мочевого пузыря 5, 10, 15 и 20 мл. Период наблюдения составил 3 мес.
Результаты. По данным компьютерной томографии органов брюшной полости и малого таза (нативное исследование и с внутрипузырным введением рентгеноконтрастного вещества) через 4, 8, 12 нед после оперативного вмешательства определяется мочевой пузырь физиологической емкости во всех группах исследования, имплантированная конструкция визуализируется в виде гиперинтенсивного сигнала в области верхушки мочевого пузыря. затеков контрастного вещества не определяется. Цистометрия наполнения у 2 животных, перенесших замещение 20 мл объема мочевого пузыря (субтотальное замещение) через 12 нед, показала, что емкость сформированного резервуара коррелирует с дооперационными показателями. Макроскопически зона анастомоза состоятельна во всех группах животных, тканеинженерная конструкция определяется в месте имплантации, отмечается лизис конструкции к 12 нед наблюдения с сохранением небольших остаточных фрагментов в месте имплантации.
Заключение. Экспериментальное применение разработанной тканеинженерной многокомпонентной конструкции оказалось эффективным для замещения различных по объему дефектов стенки мочевого пузыря вплоть до субтотальной реконструкции. Дальнейшее изучение технологий применения тканеинженерных аллогенных конструкций может существенно улучшить результаты лечения урологических патологий, при которых получение аутологичного материала не представляется возможным.
54-59
Идентификация тучных клеток в мозге мышей с нейровоспалением, индуцированным липополисахаридом
Аннотация
Материал и методы. Объектом исследования были нелинейные мыши, которым проводили интраперитональные инъекции ЛПС в дозе 1 мг/кг либо стерильного 0,9% NaCl. Серийные фронтальные срезы мозга были приготовлены при помощи криостата. Для идентификации тучных клеток срезы были окрашены бриллиантовым зеленым и метиленовым синим.
Результаты. Полученные данные свидетельствуют о том, что интраперитональное введение ЛПС способствует увеличению числа резидентных тучных клеток в мозге мышей, особенно в периваскулярных областях между гиппокампом и таламусом. Увеличение числа клеток, по-видимому, является результатом их деления или направленной миграции в условиях развивающегося воспаления.
Заключение. Введение ЛПС приводит к увеличению числа тучных клеток в головном мозге мышей. Мастоциты, вероятно, являются важным источником иммунных медиаторов при нейровоспалении, индуцированном ЛПС, о чем свидетельствует их активный процесс дегрануляции.
60-64