ASSESSMENT OF THE EFFECT OF PYATD1, THE NEW DERIVATIVE OF DIAZINON, ON SOME PERIPHERAL BLOOD INDICATORS IN RATS OF BOTH SEXES

Full Text

В настоящее время при лечении многих заболеваний, особенно хронических, все чаще отмечается риск развития острых гемолитических состояний, возникающих в связи с длительным приемом лекарственных препаратов. Наиболее часто этот побочный эффект возникает при приеме противомикробных препаратов [5]. По литературным данным, дапсон (4,4'-сульфонилбис [безноламин]) - производное сульфона - является одним из препаратов выбора в схемах лечения лепры. Вместе с тем, он используется при терапии многих других заболеваний, таких как туберкулез, герпетиформный дерматит Дюринга, пнев-моцистная пневмония, а также для профилактики малярии, токсоплазмоза и др. Самые частые побочные эффекты данного препарата: дозозависымый гемолиз с понижением уровня гемоглобина и повышением числа ретикулоцитов, метгемоглобинемия, агранулоцитоз, гипопластическая анемия [3, 8]. В связи с этим представляется актуальным поиск новых соединений, обладающих фармакологической активностью в отношении микобактерии лепры, но проявляющих меньшую токсичность по сравнению с дапсоном. Новое соединение, принадлежащее к классу ациклических предшественников 1,3-диазинона-4 под шиф ром ПЯТd1, как показывает первичный скрининг in vitro, обладает антимикобактериальной активностью [1, 4], что позволяет считать его перспективным для дальнейшей разработки. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Оценка влияния 30-дневного применения соединения ПЯТd1 на некоторые показатели периферической крови крыс. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Исследование выполнено на 60 крысах линии «Wistar» обоего пола, весом 190-205 г (на момент начала эксперимента). Животные содержались на стандартном пищевом рационе со свободным доступом к корму и воде. После двухнедельного карантина крысы были распределены на 6 групп по 10 особей в каждой. Группы 1 (самцы) и 2 (самки) являлись контрольными и получали эквивалентный объем дистиллированной воды из расчета 2 мл на 200 г веса животного. Животным групп 3 (самцы) и 4 (самки) вводили дапсон, 5 (самцы) и 6 (самки)-соединение ПЯТd1. Вещества вводили через зонд в желудок 1 раз в день в утреннее время в течение 124 Выпуск 4 (56). 2015 30 дней в дозе 25 мг/кг (соответствует по эффективности 100 мг/кг в день для человека) [3]. Забор крови осуществляли из подъязычной вены. Кровь стабилизировали гепарином (50 ЕД/мл). Показатели крови определяли с использованием системы ветеринарного автоматического гематологического анализа BC 2800vet (Mindray). Все манипуляции проводили согласно требованиям по гуманному обращению с животными [6, 7]. Статистическую обработку результатов осуществляли с помощью программ «BIOSTAT 2009». Показатель достоверности различий определяли по /-критерию Стьюдента. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Результаты проведенного исследования показали, что введение соединения ПЯТС1 в течение 30 дней у крыс-самцов не вызывает изменения количества эритроцитов и уровня гемоглобина периферической крови, в то время как при применении препарата сравнения (дапсон) данные показатели статистически значимо снижаются (табл. 1). Среднее содержание гемоглобина в эритроците, коэффициент вариации остаются идентичными контролю, уровень гемотокрита сопоставим с количеством эритроцитов и аналогичным показателем у крыс, не подвергавшимся воздействию. У животных, получавших дапсон, наблюдается повышение среднего содержания гемоглобина, что вполне согласуется со значительным снижением в крови количества эритроцитов. Коэффициент вариации эритроцитов статистически достоверно увеличивается, что свидетельствует о негативной нагрузке на систему крови [9]. Как известно, морфофункциональные характеристики, обеспечивающие целостность эритроцитов, способны изменятся под влиянием ряда факторов, в том числе под воздействием лекарственных препаратов, что может привести к снижению их резистентности. Распаду эритроцитов предшествует их сферуляция и набухание, что характеризует такой показатель крови, как средний объем эритроцита [9]. Под действием соединения ПЯТС1 после 30-дневного курса у крыс-самцов наблюдается в сравнении с контролем незначительное (на 3 %), но статистически достоверное повышение среднего объема эритроцитов, по-видимому, компенсированное, что подтверждается тенденцией к повышению их количества. В сравнении, такой же курс препарата дапсон способствует увеличению среднего объема эритроцитов на 35 % (табл. 1) при снижении их количества на 25 %, что свидетельствует о необратимости гемолитического влияния дапсона [9]. У крыс-самок после курсового введения соединения ПЯТd1 не выявлено каких-либо значимых изменений показателей красной крови (табл.1). В условиях же применения дапсона у животных наблюдали тенденцию к снижению количества эритроцитов и гемоглобина, а средний объем и коэффициент вариации эритроцитов были статистически достоверно выше, чем в контрольной группе самок. Наряду с эритроцитами, важным клеточным элементом внутреннего гемостаза являются тромбоциты, которые представляют собой не только компоненты свертывающей системы крови, но и оказывают ангио-трофическое действие и участвуют, выделяя факторы роста, в регенерации поврежденных тканей. Известно, что некоторые лекарственные препараты способны влиять на количественные и качественные характеристики Таблица 1 Влияние курсового введения соединения ПЯТd1 и дапсона на показатели гемограммы крыс Показатели Г руппы контроль, n = 10 дапсон, n = 10 ПЯТСІ1, n = 10 самцы Эритроциты, 10|2/л 6,6 ± 0,2 4,95 ± 0,20**** 6,8 ± 0,2 Гемоглобин, г/л 140,6 ± 4,6 127,30 ± 2,95* 138,0 ± 2,7 Гематокрит, % 33,6 ± 1,2 33,9 ± 0,2 35,8 ± 1,1 Средний объем эритроцита, фл 50,7 ± 0,7 68,86 ± 1,50**** 53,12 ± 0,60**#### Среднее содержание гемоглобина в эритроците, пг 21,2 ± 0,3 26,1 ± 1,1**** 20,5 ± 0,4 Средняя концентрация гемоглобина в эритроците, г/л 419,8 ± 10,7 379,9 ± 12,5** 386,6 ± 5,7** Коэффициент вариации эритроцитов, % 10,9 ± 0,3 14,8 ± 0,4**** 11,1 ± 0,3 самки Эритроциты, 1012/л 6,0 ± 0,2 5,8 ± 0,2 6,5 ± 0,3 Гемоглобин, г/л 131,3 ± 2,7 124,6 ± 2,5 136,6 ± 2,9 Гематокрит, % 32,5 ± 1,1 32,7 ± 1,2 35,0 ± 1,3 Средний объем эритроцита, фл 53,9 ± 0,4 56,6 ± 0,7*** 52,7 ± 0,4 Среднее содержание гемоглобина в эритроците, пг 21,9 ± 0,4 21,6 ± 0,6 18,5 ± 2,1 Средняя концентрация гемоглобина в эритроците, г/л 405,9 ± 6,9 383 ± 7,4 * 387,6 ± 10,3 Коэффициент вариации эритроцитов, % 10,4 ± 0,2 12 2 ± 0 2**** 10,4 ± 0,06 *рк < 0,05; **рк < 0,02; **рк < 0,01; ****рк < 0,001 относительно контроля. < 0,001 относительно «дапсона». Выпуск 4 (56). 2015 125 ІШторСз [ЩсмкПГКЩ тромбоцитов [2]. Нами был проведен сравнительный анализ влияния курсового введения соединения ПЯ^ и дапсона на некоторые показатели тромбоцитов. Введение препарата дапсон в течение 30 дней приводило к изменению количественных и качественных характеристик тромбоцитов как у самцов, так и у самок (табл. 2). В частности, в сравнении с контролем у крыс обоего пола наблюдали статистически достоверное уменьшение их числа и снижение показателей тромбок-рита. При этом средний объем тромбоцитов и широта их распределения по объему (коэффициент вариации) возрастали, что свидетельствует о нарушении процесса мегакариоцитопоэза по действием дапсона [9]. Курсовое введение соединение ПЯТС1 значимых изменений показателей тромбоцитов не вызывало (табл. 2). Таблица 2 Показатели тромбоцитов крыс при курсовом введении соединения ПЯТй1 и дапсона Показатели Г руппы контроль, n = 10 дапсон, n = 10 пятс1, n = 10 самцы Тромбоциты, 109/л 450,2 ± 30,5 311,1 ± 22,2** 453,9 ± 38,5 Средний объем тромбоцитов, фл 4,8 ± 0,07 5,7 ± 0,3*** 5,0 ± 0,1 Коэффициент вариации тромбоцитов, % 16,2 ± 0,1 17,3 ± 0,5** 16,5 ± 0,2 Тромбокрит, % 0,21 ± 0,01 0,16 ± 0,01** 0,23 ± 0,02 самки Тромбоциты, 109/л 489,5 ± 39,9 258,5 ± 59,6 *** 524,6 ± 26,6 Средний объем тромбоцитов, фл 4,70 ± 0,07 5,9 ± 0,2**** 4,7 ± 0,1 Коэффициент вариации тромбоцитов, % 16,20 ± 0,08 17,5 ± 0,3**** 16,1 ± 0,1 Тромбокрит, % 0,23 ± 0,02 0,14 ± 0,03 ** 0,26 ± 0,01 *рк < 0,05; **рк < 0,02; ***рк < 0,01; ****рк < 0,001 относительно контроля. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Таким образом, проведенное исследование показало, что 30-дневное введение производного диазино-на под шифром ПЯТd1, в отличие от основного проти-волепрозного препарата дапсон, не оказывает токсического влияния на морфофункциональные характеристики эритроцитов и мегакариоцитопоэз, что обусловливает его перспективность для дальнейшей разработки.

About the authors

A. V. Voronkov

Pyatigorsky Medical and Pharmaceutical Institute, the branch of VolgSMU of the Ministry of Health of Russia

Email: prohor.77@mail.ru

S. A. Luzhnova

FGBU «Research Institute for the study of leprosy» of the Ministry of Public Health of Russia

S. A. Osychenko

Pyatigorsky Medical and Pharmaceutical Institute, the branch of VolgSMU of the Ministry of Health of Russia

N. M. Gabitova

FGBU «Research Institute for the study of leprosy» of the Ministry of Public Health of Russia

References

Supplementary files