CUMULATIVE PROPERTIES OF THE NEW ANTI-MIGENOUS COMPOUND IN THE TABLET MEDICAL FORM
- Authors: Kornilov V.I1, Yakovlev D.S1,2, Bagmetova V.V1, Bugaeva L.I1, Spasov A.A1,2, Getmamenko A.Y.1
-
Affiliations:
- FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation
- SBI «Volgograd Medical Scientific Centre»
- Issue: Vol 17, No 4 (2020)
- Pages: 46-49
- Section: Articles
- URL: https://journals.eco-vector.com/1994-9480/article/view/119496
- DOI: https://doi.org/10.19163/1994-9480-2020-4(76)-46-49
- ID: 119496
Cite item
Full Text
Abstract
Full Text
Наиболее распространенной формой головной боли является мигрень, которой страдают около 15 % населения [9]. Для купирования приступов мигрени в настоящее время применяются препараты, частота эффективности которых не превышает 60-65 %. Высокоэффективных профилактических средств этого заболевания на данный момент не существует [2, 6]. Установлено, что на начальной стадии развития приступа мигрени в сыворотке крови увеличивается концентрация медиатора 5-гидрокси-триптамина (серотонина, 5-НТ), высвобождение и его действие на кровеносные сосуды является одним из основных факторов в развитии патологии [8]. Учитывая существенную триггерную роль серотонинового компонента, разрабатывают новый класс лекарственных препаратов - антагонистов 2А подтипа серотониновых рецепторов. Исследование выполнялось при поддержке Министерства науки и высшего образования Российской Федерации в рамках государственного контракта №14.N08.11.0159. В результате исследований, проведенных ранее в ВолгГМУ, было получено соединение, производное 2-метоксифенила-имидазобензими-д азол а (РУ-31) с 5-НТ2А-антагонистическим механизмом действия, обладающее противомигреноз-ными свойствами [1, 5, 7]. На основе субстанции РУ-31 разработана твердая пероральная лекарственная форма -«РУ-31, таблетки по 8 мг» (готовая лекарственная форма, ГЛФ), способная устранять серотониновое влияние на сосуды головного мозга [8]. Возможные кумулятивные свойства разрабатываемого лекарственного средства необходимо учитывать для последующего выбора доз при изучении хронической токсичности в рамках расширенного доклинического исследования [6]. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Изучить кумулятивные свойства готовой табле-тированной лекарственной формы разрабатываемого противомигренозного средства РУ-31. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ В исследовании использовали опытный образец ГЛФ РУ-31: таблетки содержащие по 8 мг дигидрохлорида 9-(2-диэтиламиноэтил)-2-(4-мет-оксифенил)имидазо[1,2^]бензимидазола (РУ-31), произведенные в ПМФИ-филиале ФГБОУ ВО ВолгГМУ Минздрава России 01.2018 г. (протокол анализа № 1 от 23.01.18 г. о проверке качества образца и соответствии лабораторному регламенту № 011962942-005-2017). Эксперименты проведены на здоровых, беспородных 30 крысах - самцах массой 220-260 г и 30 крысах-самках массой 180-220 г. Животные с учетом пола содержались в стандартных условиях вивария университета, имели доступ к воде и еде ad libitum. Условия обращения и содержания используемых в эксперименте животных соответствовали общепринятым этическим нормам и стандартам. Для проведения исследований были сформированы равнозначные группы контрольных и опытных животных по 10 особей в каждой, в качестве критерия использовали массу тела, так, чтобы индивидуальное значение массы не отклонялось от среднего значения более чем на ±10 %. Работа по определению возможной способности ГЛФ РУ-31 к кумуляции проведена в соответствии с рекомендациями, изложенными в действующем руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств [4] с использованием метода Кагана Ю.С. и соавт. [3]. С учетом предполагаемого перорального применения исследуемая ГЛФ РУ-31 вводилась животным ежедневно в утреннее время, в виде водного раствора - внутрижелудочно, с использованием атравматического металлического зонда. Для приготовления раствора навеску тестируемой ГЛФ РУ-31 растворяли в дистиллированной воде непосредственно перед введением экспериментальным группам животных в дозах: 10 мг/кг (соответствует экспериментально доказанной терапевтической дозе), 100 мг/кг (соответствует десятикратной терапевтической дозе и приблизительно 1/10 от ЛД50). По окончании курса введения на 29-й день эксперимента тестируемая ГЛФ РУ-31 была введена экспериментальным и контрольным животным в разрешающей дозе, равной ЛД50: 932 мг/кг - для самцов; 627,5 мг/кг - для самок. Контрольной группе животных проводилось ежедневное внутри-желудочное введение дистиллированной воды в объеме 5 мл/кг в течение 4 недель (28 дней). В ходе эксперимента наблюдали за общим состоянием и поведением животных, приемом корма и воды, состоянием шерстяного покрова, массой тела. Результаты исследований оценивались на следующий день после введения разрешающей дозы ГЛФ РУ-31. При этом учитывалось количество погибших и выживших животных в период 4-недельного курса введения, а также после введения дозы ГЛФ РУ-31, равной величине ЛД50. Критерием эффективности в исследовании являлся коэффициент кумуляции (КК), который рассчитывался с учетом суммарных данных гибели животных, зафиксированной в период 4-недельного курса введения тестируемой ГЛФ, а также на второй день после введения ГЛФ РУ-31 в разрешающей дозе, с использованием формулы [3]: КК = (DS / ЛД50) х (50 / N х A), где КК - коэффициент кумуляции; DS - суммарная доза ГЛФ для павших и выживших животных; ЛД50 - уровень среднесмертельной дозы ГЛФ РУ-31; N - число животных в группе; А - процент погибших животных. Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета прикладных программ STATISTICA 6.0. Значимость различий определяемых показателей в экспериментальных группах от соответствующих показателей в контрольной выборке оценивали с помощью t-критерия Стью-дента - Фишера. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ По результатам проведенных исследований установлено, что общее состояние животных, получавших ГЛФ РУ-31 в дозах 10 и 100 мг/кг внутрижелудочно в течение 4 недель, существенно не различалось с состоянием животных контрольной группы. Шерстный покров у животных в экспериментальных и контрольных группах был чистый и гладкий, кожные покровы и видимые слизистые чистые, физиологической окраски. В поведении животных каких-либо изменений не зафиксировано. Измерения массы тела у животных (табл. 1) в о п ытных и контрольных группах показали положительную динамику прироста данного показателя. Прирост массы тела у животных в экспериментальных группах не имел статистически значимых различий с данным показателем контрольных животных. Результаты исследования кумулятивных свойств ГЛФ РУ-31 представлены в табл. 2. Как видно из приведенных данных, у животных по окончании 4-недельного курса гибель Таблица 1 Период измерения, дни Группа контроля Группы, п ол учавшие ГЛФ РУ-31, мг/кг 10 100 Крысы-самцы 1 (исходные значения) 248,30 ± 6,78 245,80 ± 7,35 248,80 ± 6,97 7 249,80 ± 6,59 251,80 ± 7,82 254,00 ± 6,98 14 258,00 ± 6,57 257,80 ± 7,46 259,80 ± 6,87 21 268,60 ± 7,11* 266,40 ± 6,29* 263,60 ± 7,03 28 278,60 ± 7,02** 273,80 ± 7,31* 272,80 ± 6,59* Общий прирост массы тела, % 14,3 11,4 9,65 Крысы-самки 1 (исходные значения) 224,40 ± 5,14 219,20 ± 3,44 222,20 ± 7,03 7 227,80 ± 4,98 221,2 ± 3,8 226,80 ± 7,42 14 235,40 ± 5,05 229,60 ± 4,17 232,80 ± 7,59 21 241,20 ± 5,19* 237,40 ± 4,06** 238,20 ± 7,17 28 249,80 ± 5,57** 242,00 ± 4,93** 243,40 ± 7,12* Общий прирост массы тела, % 11,3 10,4 9,54 *p < 0,05; **p < 0,01 - различия статистически значимы по сравнению с исходными значениями. По окончанию 4-недельного курса, на 29-й день эксперимента всем оставшимся в живых животным было проведено введение ГЛФ РУ-31 в дозе, равной ЛД50. крыс (1 самка) была единичной и фиксировалась лишь во 2-й экспериментальной группе. У крыс в 1-й экспериментальной группе и у контрольных - погибших особей не обнаружено. Динамика прироста массы тела у крыс, получавших ГЛФ РУ-31 внутрижелудочно в течение 28 дней (г, M ± m) На 30-й день эксперимента отмечено наличие 50%-й гибели у крыс в контрольной группе и у крыс в 1-й экспериментальной группе, а также 50%-я гибель у крыс самцов и 40%-я гибель у крыс самок во 2-й экспериментальной группе. Таблица 2 Выживаемость животных при кумулятивном введении ГЛФ РУ-31 Дн и н аблюдений Гибель животных в исследуемых группах, n погибших/всего в группе, мг/кг Контрольная группа Группа-1, ГЛФ РУ-31, 10 Группа-2, ГЛФ РУ-31, 100 Крысы-самцы 1-7 0/10 0/10 0/10 8-14 0/10 0/10 0/10 15-21 0/10 0/10 0/10 22-28 0/10 0/10 0/10 Суммарная гибель - 28 дней 0/10 0/10 0/10 Введение разрешающей дозы ГЛФ РУ-31 на 29-й день 932 мг/кг Г ибель в группах от введения разрешающей дозы 5/10 5/10 5/10 Суммарная гибель - 30 дней 5/10 5/10 5/10 Коэффициент кумуляции, у. е. 27,86 27,77 94,83 Крысы-самки 1-7 0/10 0/10 0/10 8-14 0/10 0/10 0/10 15-21 0/10 0/10 1/10 22-28 0/10 0/10 0/9 Суммарная гибель - 28 дней 0/10 0/10 0/9 Введение разрешающей дозы ГЛФ РУ-31 на 29-й день 627,5 мг/кг Г ибель в группах от введения разрешающей дозы 5/10 5/10 3/9 Суммарная гибель - 30 дней 5/10 5/10 4/10 Коэффициент кумуляции, у. е. 24,98 33,09 91,79 В результате анализа полученных данных выявлено, что значения КК, рассчитанные для самцов и самок крыс контрольных и экспериментальных групп, оказались более 20 у. е., что согласно использованному методу определения [3] и позволяет считать, что у исследуемой ГЛФ РУ-31 отсутствуют кумулятивные свойства. ЗАКЛЮЧЕНИЕ По результатам проведенных исследований можно сделать заключение, что суммарная гибель животных по окончанию 4-недельного внутрижелу-дочного введения ГЛФ РУ-31 по кумулятивной схеме в дозах 10 и 100 мг/кг не различается с данными контроля. Суммарная гибель животных в опытных и контрольной группах после введения разрешающей дозы ГЛФ РУ-31, равной ЛД50, существенно не различается. Таким образом, установлено, что для ГЛФ РУ-31 при внутрижелудочном введении крысам не характерно наличие кумулятивных свойств.About the authors
V. I Kornilov
FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation
D. S Yakovlev
FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation; SBI «Volgograd Medical Scientific Centre»
Email: dypharm@list.ru
V. V Bagmetova
FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation
L. I Bugaeva
FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation
A. A Spasov
FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation; SBI «Volgograd Medical Scientific Centre»
A. Yu Getmamenko
FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation
References
- Агацарская Я.В., Яковлев Д.С., Мальцев Д.С. и др. Нейрорецепторные эффекты антимигренозного агента 9-диэтиламиноэтил-2-(4-метоксифенил)имидазо[1,2-a] бензимидазола // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. - 2019. - Т.69, № 1. - С. 120-124.
- Дубенко О.Е., Сотников Д.Д. Профилактическое лечение мигрени: вчера, сегодня, завтра // Головная боль (тематический номер). - 2009.
- Каган Ю.С. Общая токсикология пестицидов. -Киев: Здоров'я, 1981. - 210 с.
- Миронов А.Н., Бунатян Н.Д., Бондарев В.П. и др. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Ч. 1. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 c.
- Спасов А.А., Анисимова В.А., Яковлев Д.С. и др. Средства, проявляющие свойства антагонистов серотониновых 5-НТ2Арецепторов: пат. 2465901 РФ; № 2011104264, заявл. 07.02.11. - Опубл. 10.11.12. -Бюл. № 31.
- Спасов А.А., Яковлев Д.С., Бригадирова А.А. и др. Современные направления разработки новых средств для лечения мигрени. Акцент на антагонисты 5-НТ2А-рецепторов // Биоорганическая химия. - 2019. -Т. 45, № 3. - С. 238-251.
- Степанова Э.Ф., Курегян А.Г., Спасов А.А. и др. Фармацевтическая композиция противомигренозного действия в твердой лекарственной форме в виде таблеток: пат. 26968866 РФ; № 219106339, заявл. 05.03.19. -Опубл. 07.08.19. - Бюл. № 22.
- Adams J.W., Ramirez J., Ortuno D., et al. Antithrombotic and vascular effects of AR246686, a novel 5-HT2A receptor antagonist // European Journal of Pharmacology. - 2008. - Vol. 586, Issue 1-3. - P. 234-243.
- Global, regional, and national incidence, prevalence, and years lived with disability for 310 diseases and injuries, 1990-2015: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2015 // Lancet. - 2016. - Vol. 388. -P. 1545-1602.