Том 23, № 8 (2020)

Актуальность. Одной из особенностей фармакокинетики наносомальных форм лекарственных веществ (ЛВ) является различное распределение свободного и связанного с носителем ЛВ (наночастицы, липосомы) между плазмой и форменными элементами крови. Цель работы. Оценка связывания in vitro с эритроцитами крови человека нагруженных доксорубицином наночастиц (НЧ) на основе сополимера молочной и гликолевой кислот (PLGA), модифицированных полоксамером 188 (Dox-PLGA), в концентрации 10-100 мкг/мл; изучение влияния физико-химических параметров НЧ на степень связывания с эритроцитами. Материал и методы. Dox-PLGA НЧ получены методом «двойных эмульсий». В качестве внешней водной фазы использовали 1%-ный раствор поливинилового спирта в фосфатном буфере при рН 7,4 (Dox-PLGA/7,4) и 6,4 (Dox-PLGA/6,4). Для получения отмытых НЧ Dox-PLGA/7,4(G-25) и Dox-PLGA/6,4(G-25) не связанный с НЧ доксорубицин отделяли с помощью гель-фильтрации. Кинетику высвобождения доксорубицина из НЧ in vitro определяли в 1%-ном растворе полоксамера 188. Для оценки связывания данных лекарственных форм с эритроцитами крови рассчитывали коэффициенты распределения KRBC/Plasma (эритроциты -плазма) и KBlood/Plasma (цельная кровь - плазма) после инкубации в цельной крови в течение 5, 15 и 30 мин. Содержание доксорубицина в плазме оценивали методом ВЭЖХ. Результаты. Наночастицы Dox-PLGA/6,4 (средний размер 142±2 нм) по сравнению с Dox-PLGA/7,4 (средний размер 114±1 нм) отличались более низкой степенью включения (79,7±1,1% vs 91,0±0,7% соответственно) и более высокой скоростью высвобождения доксорубицина in vitro. Рассчитанное на основании значений KBlood/Plasma общее количество доксорубицина, связанного с эритроцитами после 5 мин инкубации, составило ~33% для данных наносомальных форм и свободного доксорубицина (контроль) во всем диапазоне концентраций. Равновесная степень связывания (через 15 мин инкубации) составила 58-63% для свободного доксорубицина, 57-58% для Dox-PLGA/6,4 и 46-49% PLGA/7,4. Наночастицы Dox-PLGA/6,4(G-25) обладали самой низкой равновесной степенью связывания с эритроцитами крови (~ 34%). Выводы. В эксперименте in vitro включенный в наночастицы Dox-PLGA доксорубицин в концентрации 10-100 мкг/мл связывается с эритроцитами крови человека в меньшей степени, чем свободный доксорубицин, причем чем выше степень включения и нагрузка доксорубицина в НЧ, тем меньше значение коэффициентов распределения доксорубицина между эритроцитами и плазмой крови (KBlood/Plasma и KRBC/Plasma)

Цель исследования. Разработка и валидация методики ВЭЖХ-масс-спектрометрического определения нового производного вальпроевой кислоты и 1,3,4-тиадиазола в плазме крови кроликов. Материал и методы. Объектом исследования явился М-(5-этил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-пропилпентанамид (вальпразоламид) -новое противоэпилептическое средство из группы тиадиазоловых производных вальпроевой кислоты. Определение вальпразоламида в плазме крови кроликов осуществляли с помощью высокоэффективного жидкостного хроматографа Agilent 1260 Infinity II (Agilent Technologies, Германия). В качестве детектора использовали тройной квадрупольный масс-спектрометр ABSciex QTrap 3200 MD (ABSciex, Сингапур) с электрораспылительным источником ионов (TurboV с зондом Turbo Ion Spray). Для разработанной методики оценивали селективность, перенос пробы, линейность, правильность, прецизионность, матричный эффект, степень извлечения вальпразоламида. Результаты. Разработана методика ВЭЖХ-масс-спектрометрического определения вальпразоламида в плазме крови кроликов (аналитическая колонка Phenomenex Synergi C18 4 мкм 2,0x50 мм, градиентное элюирование: 0-1 мин 10%-ный водный раствор ацетонитрила; 1-3 мин линейное повышение концентрации ацетонитрила в смеси до 90%; 3-4 мин изократический участок с концентрацией ацетонитрила 90%; 4-5 мин кондиционирование колонки 10%-ным раствором; скорость потока подвижной фазы - 0,6 мл/мин; объем вводимой пробы - 20 мкл; общее время градиентного элюирования - 5 мин; масс-спектрометрическое детектирование). Условия масс-детектирования: положительная поляризация, напряжение электроспрея 5500,0 В, потенциал декластеризации 41,0; давление газа завесы 20,0 psi, газа распыления - 40,0 psi, потенциал ввода 3,5 В. MRM-переходы для вальпразоламида составили m/z256,1 → m/z130,1 и m/z81,0. В качестве внутреннего стандарта использовали ацетазоламид (m/z 223,1 → m/z73,0). Выводы. Аналитический диапазон методики определения вальпразоламида составляет 1-1000 нг/мл. Разработанная методика является селективной, точной, прецизионной и линейной, по всем параметрам соответствует требованиям по валидации био-аналитических методик.

Актуальность. Используемые в настоящее время лекарственные препараты для лечения и профилактики заболеваний щитовидной железы достаточно эффективны, но при длительном применении могут вызывать серьезные побочные эффекты. Препараты растительного происхождения способны влиять на функциональную активность и структуру щитовидной железы, не проявляя при этом каких-либо нежелательных реакций. Одним из перспективных объектов для научного исследования является зюзник европейский (Lycopus europaeus L., семейство Яснотковые - Lamiaceae), оказывающий тиреостатическое действие. Цель исследования. Оценить общетоксическое действие зюзника европейского экстракта сухого при длительном введении крысам для определения перспективы создания на его основе нового тиреотропного лекарственного средства. Материал и методы. Хронический эксперимент проведен на самцах и самках крыс Wistar. Зюзника европейского экстракт сухой в виде свежеприготовленных 1-, 5- и 10%-ных водных суспензий вводили внутрижелудочно в течение 90 дней в дозах 50, 250 и 750 мг/кг. Регистрировали интегральные показатели здоровья экспериментальных животных, брали пробы периферической крови для определения гематологических и биохимических показателей, изучали функциональное состояние сердечнососудистой системы (ЭКГ-исследование), выделительную функцию почек на фоне 3%-ной водной нагрузки; выполняли исследование центральной нервной системы по ориентировочным реакциям в тесте «открытое поле». В конце эксперимента проводили патогистологические исследования внутренних органов экспериментальных животных. Результаты. Зюзника европейского экстракт сухой при введении в желудок клинически здоровым крысам обоего пола в течение длительного времени в дозах 50, 250 750 мг/кг оказывал седативное действие, а также дозозависимый гипотиреоидный эффект. Длительное введение исследуемого экстракта в 40- и 125-кратных терапевтических дозах (250 и 750 мг/кг) вызывало умеренное токсическое действие на печень и канальцевый аппарат почек. Установлена пороговая доза - 50 мг/кг. Выводы. Результаты исследований позволили создать на основе изученного экстракта новое тиреотропное лекарственное средство системного действия (капсулы 0,200г) и рекомендовать его для проведения клинических исследований.