Том 26, № 9 (2023)

Актуальность. Натуральные киллеры (NK) считаются эффективными цитотоксическими клетками микроокружения опухоли, функция которых заключается в эффективной элиминации опухолевых клеток. Их активация может происходить при взаимодействии рецептора NKG2D с лигандом NKG2DL, экспрессированными, например, на опухолевых клетках, что приводит к гибели последних.

Цель исследования – сравнительное изучение содержания растворимых форм рецептора NKG2D и лиганда NKG2DL1 в сыворотке крови здоровых доноров и больных колоректальным раком (КРР) с учетом клинико-морфологических характеристик заболевания и прогнозом.

Материал и методы. Обследовали 65 больных КРР (32 женщины и 33 мужчины) в возрасте от 27 до 83 лет, проходивших лечение в ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, и 30 здоровых доноров (контроль; 20 женщин и 10 мужчин) в возрасте от 23 лет до 71 года. У всех пациентов выявлена аденокарцинома, клинический диагноз подтвержден данными морфологического исследования опухоли согласно Международной гистологической классификации опухолей пищеварительной системы. Концентрацию белков NKG2D и NKG2DL определяли методом ИФА в сыворотке крови до лечения реактивами фирмы R&D (США) согласно инструкции производителя. Измерения проводили на автоматическом иммуноферментном анализаторе BEP 2000 Advance (Siemens Healthcare Diagnostics, Германия). Статистический анализ полученных результатов выполняли с использованием GraphPad Prizm v. 9, анализ общей выживаемости – путем построения кривых дожития по методу Каплана–Майера.

Результаты. У больных КРР обнаружено достоверное повышение содержания в сыворотке крови sNKG2DL по сравнению с группой контроля. Концентрации sNKG2D не различались между контролем и больными КРР. Не выявлено значимых ассоциаций между содержанием белков sNKG2D и sNKG2DL1 в сыворотке крови больных КРР и основными клиническими и морфологическими характеристиками заболевания. При этом отмечалось снижение концентрации sNKG2D при прогрессии заболевания, а наибольшее содержание sNKG2D наблюдалось при локализации опухоли в слепой кишке. Для лиганда sNKG2DL1 обаружена противоположная закономерность, а именно наименьшая его концентрация в сыворотке крови при опухолях, расположенных в слепой кишке. При этом уровни sNKG2D и sNKG2DL1 в группе контроля прямо и статистически значимо коррелировали между собой (r=0,453; p=0,014), в то время как в группе больных КРР такой закономерности не выявлено (r=-0,014; p=0,935). Концентрации sNKG2DL1 не являются прогностическим фактором при КРР, в то время как высокое содержание sNKG2D имеет тенденцию к благоприятному прогнозу заболевания, что косвенно подтверждает положительную значимость инфильтрации опухоли NK-клетками.

Выводы. Рассмотренные механизмы ухода КРР от иммунного надзора и их связь с экспрессией рецептора sNKG2D и лиганда sNKG2DL, как одного из направлений в изучении контрольных точек иммунитета, позволили предположить возможность достижения эффекта иммунотерапии КРР путем повышения экспрессии NKG2D на иммунных клетках и индукции экспрессии NKG2DL в опухолевых клетках, что и является основой концепции данного направления исследований.

Актуальность. Актуальность исследования антимикробных пептидов обусловлена серьезной проблемой антибиотикорезистентности, создающей тревожную перспективу огромного количества смертей и экономических потерь в будущем. В последние годы ученые все больше обращают внимание на природные субстанции, такие как антимикробные пептиды, которые не вызывают развития резистентности у бактерий и могут быть более безопасными для человеческого организма по сравнению с антибиотиками.

Цель работы – структурирование научных литературных исследований по изучению потенциала применения и получения пептидных комплексов из человеческого организма.

Материал и методы. Для информационного поиска использованы базы: PubMed, American Society for Microbiology, Research Gate, Frontiers Research Foundation, Public Library of Science, BioRxiv, Nature Communications, European Commission.

Результаты. Представлены описание, структура, история открытия и исследования антимикробных пептидов из сред организма человека. Описаны биологические свойства данных пептидов. Рассмотрены перспективы дальнейшего исследования их свойств и получения из них антибактериальных лекарственных препаратов нового поколения.

Выводы. Исследование антимикробных пептидов человека и разработка инновационных препаратов на их основе является перспективным направлением в современной биотехнологии. Систематизация научных данных по возможности получения и использования пептидных комплексов из организма человека представляет значимый шаг в разработке новых и эффективных антимикробных препаратов, способных преодолеть растущую угрозу антибиотикорезистентности и помочь бороться с инфекционными заболеваниями.

Актуальность. Одним из наиболее распространенных и востребованных стандартных образцов, используемых в качестве надежных стандартов, является ретинола пальмитат – витамин А, который применяется достаточно широко и в пищевой промышленности, и в ветеринарии, но особенно популярен этот образец при анализе продуктов фармацевтических производств. Однако по-прежнему этот ценный объект нуждается в реализации ряда технологических решений, прежде всего связанных с технологией его получения из отечественного природного сырья с учетом чрезвычайно значимого сегодня фактора ресурсосбережения.

Оригинальность данных исследований основана на применении при производстве жирорастворимых витаминов ресурсосберегающих технологий, позволяющих снизить расход материалов (реактивов), трудо- и энергозатраты, за счет сокращения времени на основную технологическую стадию, а также на возможности использования в качестве сырьевой базы ресурсов отечественных предприятий по переработке культивируемых и дикорастущих видов рыб.

Цель работы – предложить оригинальную технологию получения субстанции витамина А (ретинола пальмитата), используя отечественную рыбную сырьевую базу, и идентифицировать полученный продукт.

Материал и методы. В качестве основного объекта исследования определён вид рыбы, активно выращиваемой на территории Российской Федерации. Основными факторами, определяющими выбор объекта, явились такие характеристики, как доступность сырьевой базы, высокое содержание жира в объекте и относительно невысокая стоимость сырья. В процессе получения использованы также инновационные способы получения и очистки конечного продукта: бескислородное проведение технологических операций с применением метода микроволнового воздействия. Идентификацию витамина А в образцах проводили с помощью УФ-спектроскопии, подлинность подтверждена методом ИК-спектрометрии.

Результаты. Использование инновационных методов выделения субстанции из рыбной продукции с применением эффекта микроволнового разложения биологического материала в среде инертного газа позволило сократить время основной стадии производства в среднем со 180 до 30 мин.

Производство субстанций из природного материала позволило получить более чистый и как следствие более физиологичный продукт, не требующий сложных ступеней очистки и не имеющий в своем составе токсичных микропримесей.

Применяя разработанный способ получения субстанции витамина А, возможно восполнить материальную базу, которая должна существовать как постоянно пополняемый ресурс. Субстанция витамина А, полученная по предложенной технологии, может быть использована не только как фармацевтическая субстанция, но также может найти своё применение в ветеринарной и пищевой промышленности как биологически-активная добавка и в качестве эталонного материала – стандартного образца для применения в аналитической практике (оценке соответствия) и научных исследованиях.

Выводы. Впервые разработана оригинальная технология получения ретинола пальмитата из природного отечественного сырьевого материала – рыб, принадлежащих к культивируемым в России породам. Разработана оптимальная технология с учетом ресурсосберегающего фактора, в процессе которой предложены такие инновационные технологические приемы, как использование бескислородного измельчения сырья, микроволновое излучение при гидролизе, осуществление всех технологических этапов в среде инертного газа.

Актуальность. В связи с широким распространением заболеваний сердечно-сосудистой системы, актуальным является разработка и изучение лекарственных средств, направленных на лечение заболеваний системы кровообращения. На кафедре фармацевтической и токсикологической химии Волгоградского государственного медицинского университета синтезировано новое биологически активное соединение (БАС) производное хиназолина: N-[2-[4-оксо-3(4H)-хиназолинил] пропионил]-гуанидин (VMA-13-15), которое на этапе доклинических исследований подтвердило перспективность применения в медицинской практике в качестве кардиопротекторного и нейропротекторного лекарственного средства.

Цель исследования – разработка и валидация методики количественного определения N-[2-[4-оксо-3(4H)-хиназолинил]про-пионил]-гуанидина (VMA-13-15).

Материал и методы.             Объект исследования – лабораторные образцы N-[2-[4-оксо-3(4H)-хиназолинил]пропионил]-гуанидина (VMA-13-15, серии 2019, 2020 и 2021). В качестве стандартного образца (СО) использовался дважды перекристаллизованный из метанола и высушенный до постоянной массы лабораторный образец VMA-13-15. Количественное определение проводили методом кислотно-основного титрования в неводной среде.  Конец титрования фиксировали потенциометрически.

Результаты. Определены константы ионизации VMA-13-15. Разработана методика количественного определения N-[2-[4-оксо-3(4Н)-хиназолинил] пропионил]-гуанидина методом кислотно-основного титрования в среде растворителя уксусной кислоты ледяной с установлением точки эквивалентности с помощью потенциометра. Разработанная методика валидирована по основным характеристикам: специфичность, линейность, правильность, сходимость и аналитическая область. Проведенный валидационный анализ разработанной методики подтверждает, что методика пригодна для количественного определения содержания основного вещества в субстанции VMA-13-15.

Выводы. Разработана и валидирована методика потенциометрического титрования N-[2-[4-оксо-3(4Н)-хиназолинил] пропионил]-гуанидина в неводной среде.

Актуальность. Наночастицы серебра интересны как альтернатива антибиотикам и как их носитель. Биодоступность серебра зависит от размера частиц, морфологии и концентрации. Исследованная комбинация методов перспективна для оперативного выявления технологических дефектов производства и борьбы с контрафактом.

Цель исследования – разработка комбинированного метода контроля качества серебросодержащих коллоидных растворов, который, помимо элементного определения, будет учитывать дисперсионные характеристики частиц.

Материал и методы. Исследованы четыре серебросодержащих препарата: Протаргол ЛОР (Россия), Argitos – серебро коллоидное (Россия), Argent Colloidal (Франция), Granions d’ARGENT (Франция), в которых содержание серебра в процентах составило 0,33 ± 0,07, 0,16 ± 0,07, <0,02, 0,66 ± 0,07, а размер частиц в нанометрах – 30, 70, 40 и 120 соответственно. Исследование выполняли с помощью энергодисперсионного спектрометра (Shimadzu EDX-7000, Япония), лазерного гидродинамического анализатора размера частиц Zetasizer (Malvern Instruments, Великобритания).

Результаты. Разработан комбинированный метод контроля качества серебросодержащих препаратов: экспресс-рентгенофлуоресцентный метод дополнен методом динамического рассеяния лазерного света. Комбинированный метод позволяет определить состав и размерные спектры частиц исследуемых образцов, что позволит существенно сократить затраты и защитить рабочих от токсического воздействия реагентов, используемых при минерализации.

Выводы. Сочетание методов дисперсионного и элементного анализа перспективно для контроля качества серебросодержащих лекарственных средств. Данная технология дает возможность обнаружить подделку и производственные дефекты.

Актуальность. Одним из трудоемких этапов, от которых зависит успех клонального микроразмножения, является перевод микроклонов из условий in vitro в условия ex vitro. На этом этапе растения испытывают стресс, который приводит к их гибели. Кроме того, низкая приживаемость растений к условиям ex vitro связана, прежде всего, со слаборазвитой у них корневой системой, не функциональным устьичным аппаратом, плохо сформированной кутикулой, а также использованием нестерильной почвы. От выбора питательного субстрата и технологии адаптации микроклонов к условиям ex vitro зависит эффективность клонального микроразмножения. Гидропонные и аэропонные технологии призваны повысить производительность и экономическую эффективность клонального микроразмножения растений, за счёт сокращения сроков культивирования клонированных растений.

Цель исследования – изучить влияние аэропоники на рост и накопление фенольных соединений в микроклонах лекарственных растений Mentha piperita L. и Melissa officinalis L.

Материал и методы. Объектом исследования служили микроклоны Mentha piperita L. и Melissa officinalis L., которые первоначально были размножены на безгормональной питательной среде, содержащей минеральные соли по прописи Мурасиге и Скуга (МС). Адаптацию микроклонов к условиям ex vitro проводили двумя способами: на аэропонной установке и непосредственно в почве. При адаптации использовали две группы растений: 1 – с корнями, 2 – без корней (корневую систему удаляли скальпелем перед высадкой на аэропонную установку или в почву). Учет результатов проводили в конце цикла адаптации, при этом учитывали длину корневой системы и высоту растений. На основе полученных результатов подсчитывали индекс роста (I) и удельную скорость роста (μ), а также проводили определение суммарного содержания фенольных соединений и флавоноидов.

Результаты. Установлено, что на последнем этапе клонального микроразмножения целесообразно применять аэропонные установки, позволяющие проводить укоренение и адаптацию микроклонов одновременно. Разработанный способ позволяет получать посадочный материал высокого качества, так как при этом снижается процент гибели растений, увеличивается рост и развитие зеленной биомассы, а также корневой системы. Укоренение микропобегов при адаптации достигается за счет включения в состав питательного раствора ИМК в концентрации 0,5 мг/л. Кроме того, в этих условиях наблюдается изменение фенольного метаболизма, которое проявляется в повышении суммарного содержания фенольных соединений в микроклонах.