VYYaVLENIE NEMOTORNYKh NARUShENIY NA KLASSIChESKOY MODELI BOLEZNI PARKINSONA

Abstract

Full Text

Введение. одним из наиболее распространенных нейродегенеративных заболеваний (НДЗ) являет- ся болезнь Паркинсона (БП), занимающая по социальной значимости второе место после болезни Альцгеймера. основными клиническими проявлениями данного заболевания являются двигательные расстройства, которые обусловлены гибелью дофаминергических нейронов черной субстанции среднего мозга и дегенерацией нигрост- риатного дофаминергического пути [2]. Вместе с тем, БП сопровождается также многочисленными немоторными симптомами, включая когнитивное снижение, а также аффективные и психотические расстройства [5]. Моделирование подобных неврологических расстройств на животных проводится с помощью различ- ных стандартизованных процедур, которые позволяют имитировать специфические патологические проявле- ния болезни и их поведенческие последствия. одной из самых известных, «классических» моделей БП является модель с использованием 6-гидроксидофамина (6-OHDA). 6-OHDA - гидроксилированный аналог естественного нейротрансмиттера дофамина - на протяжении многих лет успешно используется в эксперименте при моделиро- вании дегенерации центральных катехоламинергических проекций, включая нигростриатные системы in vivo и in vitro [9]. Для изучения функциональных нарушений при экспериментальном паркинсонизме обычно использует- ся батарея поведенческих тестов, которая включает тесты для постуральной и вращательной асимметрии, дисфун- кции двигательного аппарата и сенсорных и когнитивных расстройств [6]. Целью данной работы было выявление немоторных нарушений у крыс с 6-OHDA-индуцированной мо- делью БП. Материалы и методы. Моделирование БП проводилось на крысах линии Wistar в возрасте 3-4 месяца (n=18). Для получения паркинсонического синдрома крысам (n=9) вводили 6-оНDА (Sigma, США) в дозе 12 мкг в 3 мкл 0,05% раствора аскорбиновой кислоты в компактную часть черной субстанции (ЧС) мозга справа (АР=-4,8; L=1,9; V=8,0) [8]. Контрольным крысам (n=9) вводили физиологический раствор в том же объеме. Изучение полученных нарушений поведения проводили с помощью теста «сужающаяся дорожка» (СД) [3]. Полученные данные обрабатывали в программе Statistica 12, используя однофакторный дисперсионный анализ (ANOVA) с последующими апостериорными сравнениями по критерию тьюки и Фишера. Статистически значи- мыми считали различия при p<0,05. Результаты. Через 4 недели после введения 6-оНDА, на фоне развившегося паркинсонического синдро- ма [4], проводили тест СД. В этом тесте крысу помещают на широкий конец приподнятой над полом сужающей- ся двухуровневой планки и оценивают способность экспериментального животного преодолевать дистанцию до укрытия, расположенного на узком конце планки. Было показано, что крысы с моделью БП преодолевали путь до укрытия за значительно большее время, чем контрольные животные (рис. 1). Кроме этого, была проведена оценка психоэмоционального состояния животных с присвоением баллов по шкале невротизации [1]. Учитывались проявления «нестандартной» поведенческой активности животного, ко- торые могли быть отнесены к внешним признакам неврозоподобного состояния: повороты головы из стороны в сторону или вверх-вниз, жевательные движения, активное обнюхивание и лизание установки, повороты вокруг своей оси, пячение, аутогруминг и др. На рис. 2 видно, что число баллов по шкале невротизации у крыс с моделью БП значительно больше, чем у контрольных животных. Обсуждение. Развитие паркинсонизма, помимо расстройств в двигательной сфере, закономерно связано также с нарушениями эмоционального состояния [10]. Возникновение этих нарушений объясняется тем, что, наря- ду с дегенеративными изменениями нигростриатной системы мозга, при паркинсонизме различного генеза (в том числе и при БП) имеет место вовлечение мезолимбической дофаминергической системы. Немоторные нарушения сопровождают все стадии БП и в ряде случаев опережают манифестацию дви- гательных расстройств на 5-10 и более лет [7]. Среди часто встречаемых когнитивных нарушений, наблюдае- мых на ранних стадиях БП, отмечаются замедление психических процессов (брадифрения), ухудшение внимания, нарушение запоминания [5]. С прогрессированием заболевания усиливаются нарушения когнитивных функций (преимущественно «лобно-подкоркового» типа), происходит более грубое снижение внимания, памяти, ориента- ции и мышления. Существенно ухудшается способность к запоминанию и извлечению информации, усиливаются зрительно-пространственные нарушения. В связи с этим роли недвигательных проявлений в ранней диагностике и прогнозе развития БП в последние годы придаётся существенное значение. БП характеризуется не только поражением дофаминергической системы, но также вовлечением в па- тологический процесс ацетилхолинергической, норадренергической и глутаматных медиаторных систем. Хотя 6-OHDA является селективным токсином дофаминергических нейронов, он в той или иной степени повреждает другие катехоламинергические нейроны [9], в частности, норадренергические, что приводит в том числе и к фор- мированию различных когнитивных и аффективных расстройств. В большинстве исследований 6-OHDA-индуци- Рис. 1. Время прохождения дистанции по «СД» NaCl- контрольные крысы, 6-OHDA - крысы с моделью БП. * - статистически значимые различия между группами при р≤0,05. Рис. 2. Оценка изменения психо-эмоционального состояния крыс с моделью БП. Остальные обозначения, как на рис. 1 рованная модель БП использовалась для изучения двигательных нарушений. однако, использование нами теста СД выявило наличие «нестандартной» поведенческой активности крыс с моделью БП. Во время тестирования у них наблюдались стереотипные движения головой, интенсивное обнюхивание и лизание установки, стереотипные жевательные движения, длительные замирания и др. Животные либо вовсе отказывались от движения по дорожке, либо преодолевали расстояние до укрытия за значительно более длительное время, чем контрольные. таким образом, тест СД позволил оценить не только двигательные нарушения, но и объективизировать определенные психоэмоциональные изменения у животных, вызванные интранигральным введением 6-OHDA. Заключение. Использование теста СД в комплексном поведенческом тестировании крыс с 6-OHDA- индуцированной моделью БП расширяет возможности выявления различных психоневрологических нарушений, в том числе не моторного характера. Благодарность. Работа подготовлена при поддержке программы Президиума РАН № 44 «Фундамен- тальные механизмы возрастной нейропластичности и разработка новых подходов к диагностике и лечению воз- раст-зависимых заболеваний мозга».