FUNKTsIONAL'NOE SOSTOYaNIE NEYTROFILOV PRI BOLEZNI AL'TsGEYMERA I MYaGKOM KOGNITIVNOM SNIZhENII: PILOTNOE ISSLEDOVANIE

Abstract

Full Text

Болезнь Альцгеймера (БА) - наиболее распространенное нейродегенеративное заболевание пожило- го возраста, ассоциированное с избыточным отложением в головном мозге бета-амилоида - нейротоксического соединения, состоящего из 42 аминокислотных остатков и являющегося причиной гибели нейронов. Современ- ные исследования связывают избыточное отложение бета амилоида с нарушением микроглиального фагоцитоза. В крови пациентов с БА выявлено также снижение энзиматической активности лейкоцитарной эластазы (ЛЭ), яв- ляющейся маркером дегрануляционной активности нейтрофилов, выполняющей также функции периферических фагоцитов. В связи с актуальной проблемой поиска периферических маркеров БА, представляет значительный интерес анализ функционального состояния нейтрофилов пациентов с БА. Целью исследования является анализ функционального состояния нейтрофилов пациентов с БА. Материалы и методы. оценка функционального состояния нейтрофилов проводилась на основе опре- деления их фагоцитарной активности и энзиматической активности ЛЭ в лизате этих клеток. Анализировались нейтрофилы, выделенные из крови 7 доноров, 9 пациентов с БА и 6 пациентов с мягким когнитивным снижением (МКС) - додементная стадия БА. Нейтрофилы выделяли из крови методом центрифугирования в ступенчатом градиенте фиколла (1,077 - 1,119), их концентрацию определяли методом подсчета в камере Горяева. Нейтрофи- лы инкубировали с 2 нм латексными частицами (Панэко), сорбировали на покровное стекло, и фиксировали 3% параформальдегидом. Для количественной оценки фагоцитоза определяли фагоцитарный индекс (ФИ). Лизат нейтрофилов получали при их обработке детергентом тритоном Х-100. Активность ЛЭ в лизате определяли кине- тическим спектрометрическим методом. Результаты. Установлено достоверное снижение фагоцитарной активности нейтрофилов в группе па- циентов с МКС и увеличение энзиматической активности ЛЭ в лизате этих клеток по сравнению с контролем (ФИ=0,58±0,14 и ФИ=0,81±0,07 соответственно, p<0,05 0,46±0,11 и 0,31±0,09 нмоль/мин на 1000 клеток соответс- твенно, р=0,053). Для группы пациентов с БА отклонения в функциональной активности нейтрофилов по сравне- нию с контролем оказались менее выраженными и не достигали уровня статистической значимости (ФИ=0,73±0,16, активность ЛЭ - 0,63±0,77 нмоль/мин на 1000 клеток), что, вероятно, определяется значительным разбросом показателей. Выводы. Полученные результаты позволяют сделать предварительный вывод о снижении фагоцитарной активности нейтрофилов при БА. Более высокая активность ЛЭ в лизате клеток, полученных от пациентов, по сравнению с контролем, согласуется с данными о снижении их дегрануляционной активности. В целом, получен- ные результаты позволяют предположить изменение функционального состояния нейтрофилов при БА, что может рассматриваться в качестве потенциального периферического маркера БА.