Parameters of platelet apheresis

Full Text

Введение. Аппаратный аферез тромбоцитов - традиционная технология получения концентратов этих клеток [1, 3, 5, 7, 9, 10, 12]. Несмотря на множество технологий афереза тромбоцитов, зарегистрированных в России, регламентированными показателями донации являются количество клеток в гемоконтейнере, а также необходимость дополнительного обследования доноров:

при первичном, до сдачи тромбоцитов, клиниколабораторном исследовании крови дополнительно к определению уровня гемоглобина в крови и группы крови исследуются следующие ее показатели: а) количество тромбоцитов и ретикулоцитов; б) содержание общего белка в сыворотке крови - белковые фракции сыворотки крови;

при повторных сдачах плазмы дополнительно к вышеуказанным показателям крови определяются скорость оседания эритроцитов, количество лейкоцитов, а после каждых 5 тромбоцитаферезов - белковые фракции сыворотки крови.

Показано, что процессинг тромбоцитов влияет на эффективность их переливания [8].

В зарубежных исследованиях изучается эффективность модернизации классических сепараторов клеток [11, 13]. Нестандартизованными остаются параметры аппаратной донации, а также изменение состава крови донора после тромбо- цитафереза. Кроме того, отсутствуют инструменты оценки эффективности аппаратного афереза тромбоцитов [4].

Цель исследования. Изучить характеристики аппаратного афереза тромбоцитов.

Материалы и методы. С использованием сепаратора клеток «Haemonetics MCS+» (Соединенные Штаты Америки - США) выполнили аферез тромбоцитов у 46 доноров. Дополнительно к обязательным параметрам после донации выполняли общий анализ крови на гематологическом анализаторе «Swelab Alfa Basic» фирмы «Boule Medical AB» (Швеция).

Предложены 2 показателя возможной оценки эффективности аппаратного афереза тромбоцитов.

1. Эффективность сбора тромбоцитов (ЭСТ) рассчитывается по формуле:

 $ЭСТ=\frac{Собранное количество тромбоцитов х 100}{Средняя концентрация тромбоцитов х Обработанный объем крови}$,

где средняя концентрация тромбоцитов - половина суммы концентраций тромбоцитов в крови донора до и после афереза (10¹¹/л); обработанный объем крови - объем крови, прошедший через аппарат, за вычетом объема введенного антикоагулянта (л).

2. Скорость сбора тромбоцитов (ССТ) рассчитывается по формуле:

$ССТ=\frac{Собранное количество тромбоцитов}{Время выполнения процедуры}$,

Результаты обработаны с помощью дескриптивных статистик, корреляционного и дисперсионного анализа при уровне значимости 0,05.

Результаты и их обсуждение. Характеристики доноров, количество клеток до и после донации при ведены в таблице 1. Если концентрация гемоглобина в процессе афереза не изменяется, то концентрация тромбоцитов значимо снижается (t-критерий - 6,99; p<0,001).

 

Все полученные концентраты тромбоцитов содержат надлежащее количество клеток. Объем 4 концентратов тромбоцитов не достигает требуемой величины «не менее 40 миллилитров на 60х10⁹ тромбоцитов».

Согласно техническому регламенту, в контейнере с аферезными тромбоцитами должно быть не менее 2х10¹¹ клеток. Однако нередко предпочтительной дозой считают величину не менее 3x1011 клеток (в США такая доза стандартна). Применение таких доз сопряжено с увеличением межтрансфузионного интервала и сокращением переливания тромбоцитов [2].

Все наши концентраты содержали не менее 3x1011 клеток (табл. 2).

 

Таблица 1

Характеристики доноров, количество клеток до и после донации, M±SD; медиана (диапазон)

Показатель	Результат
Пол, м/ж	41/5
Возраст, лет	35,1±2,8
Рост, см	175,5 (152-190)
Масса, кг	77±3,4
Площадь поверхности тела, м2	1,50±0,05
Концентрация гемоглобина, г/л
До афереза	150,8±3,6
После афереза	148,5±3,7
Концентрация тромбоцитов (109/л)
До афереза	226 (200-320)
После афереза	191,5 (135-280)

 

Таблица 2

Процедура афереза и характеристики продукта

Показатель	Медиана	Диапазон
Снижение концентрации гемоглобина, г/л	2	-1-6
Снижение концентрации тромбоцитов, 109/л	50,5	3-91
Количество клеток в контейнере, 1011/л	3,2	3-4,4
Объем контейнера, мл	260	200-350
Продолжительность афереза, мин	84	60-118
Переработано крови, л	2,76	2,13-3,25
Введено ACD-A, л	0,346	0,282-0,420
Эффективность сбора, %	65,9	40,5-115,3
Скорость сбора, 1011/мин	0,039	0,025-0,057

 

Объем переработанной крови составил 2,72±0,08 л, количество введенного ACD-A - 0,347±0,009 л. Эффективность сбора тромбоцитов составила 66,5±3,0% при скорости сбора - 0,040±0,002х1011/мин.

В России пока не определено количество тромбоцитов, которое можно получить от одного донора в процессе одной донации. Совет Европы определил в качестве безопасной донацию, по окончании которой концентрация тромбоцитов в крови донора будет не менее 100х10⁹/л.

Если предположить, что донация второй дозы тромбоцитов у каждого донора будет сопровождаться тем же снижением концентрации тромбоцитов, что и при первой донации, то критическое (менее 100х 10⁹/л) снижение концентрации тромбоцитов разовьется у 8 из 46 доноров после донации второй дозы и у 9 из 34 доноров - после донации третьей дозы.

После донации у 2 доноров выявлен лейкоцитоз более 9х10⁹/л, а у 11 - отклонение доли лимфоцитов от величин, определенных в качестве нормы для доноров крови (18-38%), таблица 3.

 

Таблица 3

Показатели периферической крови после донации

Показатель	M±SD	Медиана (диапазон)
Лейкоциты, 109/л	6,5±0,5	6,1 (4,5-14,4)
Эритроциты, 1012/л	5,2±0,2	5,3 (4-6,3)
Гематокрит, %	46,6±1,3	47,2 (36,6-57,8)
Тромбокрит, %	0,166±0,009	0,161 (0,111-0,260)
Средний объем эритроцита, фл	90,2±1,4	89,8 (80-99)
Среднее содержание гемоглобина в эритроците, пг	30±0,5	29,1 (25,3-32,4)
Средняя концентрация гемоглобина в эритроцитарной массе, г/л	316,7±4,2	313(289-345)
Коэффициент вариации среднего объёма эритроцитов, %	13,3±0,3	13,5 (10,4-15,6)
Средний объём тромбоцита, фл	8,6±0,3	8,5 (6,9-10,9)
Коэффициент вариации среднего объёма тромбоцитов (PDW), %	11,6±0,4	11,4 (9,1-14,8)
Лимфоциты, %	35±2,2	34 (17-57,4)
Лимфоциты, 109/л	2,2±0,2	2,1 (1,3-3,5)
Моноциты, %	8,6±0,8	8 (5,1-18,9)
Моноциты, 109/л	0,6±0,1	0,5 (0,3-1,3)
Гранулоциты,%	55,5±2,7	55 (34,4-81,3)
Гранулоциты, 109/л	3,6±0,5	3,3 (1,7-10,9)

 

Масса тела и показатели красной крови у доноров - женщин ниже, чем у мужчин, а снижение концентрации тромбоцитов после афереза и эффективность их сбора - выше (табл. 4).

 

Таблица 4

Половые различия показателей у доноров тромбоцитов

Показатель	Мужчины	Женщины	ꭓ2	p
Масса тела, кг	78,8±10,8	62,4±7,1	21,1	<0,001
Гемоглобин до донации, кг	153,6±9,4	127,8±3,9	31,3	<0,001
Гемоглобин после донации,кг	151,2±9,9	126,0±5,7	31,3	<0,001
Снижение концентрации тромбоцитов (109/л)	43±22	55,6±31,6	4,2	<0,05
Эритроциты после донации (1012/л)	5,3±0,5	4,3±0,3	19,2	<0,001
Эффективность сбора, %	66,3±10,9	67,8±4,8	11,1	<0,05

 

Интересны корреляционные связи исследованных показателей, в частности прямая корреляционная связь PDW после донации с массой тела и площадью поверхности тела донора (табл. 5).

 

Таблица 5

Корреляционные связи показателей процесса донации тромбоцитов

Пара показателей		r	p
Коэффициент вариации PDW	Масса тела	0,290	0,05
	Площадь поверхности тела	0,293	0,047
Количество клеток в контейнере	Концентрация тромбоцитов до афереза	0,583	<0,001
	Снижение концентрации тромбоцитов	0,017	0,031
Объем контейнера	Продолжительность афереза	0,509	<0,001
	Тромбокрит после донации	-0,296	0,045
Концентрация лейкоцитов после донации	Доля лимфоцитов	-0,335	0,022
Концентрация эритроцитов после донации	Концентрация лимфоцитов	0,423	0,003
	Концентрация моноцитов	0,322	0,024
Концентрация тромбоцитов после донации	Доля лимфоцитов	0,294	0,047
Концентрация лимфоцитов после донации	Концентрация моноцитов после донации	0,463	<0,001
Эффективность сбора тромбоцитов	Площадь поверхности тела	-0,455	<0,001
	Гематокрит после афереза	-0,463	0,022
Скорость сбора тромбоцитов	Концентрация тромбоцитов до афереза	0,495	<0,001
	Объем взвеси на 60 млрд тромбоцитов	-0,627	<0,001

 

Заключение. Аферез 3 х 10¹¹ тромбоцитов приводит к снижению их концентрации в крови на 47,4±6,9х10¹¹/л (от 1,4 до 38,9%). При этом снижение концентрации тромбоцитов менее чем на 10% наблюдается у 22% доноров. Этот феномен, в основе которого, возможно, лежит выход секвестрированных в селезенке тромбоцитов из депо, может быть основой отбора доноров нескольких доз тромбоцитов.

При отборе доноров тромбоцитов следует отдавать предпочтение мужчинам с массой тела более 75 кг. Для обеспечения соответствия регламентированной концентрации клеток в контейнере аферезных тромбоцитов следует предусмотреть использование добавочного раствора. Внедрение регламентированной минимальной концентрации тромбоцитов в крови донора после афереза (не менее 100х 10⁹/л) позволит обеспечить заготовку двух доз (1 доза - не менее 3х 10¹¹ тромбоцитов) - у 80% доноров, трех доз - у 50% доноров.

Установлена прямая корреляционная связь коэффициента вариации среднего объёма тромбоцитов после донации с массой тела и площадью поверхности тела донора.

Результаты гемоцитологического скрининга доноров тромбоцитов позволяют рекомендовать как продолжение исследований, так и пересмотр регламентированных норм состава периферической крови [6].

Для сравнительных исследований эффективности афереза тромбоцитов предложены 2 показателя: эффективность сбора тромбоцитов и скорость сбора тромбоцитов. В нашем исследовании их значения составили 66,5±3% и 0,040±0,002х10¹¹/мин соответственно.

About the authors

R. F. Ayupova

Республиканская станция переливания крови

Author for correspondence.
Email: ayupova63@yandex.ru
Russian Federation, Уфа

U. S. Sultanbaev

Республиканская станция переливания крови

Email: ayupova63@yandex.ru
Russian Federation, Уфа

E. B. Zhiburt

Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова

Email: ayupova63@yandex.ru
Russian Federation, Москва

References

Supplementary files