Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии

Введение. Фенольные соединения обладают широким спектром биологической активности. Они входят в состав фитопрепаратов для лечения заболеваний, относящихся к наиболее распространенным заболеваниям, требующим длительной терапии и профилактики. В этнофармакологии Сибири Solidago dahurica Kitag. используется как средство для выведения камней из почек, мочегонное и противовоспалительное. Актуальной задачей является изучение фенольных соединений S. dahurica.

Цель исследования – изучение состава и содержания фенольных соединений Solidago dahurica, оценка динамики их накопления и прогнозирование биологической активности содержащихся фенольных соединений.

Материал и методы. Объект исследования – надземная часть S. dahurica, собранная в различные фазы вегетации в Иркутской области. Выделение и идентификацию фенольных соединений проводили методом микроколоночной хроматографии. Содержание фенольных соединений устанавливали методом перманганатометрического титрования, сумму флавоноидов и фенолкарбоновых кислот – спектрофотометрическим методом на спектрофотометре Leki SS1207. Прогнозирование видов биологической активности осуществляли с применением отечественной компьютерной программы PASS при принятом пороговом значении уровня вероятности Paі 0,500.

Результаты. В результате проведенных исследований выделено и идентифицировано 8 соединений, из них 4 флавонола – кверцетин-3-О-рутинозид (рутин), кверцетин-3-О-глюкозид, изорамнетин-3-O-рутинозид (нарциссин), кемпферол-3-О-рутинозид; 3 фенолкарбоновые кислоты – 3-кофеоилхинная (хлорогеновая), 3,5-дикофеилхинная и 4,5-дикофеилхинная; а также бисглюкозид – лейокарпозид. В сумме фенольных соединений доминирующими явились кислоты хлорогеновая (3,11 мг/г) и 3,5-дикофеилхинная (2,96 мг/г). В S. dahurica обнаружены впервые 5 соединений – рутин, нарциссин, 3,5- и 4,5-дикофеилхинные кислоты, лейокарпозид. При изучении динамики накопления установлено, что максимальное количество суммы фенольных соединений, а также флавоноидов и фенолкарбоновых кислот накапливается в надземной части в период цветения – 8,48, 4,98 и 1,44% соответственно. Выделенные фенольные соединения обладают высоким прогностическим уровнем проявления следующих видов биологической активности – противовоспалительной, антиоксидантной, желчегонной, диуретической и гемостатической (Pa от 0,504 до 0,992).

Выводы. Из надземной части S. dahurica выделено и идентифицировано 8 фенольных соединений – флавоноидов, фенолкарбоновых кислот и бисглюкозид. Максимальное количество этих соединений накапливается в период цветения. Выделенные фенольные соединения обладают высокими прогностическими уровнями в отношении проявления противовоспалительной, антиоксидантной, желчегонной, диуретической и гемостатической активностью.

Введение. Растущее количество острых отравлений мухоморами становится серьезной медико-социальной проблемой. На торговых площадках наиболее часто встречаются капсулы, содержащие измельченное высушенное сырье мухомора красного (Amanita muscaria (L.) Lam.) и/или мухомора пантерного (Amanita pantherina (DC.) Krombh.). В сырье присутствуют психоактивные соединения, такие как мусцимол, иботеновая кислота и 1-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1H-бета-карболин-3-карбоновая кислота, которые являются причиной их рекреационного употребления. Разработка методик качественного обнаружения целевых веществ в извлечениях из капсул представляет интерес для современной токсикологии, поскольку химико-токсикологический анализ (ХТА) является обязательным элементом клинико-лабораторной диагностики. Получение хроматограмм и масс-спектров нативных молекул при анализе капсул в перспективе упростит разработку методики анализа биологических жидкостей при ХТА.

Цель исследования – разработка методики качественного анализа капсул, содержащих высушенное сырье мухомора красного и пантерного с помощью жидкостной тандемной хромато-масс-спектрометрии.

Материал и методы. В качестве объектов исследования были взяты капсулы мухомора красного и пантерного из интернет-магазина «Лесной лекарь» (Россия). Обнаружение и идентификацию целевых веществ в извлечениях из капсул проводили на жидкостном хроматографе Nexera XR с тандемным масс-спектрометром LCMS-8050 (Shimadzu, Япония) с использованием колонок Shim-pack FC-ODS, Shim-pack VP-ODS C8-Phenyl, Shim-pack GIST C18-Aqua HP, электронной библиотеки масс-спектров Shimadzu.

Результаты. Установлено, что оптимальным методом изолирования веществ из капсул является экстракция метанолом и фильтрация с использованием фильтрующих насадок. Исследования показали, что применение колонки Shim-pack GIST C18-Aqua HP и градиентного режима элюирования позволяет достигнуть наилучших параметров хроматографического разделения мусцимола и мускарина.

Выводы. Разработана методика изолирования мускарина и мусцимола из капсул, содержащих измельченное высушенное сырье мухомора красного и пантерного и их качественного обнаружения с применением модульного жидкостного хроматографа Nexera XR с тандемным масс-спектрометром LCMS-8050 (Shimadzu, Япония). Оптимальной для анализа данных высокополярных гидрофильных токсикантов является колонка Shim-pack GIST C18-Aqua HP (3 мм × 150 мм, 3 мкм) (Shimadzu, Япония). В метанольном извлечении определены: мускарин – время удерживания 3,48 мин, мусцимол – 2,35 мин (спектр ион-продуктов имел сходимость с сертифицированной библиотекой прибора более 80%). Полученные данные могут представлять ценность для клинической и аналитической токсикологии, а также будут в дальнейшем использованы для разработки методик обнаружения токсикантов в биологических объектах.

Введение. Анатомические препараты являются не только важным вспомогательным материалом при обучении высококвалифицированных специалистов естественно-научного профиля, но и составляют базу для научно-исследовательской работы. Большинство демонстрационных и учебных препаратов – влажные, то есть сохраняются в консервирующих жидкостях и нуждаются в постоянном наблюдении и периодической реставрации. Формалин, несмотря на свои общеизвестные канцерогенные, мутагенные и токсические свойства, остается наиболее часто используемым консервирующим раствором во всем мире. Таким образом, уже давно возникла необходимость поиска альтернативных вариантов растворов, обладающих антисептическими, фиксирующими и консервирующими свойствами, но при этом безопасных для здоровья человека и окружающей среды.

Цель исследования – на основе обзора литературы провести поиск перспективных вариантов консервирующих растворов, не содержащих в своем составе формалин; рассмотреть их безопасность и влияние на фиксируемые ткани, изучить положительные и отрицательные свойства.

Материал и методы. В обзор включены данные исследований, изучающих различные способы фиксации патологоанатомического материала для изготовления влажных анатомических препаратов. Источниками для обзора послужили базы данных PubMed, Google Scholar, ResearchGate, eLibrary.ru, КиберЛенинка.

Результаты. В настоящем обзоре рассмотрены монокомпонентные консервирующие растворы на основе глиоксаля, бензоата натрия, азида натрия, полигексаметиленгуанидина гидрохлорида и концентрированных солевых растворов и проведен их сравнительный анализ.

Заключение. Разработанные в настоящее время альтернативные варианты консервирующих растворов имеют ряд существенных недостатков, что не позволяет им стать полноценной заменой формалина. Дальнейший поиск и совершенствование методик консервации патологоанатомических препаратов должны позволить в будущем отказаться от применения консервирующих растворов, в составе которых содержатся токсичные вещества, представляющие опасность для здоровья человека и окружающей среды.

Введение. Повышение эффективности лечения онкологических заболеваний остается актуальной задачей на сегодняшний день. Использование различных транспортных форм для терапевтических агентов позволяет улучшить их биодоступность и специфичность распределения в организме, снижая токсичное воздействие.

Цель исследования – оценка влияния комплексов нативного белка аполипопротеина А-I (апоА-I) с цитостатическими препаратами различной концентрации [0,1 и 1 мкг/мл] на активацию каспаз 3/7 в культуре клеток асцитной карциномы Эрлиха.

Материал и методы. АпоА-I выделяли из фракции липопротеинов высокой плотности (ЛПВП) плазмы крови человека. Белок конъюгировали с цитостатическими препаратами (актиномицин Д, доксорубицин, винбластин, мелфалан). Эксперименты выполняли на культуре клеток асцитной карциномы Эрлиха. Инкубацию клеток с исследуемыми комплексами в различных дозировках проводили в течение 24 ч, за 30 мин до окончания добавляли реагент CellEvent^TM Caspase-3/7 Green Detection Reagent (Thermo Fisher Scientific, США). Обсчет количества апоптотических клеток регистрировали с помощью программы AxioVizion V.4.5.

Результаты. Показано, что добавление комплексов апоА-I с противоопухолевыми препаратами способствует активации каспаз 3/7 в клетках асцитной карциномы Эрлиха при использовании цитостатических препаратов в минимальных концентрациях [0,1 мкг/мл]. Препараты без переносчика данный эффект не вызывали.

Выводы. Применение апоА-I в качестве транспортной формы противоопухолевых препаратов способствует более эффективной, по отношению к цитостатикам без переносчика, активации апоптоза в клетках асцитной карциномы Эрлиха.

Введение. Макролиды представляют собой класс антибиотиков с широким спектром действия, которые назначают для лечения разнообразных инфекционных заболеваний, как локальных, так и системных. Использование макролидов в целом считается безопасным, однако у некоторых пациентов может возникнуть риск дозозависимых нежелательных лекарственных реакций (НЛР), что может снижать безопасность лечения для данной категории больных.

Цель исследования – изучение влияния активности изофермента CYP3A4 на безопасность терапии эритромицином у пациентов с бактериальными осложнениями гриппа.

Материал и методы. Проведено открытое несравнительное проспективное исследование, в рамках которого 40 пациентов с установленным диагнозом бактериальных осложнений гриппа со стороны нижних отделов респираторного тракта (шифры диагнозов J10.0-J10.1 по МКБ-10), получали в течение пяти суток эритромицин в форме таблеток. Активность CYP3A4 оценивали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии по отношению концентраций эндогенного субстрата и его метаболита в моче (6β-гидроксикортизол/кортизол).

Результаты. Установлено, что значения метаболического отношения в первый день исследования (что соответствует исходному уровню активности изофермента CYP3A4) и в динамике были значимо ниже у пациентов с любой зарегистрированной НЛР. Также обнаружено, что возникновение тошноты достоверно чаще отмечалось у пациентов с низкой исходной активностью CYP3A4. Статистически значимых ассоциаций остальных отдельных НЛР с уровнем метаболического отношения выявлено не было.

Выводы. В проведенном исследовании с участием пациентов с бактериальными осложнениями гриппа продемонстрировано влияние активности изофермента CYP3A4 на показатели безопасности терапии эритромицином. Таким образом, определение уровня активности CYP3A4 может позволять прогнозировать развитие тошноты на фоне применения эритромицина.

Введение. Гиперпродукция активных форм кислорода (АФК) вовлечена в патогенез множества неврологических и нейродегенеративных заболеваний. Следовательно, антиоксиданты способны оказывать положительное действие на работу центральной нервной системы, предупреждая развитие окислительного стресса. Пиридин – один из наиболее важных гетероциклических ядер, обеспечивающих противоэпилептическое, антидепрессантное, седативное, противоопухолевое и противомикробное действие. Пиридиновое кольцо также является структурным элементом объектов исследования – 2,5-диарил-8,8-диметил-3,7,8,9-тетрагидро-2Н-пиридо[4,3,2-de]циннолин-3-онов.

Цель исследования – изучение ноотропной активности 2,5-диарил-8,8-диметил-3,7,8,9-тетрагидро-2Н-пиридо[4,3,2-de]ци-ннолин-3-онов.

Материал и методы. В качестве объектов исследования были выбраны 2,5-диарил-8,8-диметил-3,6,7,8-тетрагидро-2Н-пиридо[4,3,2-de]циннолин-3-оны. Данные соединения получены в результате взаимодействия 2-арил-7,7-диметил-5-оксо-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновых кислот с арилгидразинами. Первым этапом при изучении ноотропной активности являлась оценка ориентировочно-исследовательской активности in vivo на модели «Открытое поле» (двигательная, исследовательская активность и уровень стресса). Двигательная активность определялась путем подсчета количества пересечений секторов, исследовательская – количеством заглядываний в отверстия и подъемов на задние лапы, тревожность – количеством фекальных болюсов и мочеиспусканий. Также фиксировалось число актов груминга (самовычесывания).

Результаты. Структура соединений с целью прогнозирования биологической активности проанализирована в программе PASS online (вероятность наличия ноотропной активности (р_a) от 61 до 78%). Показано, что двигательная активность у животных на фоне введения соединений I, III и V превышает значение препарата сравнения (пирацетам) на 21–34%. Выраженная стимуляция исследовательского поведения наблюдается под действием соединений I и III, причем выше пирацетама на 28 и 54% соответственно, а у пиридоциннолина I – мексидола. Активация ориентировочных реакций, превышающая оба препарата сравнения (пирацетам и мексидол) в среднем на 16, 34 и 68%, характерна для образцов I, III и V. Таким образом, выраженной ориентировочно-исследовательской активностью обладают пиридоциннолины I, III и V, содержащие в своей структуре метильные группы, атомы хлора и фтора. Полученные результаты подтверждены данными прогнозирования в программе PASS.

Выводы. Наличие влияния пиридоциннолин-3-онов на ориентировочно-исследовательское поведение подтверждает целесообразность и перспективность дальнейшего фармакологического скрининга, в частности изучения их воздействия на когнитивные функции.

Введение. В медицинской практике для профилактики развития глаукомы могут быть рекомендованы источники антоцианов. Эта группа природных фенольных соединений обладает выраженными антиоксидантными и нейропротекторными свойствами. Фармакопейным источником антоцианов являются плоды черники обыкновенной. Сырье близкородственных видов, например, эндемика Северного Кавказа черники кавказской, может быть дополнительным источником антоцианов наряду с плодами черники обыкновенной.

Цель исследования – сравнительное изучение антоцианового профиля плодов черники кавказской и черники обыкновенной и их влияния на развитие глаукомы.

Материал и методы. Исследуемые извлечения получали двумя способами из воздушно-сухих плодов: без и с добавлением хлористоводородной кислоты. Профиль антоцианов устанавливали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектором в градиентном режиме. Рассчитывали относительное содержание компонентов. Глаукому моделировали инъекцией микрошариков из полистирола в переднюю камеру глаза крыс с последующей оценкой активности сукцинатдегидрогеназы и концентрации активных продуктов, реагирующих с 2-тиобарбитуровой кислотой в тканях мозга крыс.

Результаты. В извлечениях из плодов черники обыкновенной и черники кавказской, полученных экстракцией спиртом этиловым 70% с добавлением хлористоводородной кислоты, обнаружено три антоциана: дельфинидин, цианидин, смесь пеонидина и мальвидина. В плодах обоих видов мажорным агликоном является цианидин. При экстракции плодов спиртом этиловым 70% без добавления кислоты в извлечении обнаруживается 9 соединений: дельфинидин-3-галактозид, дельфинидин-3-глюкозид, цианидин-3-галактозид в смеси с дельфинидин-3-арабинозидом, цианидин-3-глюкозид, петунидин-3-галактозид, цианидин-3-арабинозид, петунидин-3-глюкозид, пеонидин-3-глюкозид, мальвидин-3-глюкозид. Среди гликозидных форм в плодах черники кавказской превалирует мальвидин-3-глюкозид и дельфинидин-3-глюкозид, в плодах черники обыкновенной – цианидин-3-глюкозид и гликозиды дельфинидина. При этом нейропротекторное действие извлечений, полученных с добавлением кислоты, оказалось более выражено за счет повышения концентрации сукцинатдегидрогеназы и уменьшения содержания продуктов тиобарбитуровой кислоты в тканях мозга крыс.

Выводы. Сумма антоцианов обуславливает нейропротекторное действие плодов двух видов черники, что позволяет рекомендовать их для профилактики развития глаукомы.