Медицинский академический журнал

Смешанная слюна является важным барьером, препятствующим проникновению патогенов в организм. Несмотря на многолетние исследования защитных факторов слюны, функциональное значение некоторых из них до сих пор не раскрыто. Фракция пролин-богатых белков и пептидов — продуктов их протеолиза — в смешанной слюне преобладает, однако функции данных пептидов до сих пор остаются малоизученными. Различные болезни ротовой полости — это нередкая проблема для человека, особенно это касается пациентов пожилого возраста, что, несомненно, определяет актуальность исследований, которые направлены на выяснение роли в патогенезе этих заболеваний как известных защитных молекул врожденного иммунитета — антимикробных пептидов, так и остающихся малоизученными пролин-богатых полипептидов. Цель обзора — рассмотреть и обобщить имеющиеся в литературе данные, раскрывающие молекулярные механизмы участия ряда белковых компонентов смешанной слюны человека — антимикробных пептидов (α- и β-дефенсины, кателицидин, гистатины и др.) и пролин-богатых катионных белков и пептидов (секреты околоушных желез) в обеспечении ее защитных функций в норме и при различных видах патологии. На основании анализа литературы можно заключить, что при изучении биологической активности защитных факторов смешанной слюны необходимо учитывать, что каждое из этих соединений реализует свои эффекты в тесном взаимодействии с другими компонентами слюны, модулируя их активность. В частности, можно предположить, что функции пролин-богатых белков и пептидов ротовой жидкости во многом осуществляются в результате межмолекулярных взаимодействий с антимикробными пептидами.

Обоснование. Для определения степени тяжести состояния пострадавших, подвергшихся воздействию химического фактора пожара, ориентируются на содержание карбоксигемоглобина в крови. Ингаляционное воздействие продуктов горения полимерных материалов, обладающих пульмонотоксическим действием, приводит к нарушению структуры и функции дыхательной системы, что играет важную роль в утяжелении состояния пострадавших и прогнозировании исхода.

Цель — выявить особенности определения степени тяжести состояния пострадавших, подвергшихся воздействию химического фактора пожара, в зависимости от рассчитанной начальной концентрации карбоксигемоглобина в крови и наличия интерстициальных изменений в тканях легких.

Материалы и методы. При проведении ретроспективного анализа историй болезней пострадавших, подвергшихся воздействию химического фактора пожара, рассчитывали начальную концентрацию карбоксигемоглобина в крови, анализировали рентгенограммы органов грудной полости, выполненные в первые сутки после поступления.

Результаты. В зависимости от рассчитанной начальной концентрации карбоксигемоглобина в крови выделили пациентов тяжелой (59 [55; 60]%), средней (42 [36; 43]%) и легкой степени (18 [15; 24]%) тяжести. Длительность госпитализации пациентов не зависела от степени тяжести. Длительность госпитализации (5 [4; 8] сут) пациентов с выявленными на рентгенограммах интерстициальными изменениями в легких (47 ± 7% пострадавших) была выше (p = 0,03) по сравнению (3 [2; 5] сут) с пациентами, у которых интерстициальных изменений выявлено не было (53 ± 7% пострадавших). Определили умеренную корреляцию (r = 0,31, p < 0,05) между длительностью госпитализации пациентов и наличием интерстициальных изменений со стороны дыхательной системы.

Заключение. Наличие интерстициальных изменений в тканях легких, определенных при проведении рентгенографии, следует рассматривать в качестве неблагоприятного прогностического признака и учитывать при организации оказания медицинской помощи пострадавшим, подвергшимся воздействию химического фактора пожара.

Обоснование. Согласно современным представлениям, кисспептиновая сигнальная система — это верхнее (центральное) звено регуляции репродуктивной функции. Нейропептид кисспептин считают индикатором ряда акушерских патологий у человека. Поэтому важен поиск новых синтетических аналогов природных кисспептинов в качестве фармакологических агентов регуляции репродукции. С другой стороны, актуальным становится поиск новых эффективных модельных организмов, в которых определенные эффекты проявляются наиболее ярко по сравнению с традиционными экспериментальными животными.

Цель — количественно оценить действие кисспептина-14 на уровень гонадолиберина и прогестерона в двух дозах на сроках, типичных для действия нейропептидов, на модельном организме Danio rerio.

Материалы и методы. В настоящем исследовании использован аналог кисспептина, условно обозначенный кисспептин-14. Все самки Danio rerio достигли половой зрелости к моменту эксперимента (6–8 мес.). Кисспептин вводили в дозах 1 и 4 нг. Группы анализировали через 1 и 4 ч после введения. Перед введением препарата рыб подвергали лидокаиновой анестезии при концентрации 40 мг/л на 5–6 мин, затем вводили препарат интрацеребровентрикулярно. Через 1 или 4 ч проводили забор материала (гонады и средний мозг). Образцы гонад и среднего мозга гомогенизировали, гомогенаты суспензировали и проводили иммуноферментный анализ для определения концентрации гормонов.

Результаты. Введение кисспептина-14 в дозе 1 нг привело к увеличению уровня гонадолиберина спустя 4 ч после введения. При меньшем сроке после введения не было выявлено статистически значимых результатов. Введение кисспептина-14 в дозах 1 и 4 нг привело к увеличению уровня прогестерона в гонадах самок Danio rerio спустя 1 и 4 ч после введения. При этом статистически значимые различия по сравнению с контрольной группой были отмечены на разных сроках взятия образцов.

Заключение. Интрацеребровентрикулярное введение кисспептина-14 в дозе 1 нг спустя 4 ч вызывает повышение гонадолиберина в структурах среднего мозга. Интрацеребровентрикулярное введение кисспептина-14 вызывает повышение прогестерона в гонадах самок Danio rerio. Однозначной взаимосвязи между изменением концентрации гонадолиберина в структурах среднего мозга и изменением концентрации прогестерона в гонадах самок выявлено не было.

Обоснование. Одна из проблем лучевой терапии злокачественных новообразований — возникновение субпопуляции клеток, обладающих меньшей радиочувствительностью, чем исходная опухоль. Фракционированное облучение при лучевой терапии часто приводит к тому, что клетки с радиорезистентным фенотипом могут полностью заместить клетки исходной популяции. Мы предполагаем наличие изменений в эпигенетическом профиле клетки, которые затрагивают укладку хроматина в ядре, что приводит к формированию радиорезистентного фенотипа.

Цель — исследовать структуры ядер субпопуляции клеток линии аденокарциномы Эрлиха с радиорезистентным фенотипом.

Материалы и методы. В эксперименте клетки аденокарциномы Эрлиха (перевивная асцитная опухоль мышей) подвергали облучению в установке РХ-30-гамма (источник ⁶⁰Co, мощность дозы 0,87 Гр/мин), после чего перевивали самкам аутбредных мышей ICR (CD-1). Облучение исходной популяции аденокарциномы Эрлиха показало, что клетки теряли способность к перевивке при дозе облучения 20 Гр и выше. В серии облучений с постепенным увеличением дозы (от 10 до 40 Гр) удалось получить субпопуляцию клеток, сохранившую способность к перевивке после облучения дозой 40 Гр. Для исходной и радиорезистентной субпопуляции клеток линии аденокарциномы Эрлиха проведены тесты по оценке чувствительности к действию ионизирующего излучения и получены препараты ядер клеток для исследования их структуры методом малоуглового рентгеновского рассеяния (SAXS).

Результаты. Анализ данных рассеяния, полученных на SAXS-дифрактометре показал, что структура ядер аденокарциномы Эрлиха практически не меняется для образцов, полученных от клеток исходной популяции и переживших облучение дозами 20 и 30 Гр. При этом клетки аденокарциномы Эрлиха, пережившие облучение дозой 40 Гр, демонстрируют аномально низкую фрактальную размерность в масс-фрактальном режиме (на размерах 40–200 нм).

Заключение. Изменение характера укладки хроматина в ядрах клеток с радиорезистентным фенотипом может помочь понять изменения, происходящие в клетке и приводящие к формированию радиорезистентности.

Обоснование. Сердечно-сосудистые заболевания — основная причина смертности в мире. Хроническая сердечная недостаточность сопровождается нарушениями гемодинамики, в том числе микрореологических свойств крови. Изменения в деформируемости эритроцитов могут вести к нарушению активации и взаимодействия тромбоцитов и нейтрофилов и способствовать тромбообразованию и прогрессированию хронической сердечной недостаточности.

Цель — определение активности нейтрофилов и тромбообразования в ex vivo модели тромбовоспаления у пациентов с хронической сердечной недостаточностью с одновременной оценкой микрореологии крови.

Материалы и методы. В исследовании участвовали 21 пациент с диагнозом «хроническая сердечная недостаточность» и 8 здоровых добровольцев. Участникам исследования проводили определение биохимического состава плазмы крови и оценку состояния форменных элементов крови. Оценку тромбовоспалительного процесса проводили в цельной гепаринизированной крови с использованием плоско-параллельных проточных камер, покрытых коллагеном I типа, при сдвиговой скорости 100 с^–1. Параметры деформируемости эритроцитов измеряли in vitro с помощью метода лазерной дифрактометрии. Агрегацию эритроцитов определяли методом диффузного рассеяния света от образцов цельной крови.

Результаты. Не было обнаружено статистических различий площадей тромба у здоровых людей из группы контроля и у пациентов с хронической сердечной недостаточностью. Однако скорость нейтрофилов у пациентов с хронической сердечной недостаточностью была значимо ниже, чем у здоровых (0,11 ± 0,02 и 0,16 ± 0,04 мкм/с соответственно). Площади тромба у пациентов с хронической сердечной недостаточностью на 5-й и 10-й минуте роста коррелировали с концентрацией эритроцитов и средним объемом эритроцита. С размерами тромба также положительно коррелировали коэффициенты агрегации эритроцитов A1 и A2, характеризующие интенсивность процесса образования линейных и трехмерных агрегатов соответственно. Кроме того, средний объем эритроцита, индексы деформируемости эритроцитов и предел текучести эритроцитов коррелировали со скоростями движения нейтрофилов.

Заключение. Таким образом, хотя при хронической сердечной недостаточности не наблюдается значимого изменения тромбообразования, можно говорить о снижении активности нейтрофилов, возможно, связанном с повышением вязкости крови.

Обоснование. Врожденный иммунный ответ играет важнейшую роль в защите организма от вирусных патогенов, и важная его часть — паттерн-распознающие рецепторы, такие как толл- и RIG-I-подобные. Известно, что инвазия вирусов, в том числе вируса гриппа, приводит к активации внутриклеточных паттерн-распознающих рецепторов, таких как TLR3, TLR7, TLR8 и TLR9, локализованных в эндоплазматическом ретикулуме, эндосомах и лизосомах, а также MDA5 и RIG-I — цитозольных сенсоров вирусной РНК, не связанных с мембранами клетки. Экспрессия этих генов, адекватное их функционирование и регуляция имеет колоссальное значение для обеспечения адекватного иммунного ответа и формирования противовирусной защиты.

Цель — разработка и апробация количественной ПЦР-системы для оценки экспрессии генов TLR3, TLR7, TLR8, TLR9, MDA5, RIGI в тканях и органах мыши.

Материалы и методы. Изучение уровней экспрессии генов проводили методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией, используя разработанные панели праймеров и флуоресцентных зондов. Для апробации были выбраны самки инбредной линии мышей-альбиносов BALB/c в возрасте 8–10 нед., зараженные вирусом гриппа А/PR8/34 (H1N1).

Результаты. В ходе исследования была разработана тест-система на основе мультиплексной полимеразной цепной реакции для оценки экспрессии генов эндосомальных рецепторов TLR3, TLR7, TLR8, TLR9, а также цитозольных сенсоров MDA5 и RIG-I, эффективность амплификации которых составила 99 (TLR3), 106 (TLR7) и по 107% для остальных генов. Данная тест-система была применена для исследования уровней экспрессии TLRs и RLRs в тканях легких и селезенок мышей линии BALB/c при заражении вирусом гриппа А/PR8/34 (H1N1). Согласно полученным результатам, через 24 ч после инфицирования было показано достоверное изменение уровней мРНК TLR3, TLR7, TLR8, TLR9 и MDA5 в легких, но не в селезенках зараженных животных.

Заключение. Разработанная тест-система может быть применена для анализа экспрессии некоторых внутриклеточных PRRs, что открывает возможности для более глубокого изучения патофизиологических механизмов развития иммунного ответа.

Статья посвящена академику АМН СССР Петру Степановичу Купалову — выдающемуся ученому-физиологу, нейробиологу, ученику, соратнику и преемнику И.П. Павлова, заслуженному деятелю науки, 27 лет возглавлявшему физиологический отдел им. И.П. Павлова Института экспериментальной медицины. Всю свою научную деятельность П.С. Купалов посвятил дальнейшему развитию физиологии высшей нервной деятельности, значительно обогатив представления о тончайших механизмах работы головного мозга новыми методами исследований, опираясь на классические павловские постулаты теории условных рефлексов. П.С. Купалов является разработчиком концепции «укороченных условных рефлексов», представлений о «динамическом стереотипе», методики ситуационных условных рефлексов. Петр Степанович сохранил для истории наследие своего учителя: от текстов павловских лекций по общей физиологии до основополагающих трудов по физиологии пищеварения и высшей нервной деятельности, традиции воспитания молодых ученых и научно-организационной работы, представления научных достижений отечественных ученых на международных форумах и в зарубежной прессе. Но впоследствии имя П.С. Купалова было незаслуженно забыто. Эта публикация является попыткой восстановить историческую справедливость по отношению к крупному ученому и замечательному человеку.