Том 13, № 4 (2013)

Исследование посвящено установлению комплекса основных структурных, пространственных и количественных реактивных изменений клеточных элементов переднего цингулярного поля и паранигрального ядра головного мозга, находящихся в разных условиях переднемозговой циркуляторной гипоксии. Полученные данные помогут четче представить различия в реактивности клеток мозга во взаимоотношениях друг с другом и со стенкой кровеносного капилляра. Они также могут быть использованы как основа для моделирования фармакологической коррекции постгипоксических состояний. Исследовали гистологические срезы передней медиальной части паранигрального ядра и слои V-VI прегенуального цингулярного поля взрослых крыс через 7 суток после окклюзии обеих общих сонных артерий, а также срезы интактных животных и ложно оперированных животных. В срезах, окрашенных по Нисслю, методами выявления глиального фибриллярного кислого белка и Iba1-протеина определяли соотношение малоизмененных, гипохромных, пикноморфных и теневидных нейронов, количество астроцитов, олигодендроцитов, микроглиоцитов и эндотелиоцитов. Определяли площадь тел жизнеспособных малоизмененных и гипохромных нейронов, астроцитов и микроглиоцитов, длину осевых отростков астроцитов, расстояние от тел жизнеспособных нейронов и астроцитов до стенки капилляров, глиоцито-нейрональный индекс. Установлено, что клеточные элементы головного мозга при переживании разных условий циркуляторной гипоксии характеризуются спектром выраженных патологических изменений. Нейроны находятся в процессе пикнотизации, лизиса и превращения в «клетки-тени». Клетки ядерной зоны гипоксии склонны к гибели или пикнозу. Нейроны, расположенные за пределами области гипоксии и испытывающие лишь гуморальное воздействие реакций глютамат-кальциевого каскада, склонны к острому набуханию. Реакция микроглиоцитов в виде слабо выраженного увеличения их числа и структурных признаков активации является ранним диффузным проявлением перендемозговой фокальной гипоксии. Пролиферация эндотелиоцитов в ранние сроки ишемического воздействия не связана с цепью каскадных реакций и наблюдается лишь в фокусе гипоксии. Концентрация жизнеспособных нейронов и астроцитов вблизи кровеносных капилляров, а также увеличение числа сателлитных форм глии являются адаптационными механизмами и условиями выживания клеток при различных условиях ишемического воздействия на головной мозг.

Исследованы изменения показателей естественных антител (е-АТ) к эндогенным биорегуляторам в сыворотке крови у больных гипертонической болезнью.

Поясная кора головного мозга участвует во многих регуляторных процессах центральной нервной системы, и нарушение ее функционирования наблюдается при ряде психопатологических состояний. В настоящей работе исследовано распределение и дана морфологическая характеристика холинергических структур в поясном отделе коры головного мозга крысы путем выявления холинацетилтрансферазы (ХАТ) — ключевого фермента синтеза ацетилхолина — с помощью методов иммуногистохимии и конфокальной лазерной микроскопии. В поясной коре обнаружено большое количество ХАТ-иммунореактивных волокон и отдельные ХАТ-иммунореактивные нейроны. Нейроны были небольшого размера, преимущественно веретеновидными и наблюдались в основном во II-III слоях. Волокна имели многочисленные варикозности, но ХАТ-иммунопозитивные терминали не удалось выявить, что указывает на внесинаптическое выделение ацетилхолина из варикозностей. В области пояса (cingulum) с особенно интенсивным ХАТ-иммуноокрашиванием нервных проводников обнаружены единичные мелкие, в основном униполярные ХАТ-иммунопозитивные нейроны, которые ранее никем не были описаны.

Результаты исследования впервые показывают, что пропорции содержания клеток CD133+34 -, CD133+/CD34+ и CD34+133 - в крови пациентов с хроническим заболеванием печени регулярно изменяются и их средняя численность возрастает после пересадки печени. Данные обсуждаются в контексте возможной физиологической роли фракций клеток в поддержании жизнеспособности органа.

Проведен анализ концентрации РНК ВИЧ в парных образцах кровь-цервиковагинальный секрет в популяции ВИЧ-инфицированных женщин репродуктивного возраста Санкт-Петербурга. Наличие крови, лейкоцитов и спермы в цервико-вагинальных образцах не являлось критерием исключения из анализа, так как основной задачей было определение связи между количеством РНК ВИЧ в крови и содержимом нижнего отдела полового тракта, определяющим риски передачи ВИЧ половым путем. Выявлены пороговые значения уровней РНК ВИЧ в крови, являющиеся предикторами значительного повышения концентрации РНК ВИЧ в цервиковагинальном содержимом и увеличения риска передачи ВИЧ половым путем. Установлена корреляция между количеством лейкоцитов в цервиковагинальном секрете и уровнем РНК ВИЧ в содержимом нижних половых путей.

Для решения проблемы специфической терапии амилоидозов проведено исследование на модельном объекте — амилоидогенном белке бета2-микроглобулине (β2m) человека. Целью исследования было получение вариантов белка с заменами, модулирующими фибриллогенные свойства β2m, которые потенциально могли бы подавлять фибриллогенез природного белка. Исследование включало два этапа: компьютерное моделирование способности к ассоциации β2m при внесении аминокислотных замен в первичную структуру с изменением степени симметрии молекулы и экспериментальную проверку свойств отобранных вариантов белка путем создания соответствующих генетических конструкций и получения целевых рекомбинантных вариантов β2m. На основании компьютерных расчетов были отобраны варианты с двойными заменами в N- и C-концевых участках белковой молекулы, которые потенциально обеспечивают изменение агрегационных свойств мономеров. Эти варианты получены в виде рекомбинантных производных в ходе экспрессии специально созданных генетических конструкций. Для получения конструкции с заменами в средней части молекулы белка разработан оригинальный способ двойной полимеразной цепной реакции (ПЦР) с получением промежуточного протяженного праймера — фрагмента гена β2m с целевыми заменами, который использовался в качестве прямого праймера во второй ПЦР. Показано, что все рекомбинантные варианты β2m способны образовывать фибриллы. Фибриллы формируются также при попарном смешении разных вариантов. Электронномикроскопически все фибриллы вариантов β2m не обнаруживают видимых отличий.