Медицинский академический журнал

В обзоре рассматриваются накопленные за последнее время клинические и экспериментальные данные по механизмам эпилептогенеза, методы наиболее приемлемой регистрации электроэнцефалограммы для выявления эпилептиформной активности. Приводится описание эпипаттернов, а также артефактов — графоэлементов, похожих на эпипаттерны. Все описания подкреплены соответствующими иллюстрациями. С целью выявления возможной эпилептиформной активности подчеркивается необходимость предварительной регистрации электроэнцефалограммы с функциональными пробами в виде ритмической фотостимуляции и гипервентиляции для человека, принимающего участие в качестве испытуемого в исследованиях, связанных с физическими и постуральными нагрузками.

В обзоре обобщены современные данные о свойствах, локализации и физиологической роли фермента синтеза γ-аминомасляной кислоты — глутаматдекарбоксилазы в тканях млекопитающих. В связи с высокой распространенностью фермента в тканях и клетках организма на данный момент существует большой массив разрозненных экспериментальных данных, которые нуждаются в обработке и систематизации. Приведены данные, демонстрирующие вовлеченность глутаматдекарбоксилазы в работу биохимических и физиологических процессов организма. Продемонстрировано, что наиболее интенсивно изучается ее роль в обеспечении ГАМКергической нейротрансмиссии в центральной нервной системе. При этом сведения о распространении и функциональном значении глутаматдекарбоксилазы в периферической нервной системе оказываются фрагментарными, а потому нуждаются в дополнительных исследованиях.

Исследование роли различных интерлейкинов при атеросклерозе показали, что провоспалительные цитокины способствуют прогрессированию заболевания и дестабилизации атеросклеротических бляшек. В обзоре представлены последние данные научной литературы и собственные результаты исследования влияния провоспалительных цитокинов интерферона-гамма и фактора некроза опухоли-альфа на формирование нестабильных атеросклеротических поражений. Показано, что нарушение прочности покрышки нестабильной бляшки и ее деструкция могут быть связаны с увеличением концентрации, активацией и действием мощных провоспалительных цитокинов интерферона-гамма и фактора некроза опухоли-альфа в сосудистой стенке.

Обоснование. При проникновении в нефагоцитирующие клетки бактерии задействуют различные эндоцитарные пути. Для многих бактериальных патогенов было показано участие кавеол/липидных рафтов в процессе бактериальной инвазии. Однако для бактерий рода Serratia мало изучено вовлечение мембранных микродоменов в процесс интернализации бактерий.

Цель — установить участие кавеол/липидных рафтов в инвазии бактерий S. grimesii и S. proteamaculans в нефагоцитирующие эпителиоподобные клетки Caco-2 и M-HeLa с помощью нистатина.

Материалы и методы. Эпителиальные клетки M-HeLa и Caco-2 инкубировали с 50 мкмоль/л нистатина в течение 1 ч при 37 °С, после чего заражали бактериями S. grimesii штамм 30063 и S. proteamaculans штамм 94, множественность заражения составляла 100 бактерий на клетку. Количество внутриклеточных бактерий оценивали с использованием гентамицина. Уровень кавеолина-1 в клетках визуализировали с помощью конфокальной микроскопии и вестерн-блоттинга. Изменение экспрессии генов, кодирующих Toll-подобные рецепторы, измеряли методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Результаты. Обработка эпителиальных клеток нистатином приводит к уменьшению интернализации бактерий S. grimesii и S. proteamaculans в клетки M-HeLa на 30 % и не влияет на проникновение в клетки Caco-2. При этом нистатин не оказывает влияния на перераспределение/нарушение целостности липидных рафтов, не приводит к реорганизации цитоскелета эукариотических клеток. Добавление нистатина увеличивает уровень кавеолина-1 в клетках M-HeLa (в Caco-2 кавеолин-1 не экспрессируется), что приводит к изменению текучести плазматической мембраны. Нистатин способствует секреции провоспалительных цитокинов интерлейкина-6 и интерлейкина-8 в обеих клеточных линиях. Заражение предварительно обработанных нистатином клеток M-HeLa исследуемыми бактериями приводит к увеличению экспрессии генов tlr2 и tlr4, но не превосходит уровень их экспрессии в контрольных образцах, поэтому нельзя однозначно говорить об участии Toll-подобных рецепторов в инвазии бактерий Serratia.

Заключение. Полученные данные позволяют предположить, что взаимодействие бактерий с эукариотическими клетками индуцирует экспрессию кавеолина-1, что приводит к изменению подвижности компонентов плазматической мембраны. Это может быть связано с тем, что в инвазии исследуемых бактерий участвует β1-интегрин, который должен стабилизироваться на плазматической мембране при связывании с лигандом за счет образования мембранного микроокружения, богатого холестерином и сфинголипидами.

Обоснование. Белки коннексины, в частности коннексин 43, формируют щелевые контакты, обеспечивающие нейрон-глиальные коммуникации. До настоящего времени не изучался вопрос экспрессии коннексина 43 в фенотипически отличных нейролеммоцитах, в том числе в немиелинизирующих (клетки Ремака) и репаративных шванновских клетках.

Цель — выяснение присутствия в шванновских клетках седалищного нерва крысы коннексина 43 в норме и после механического повреждения путем наложения лигатуры.

Материалы и методы. Исследование проводили на крысах Вистар (n = 10). У подопытных крыс повреждали седалищный нерв путем наложения лигатуры на 40 с. Через 7 сут после операции у животных выделяли сегменты седалищного нерва для последующего иммуногистохимического исследования с применением антител к коннексину 43 и глиальному фибриллярному кислому белку. У крыс контрольной группы аналогичным образом выделяли сегменты интактных седалищных нервов.

Результаты. Показано, что в эндоневрии интактного седалищного нерва крысы клетки, экспрессирующие коннексин 43, отсутствуют. Установлено, что через 7 сут после травмы в эндоневрии поврежденного нерва идентифицируется большое количество коннексин-43-иммунопозитивных клеток неправильной формы с несколькими отростками. Отмечено отсутствие экспрессии коннексина 43 в содержащих глиальный фибриллярный кислый белок шванновских клетках.

Заключение. Можно констатировать, что повреждение нерва ведет к активному синтезу исследуемого белка клетками эндоневрия, однако происхождение клеток, экспрессирующих коннексин 43, еще предстоит выяснить.

Ирина Соломоновна Фрейдлин — выдающийся советский и российский иммунолог, доктор медицинских наук, профессор, заслуженный деятель науки, член-корреспондент РАН. Она была прирожденным педагогом и глубоким научным исследователем, чьи интересы были связаны, главным образом, с изучением врожденного иммунитета.