Том 9, № 4 (2009)

В статье отражены основные вехи научного творчества выдающегося ученого академика РАМН Б. И. Ткаченко. В результате многочисленных исследований, выполненных под его руководством, дано экспериментальное обоснование и теоретическое обобщение активной роли органных венозных сосудов в формировании венозного возврата крови к сердцу и в регуляции посткапиллярного сопротивления, определяющего уровень давления в капиллярном сосудистом русле. Установлено, что главной отличительной особенностью венозных сосудов является наличие двух четко выраженных функций - емкостной и резистивной, тогда как артериальным сосудам присуща лишь резистивная функция. Экспериментально обоснована гипотеза о многоконтурной регуляции венозных сосудов, которая имеет центральное и периферическое звенья, включающие нейрогуморальные и биофизические механизмы, предложена функциональная классификация системы кровообращения, вместо существовавшей анатомической схемы путей циркуляции крови. Проведенные под руководством Б. И. Ткаченко исследования позволили выдвинуть концепцию двойного адренерги-ческого контроля холинергических нейронов энтеральной нервной системы.

Метод тканевых матриц активно развивался и модернизировался в последние 20 лет. Изучены многие аспекты этого метода, а именно: соответствие результатов матричной технологии результатам стандартных исследований, трудозатраты по созданию матрицы, варианты оценки результатов исследования, сохранение антигенности тканей и т. д. В настоящей статье метод тканевых матриц использован для изучения злокачественных опухолей женской репродуктивной системы у большого контингента больных. Оцененные на практике высокая пропускная способность, возможность быстрого стандартизованного обследования большого количества пациентов на различные маркеры, экономичность и адекватность метода позволяют рекомендовать его для широкого внедрения в практику. Применение тканевых матриц в клинической гистологии существенно расширяет возможности диагностики различных видов патологии и способствует становлению предиктивной медицины. Скорость, с которой новые прогностические факторы, определяющие модальность терапии, генерируются и переносятся в клиническую практику, требует новых методологических подходов, дающих возможность своевременной или ретроспективной оценки этих клинически значимых факторов у большого количества пациентов. Широкое использование тканевых матриц в ближайшее время должно стать интегральной частью ежедневной работы при проведении научных и рутинных клинических исследований.

В рамках реализации проекта по разработке метода направленной доставки ДНК-вакцин в опухоли получены суперпарамагнитные наночастицы (СПМЧ) и разработан метод нековалентной сорбции на них нуклеиновых кислот. В экспериментах по in vitro транскрипции было показано, что иммобилизованная на частицах экспрессионная ДНК остается функционально активной и на ней синтезируется полноразмерная мРНК. В экспериментах на животных продемонстрирована направленность доставки иммобилизованного на частицах экспрессионного вектора с геном PSA человека под действием внешнего магнитного поля в ткани грызунов. С помощью ОТ-ПЦР показано, что человеческий ген PSA избирательно и эффективно экспрессируется в тканях грызунов в течение недели после инъекции.

Разработана методика моделирования реконструкции лицевого отдела черепа, обеспечивающая нормализацию функции жевания, речи, дыхания и достижение желаемого эстетического результата. Предложены эффективные методики остеотомии лицевого отдела черепа, осуществляемые внутриротовым доступом, рациональные способы фиксации образующихся костных сегментов и программа медицинской реабилитации пациентов. Обобщен 20-летний опыт комплексного лечения 557 больных.

Генотипирование и молекулярное маркирование микроорганизмов - основные методические направления современной молекулярной эпидемиологии. В данной статье представлены некоторые результаты фундаментальных и прикладных исследований Санкт-Петербургского института имени Пастера в области молекулярной эпидемиологии. Использованы методы: полного и лимитированного сиквенса генов, анализ полиморфизма длин фрагментов рестрикции ДНК, сполиготипирование, VNTR-типирование, резистотипирование и др. Получены новые знания о популяционной структуре и доминирующих генотипах микобактерий туберкулеза, коринебактерий дифтерии, хеликобактерий, вирусов гепатитов А, В, С, вирусов папилломы человека, циркулирующих в России, и в частности на северо-западе страны и в Санкт-Петербурге. Выявлена генетическая дивергенция популяции вируса краснухи и вакцинных штаммов полиовируса в условиях массовой вакцинации. Получены прямые доказательства более высокой эффективности методов генотипирования патогенов в эпидемиологической диагностике по сравнению с традиционным эпидемиологическим расследованием.

Цитокины представляют собой новую самостоятельную систему регуляции основных функций организма, существующую наряду с нервной и эндокринной регуляцией и связанную в первую очередь с поддержанием гомеостаза при внедрении патогенов и нарушении целостности тканей. За последние три десятилетия клонированы гены большинства цитокинов и получены рекомбинантные аналоги, полностью повторяющие биологические свойства природных молекул. Будущее цитокиновой терапии связано с генно-инженерными препаратами, получаемыми с применением последних достижений иммунобиотехнологии. В ГосНИИОЧБ для внедрения в клиническую практику разрабатываются новые лекарственные формы препаратов рекомбинантных цитокинов, включая интерферон альфа 2в, интерлейкин-1 бета и его рецепторный антагонист. Среди них препарат «Беталейкин», являющийся лекарственной формой рекомбинантного интерлейкина-1 бета (ИЛ-1) человека, зарегистрирован только в России и представляет собой уникальную отечественную разработку, доведенную до клинического использования. Новые лекарственные формы ИЛ-1 бета включают мази, гели и биодеградируемые губки, применяемые для лечения больных с ожогами, трофическими язвами, инфицированными ранами. Использование мазевой формы ИЛ-1 для лечения трофических язв нижних конечностей у больных сахарным диабетом позволяет существенно улучшить показатели заживления, проводить эффективное консервативное лечение и в ряде случаев отказаться от ампутации конечности. Рекомбинантный интерферон альфа в аэрозольной форме используется для интраназального применения при лечении больных с ОРВИ, включая грипп, в эпидемический период. Применение аэрозольного интерферона сокращает продолжительность заболевания на 2-3 дня, что с учетом сокращения периода нетрудоспособности может дать колоссальный экономический эффект в масштабах страны. В целом местное применение новых лекарственных форм цитокинов имеет ряд преимуществ, так как позволяет достигать высокой локальной концентрации действующего начала, целенаправленно воздействовать на орган-мишень и избежать нежелательных системных проявлений. Разработка различных вариантов сухих и жидких аэрозольных форм препаратов интерферона и рецепторного антагониста ИЛ-1 с заданным размером частиц позволяет создавать условия доставки цитокинов в различные отделы дыхательной системы. В настоящее время цитокины находят все более широкое применение в клинической практике для лечения онкологических, инфекционных, иммунодефицитных и других заболеваний. Развитие этого направления ведет к созданию и внедрению в клиническую практику новых лекарственных форм препаратов рекомбинантных цитокинов с повышенной эффективностью, улучшенными фармакологическими свойствами и высокой биодоступностью.

Целью исследования была разработка нового направления в эндоваскулярном лечении критической ишемии нижних конечностей на основе комбинированного использования методики субинтимальной и интралюминальной ангиопластики. Все больные с критической ишемией нижних конечностей в отсутствие необратимых изменений конечности, диктующих необходимость выполнения ампутации на уровне голени или бедра, рассматривались в качестве подходящих кандидатов для ангиопластики. С 2004 по 2008 г. было выполнено 139 эндоваскулярных вмешательств у 126 пациентов. Технический успех процедуры наблюдался в 90,5% случаев. Столь высокой частоты успеха ангиопластики удалось добиться в результате применения разработанных стандартов эндоваскулярного лечения. Частота больших осложнений не превышала 7%. Вероятность отсутствия рецидива критической ишемии нижних конечностей в течение года наблюдения составила 65%. Учитывая, что значительный процент больных считались «непригодными» для хирургического лечения в силу тяжести сопутствующей патологии, «неудовлетворительного» состояния дистального русла или наличия инфекции на стопе, а также небольшую продолжительность жизни пациентов, очевидно преимущество комбинированного использования методики субинтимальной и интралюминальной ангиопластики влечении критической ишемии нижних конечностей над хирургической реваскуляризацией.

В ходе анализа результатов исследования различных биомаркеров у 50 больных с острым нарушением мозгового кровообращения, у 40 больных с хронической сосудисто-мозговой недостаточностью вследствие атеросклероза каро-тидных артерий, у 30 пациентов с эпилептическими синдромами, у 20 детей, рожденных матерями-наркоманками, сделано заключение о большой клинической значимости таких биомаркеров, как PARK7 и nucleoside diphosphate kinase А, S-100b, Acetylpolyamine oxidase [AcPAO], С-реактивный белок, GluRI АМРА-рецептора, аутоантител (aAbs) к опиатным и глутаматным рецепторам (типа АМРА и глутаматным рецепторам NMDA, NMDA-аутоантител, NR1, NR-2A-NR2D и NR3A), которые помогают ранней диагностике патологического процесса, его степени выраженности и динамики под влиянием терапевтических мероприятий. Рекомендуется широкое внедрение в клиническую практику биомаркеров: NR1, NR-2A-NR2D и NR3A, GluRI АМРА-рецептора и др. Приведены литературные данные о генетических и биохимических маркерах при дегенеративных заболеваниях нервной системы, при болезнях Альцгеймера и Паркинсона.

У 144 больных раком толстой кишки и 60 больных раком желудка с различными стадиями злокачественного процесса изучены дооперационные показатели онкомаркеров, определяемых в сыворотке крови иммунохимическим способом. При раке желудка исследовались раковый эмбриональный антиген (РЭА), углеводные антигены СА 19-9 и СА 72-4. У больных колоректальным раком определялись показатели РЭА, СА 19-9 и СА 242. Полученные данные сопоставлялись с результатами послеоперационного стадирования опухолевого процесса. Установлено, что сочетанное повышение двух любых онкомаркеров (РЭА, СА 19-9, СА 72-4) указывает на метастазирование рака желудка с вероятностью 83,3%. Частота выявления метастазов рака толстой кишки возрастает вместе с числом повышенных онкомаркеров и достигает 90,9% при увеличении концентрации трех опухолевых маркеров: РЭА, СА 19-9 и СА 242. Нормальный уровень всех онкомаркеров при колоректальном раке исключает у пациента IV стадию заболевания (отдаленное метастазирование) и с вероятностью 85,7% свидетельствует об отсутствии метастатического поражения регионарных лимфатических узлов.