Том 18, № 6 (2020)

В обзоре рассмотрены принципы предиктивного генетического тестирования и скрининга в концепции персонализированной медицины. Представлены критерии проведения скрининга, разработанные ВОЗ в 1968 г., а также современные дополненные и уточненные критерии генетического тестирования для мультифакториальных заболеваний (МФЗ). Рассмотрена методология оценки проведения генетических тестов на основе аналитической и клинической достоверности, клинической значимости, этических, правовых и социальных последствий. Продемонстрированы подходы международных организаций, занимающимися оценкой технологий здравоохранения, в том числе генетических тестов. Отмечено, что в настоящее время проведение предиктивного генетического тестирования МФЗ перспективно в отношении тех заболеваний, патогенез которых связан с одиночными генами, подчиняющимся менделевским законам наследования. В этом случае предиктивное генетическое тестирование представляет интерес с точки зрения профилактики, индивидуального лечения и прогноза заболевания. При рассмотрении вопроса о внедрении предиктивного генетического тестирования в систему общественного здравоохранения наряду с клинической и экономической эффективностью необходимо учитывать риски здоровью населения. Преимущества генетического тестирования как персонализированных медицинских услуг должны превалировать над риском, связанным с его проведением. Развитие методологии оценки и прогнозирования рисков в случае проведения предиктивного генетического тестирования, а также совершенствование методов управления рисками позволит достичь главной цели - повысить эффективность системы здравоохранения.

Язвенный колит и болезнь Крона представляют одну из самых актуальных проблем современной медицины. Несмотря на то, что много внимания уделяется разработке и внедрению высокотехнологических методов диагностики, воспалительные заболевания кишечника (ВЗК) приобретают тенденцию к увеличению распространенности и заболеваемости. В литературном обзоре представлены сведения о молекулярно-генетических механизмах формирования ВЗК, биохимических маркерах ВЗК и их прогностическом значении. Показано, что точное представление о молекулярных основах развития ВЗК на сегодняшний день отсутствует, что усложняет разработку патогенетически аргументированных методов диагностики и прогнозирования риска развития и особенностей клинического течения язвенного колита и болезни Крона. Это приводит к развитию осложнений, требующих оперативного вмешательства, и неблагоприятному медико-социальному прогнозу. Возможно, механизмы развития данных заболеваний вызваны определенными нуклеотидными полиморфизмами генов, при определенном сочетании их с иммунологическими, средовыми факторами и микробной флорой. При этом диагностическая и прогностическая значимость генетических, биохимических, средовых особенностей, связанных с риском развития ВЗК, клинической картиной и эффективностью терапии, имеют значимые отличия у пациентов разных стран и регионов, что, в том числе препятствует адекватной оценке результатов молекулярно-генетического тестирования при проведении диагностики и прогнозирования ВЗК.

Рак щитовидной железы (РЩЖ) занимает первое место по распространенности среди злокачественных новообразований органов эндокринной системы. Группу наиболее сложных для диагностики случаев составляют новообразования с цитологическими категориями Bethesda III-V. Молекулярно-генетическое тестирование может стать инструментом, дополняющим рутинные цитопатологические исследования и оптимизировать диагностику РЩЖ. Цель исследования. Разработка панели для обнаружения точечных мутаций в цитологическом материале новообразования щитовидной железы с помощью метода МОЭ. Материалы и методы. В исследование были включены 52 пациента с новообразованием щитовидной железы. Пациенты были разделены на группы по принадлежности к IV-VI категории по классификации Bethesda. Первую группу составляли 24 человека, вторую - 7, третью - 21 человек. Цитологический материал представлен смывом с иглы тонкоигольной аспирационной биопсии. Генетическое тестирование проводилось с помощью технологии мультитаргетной однонуклеотидной элонгации (МОЭ). Было создано 3 панели с наиболее распространенными мутациями при РЩЖ: мутации в генах BRAF, KRAS, NRAS, HRAS. Для 25 пациентов получены результаты постоперационного гистологического исследования: 11 образцов папиллярного РЩЖ, 9 образцов фолликулярного варианта папиллярного рака и 5 - фолликулярной аденомы. Результаты. С помощью метода МОЭ удалось детектировать мутации в цитологическом материале, их доля составила 39%, из них BRAFV600Eобнаружена в 29% образцов, а мутация NRASQ6IR - в 10%. Для верификации метода были использованы положительные и отрицательные контрольные образцы, подтвержденные методом ПЦР. Во всех пробах наблюдалось полное соответствие полученных результатов при молекулярно-генетическом исследовании методом МОЭ. Заключение. МОЭ является высокочувствительным методом, позволяющим в относительно короткие сроки осуществить комплексный подход к поиску мутаций, что особенно важно при диагностике РЩЖ.

Введение. Выявление взаимосвязей между степенью выраженности окислительного стресса и активностью катепсинов в тканях, легкодоступных для диагностики болезни Альцгеймера (плазма и клетки крови), могут быть полезны для понимания патогенеза заболевания, ранней диагностики и мониторинга течения патологии. Цель: выявление корреляционных связей между уровнем окислительной модификации белков и активностью лизосомальных цистеиновых протеиназ плазмы и лейкоцитов пациентов с болезнью Альцгеймера в сравнении с аналогичными показателями у пациентов, не имеющих признаков нейродегенерации. Методы. Спектрофотометрическое определение в плазме и лейкоцитах (полиморфноядерных и моноядерных) у пациентов с болезнью Альцгеймера, и лиц без признаков нейродегенерации, уровня карбонильных производных белков, спектрофлуорометрическое определение активности лизосомальных цистеиновых катепсинов, анализ корреляционных взаимосвязей между показателями. Результаты. В лейкоцитах при болезни Альцгеймера обнаружена отрицательная корреляция средней степени выраженности между активностью катепсина Н и уровнем продуктов окислительной модификации белка. У пациентов с деменцией сосудистого генеза выявлена отрицательная корреляция средней силы для катепсина B и L в полиморфноядерных лейкоцитах. Аналогичная тенденция и в группе сравнения (пациенты без признаков деменции и нейродегенерации). Также в этой группе обнаружена положительная корреляция средней степени между активностью катепсина L и уровнем маркеров окислительного стресса в плазме крови. По результатам изложенного сделаны следующие выводы: • между активностью катепсина Н и уровнем окислительной модификации белков выявлена умеренная отрицательная корреляция в лейкоцитах пациентов с болезнью Альцгеймера; • активность катепсинов B и L отрицательно коррелирует с уровнем окислительной модификации белков в полиморфноядерных лейкоцитах пациентов с деменцией сосудистого происхождения и у пациентов, не имеющих признаков деменции и нейродегенерации; • активность катепсина L прямо пропорционально коррелирует с уровнем окислительной модификации белка в плазме крови пациентов без признаков деменции и нейродегенерации.

Введение. Молекулярные механизмы развития опухолевой патологии щитовидной железы (ЩЖ) связаны с активацией ангиогенеза и развитием гипоксии, что способствует пролиферации, инвазии и прогрессированию заболевания. Однако до сих пор неизвестны биологические особенности развития заболевания, связанные с вовлечением регионарных лимфатических узлов (ЛУ). Цель исследования. Изучение экспрессии транскрипционных факторов HIF-1, HIF-2, VHL, ростовых факторов VEGF, CAIX, рецептора VEGFR2 в ткани доброкачественных и злокачественных опухолей ЩЖ, а также в ткани метастазов. Материал и методы. В исследование были включены 40 пациентов с патологией ЩЖ, получавших лечение в отделении опухолей головы и шеи Томского НИИ онкологии Томского НИМЦ. Стадия T1-2N0-2M0 наблюдалась у 18 пациентов, T3-4N0-2M0 - у 22 больных. Регионарные метастазы были диагностированы у 19 пациентов, группа без регионарных метастазов включала 21 больного. Уровень экспрессии генов транскрипционных факторов HIF-1, HIF-2, VHL, ростовых факторов VEGF, CAIX, рецептора VEGFR2 оценивали при помощи количественной обратной транскриптазной ПЦР в режиме реального времени (RT-qPCR). Результаты. В работе выявлено повышение уровня HIF-1, HIF-2 в ткани злокачественной опухоли ЩЖ по сравнению с пациентами с доброкачественными опухолями. Экспрессия молекулярных маркеров в ткани папиллярного рака ЩЖ (РЩЖ) не была связана с клинико-морфологическими параметрами заболевания. В ткани метастазов ЩЖ отмечено снижение уровня мРНК VHLuVEGF по сравнению с первичной опухолью. У пациентов с папиллярным РЩЖ с повышенным уровнем мРНК VHL (>1) экспрессия HIF-1, HIF-2 и VEGF, CAIX выше по сравнению с больными с пониженным уровнем VHL (<1). При этом частота распределения в зависимости от уровняэкспрессии белка VHL практически не отличаются в группах пациентов с разным размером опухоли, и распространением заболевания в регионарные ЛУ. Заключение. Выявлено значение молекулярных маркеров, ассоциированных с ангиогенезом: транскрипционных факторов HIF-1, HIF-2, VEGF, VEGFR2 и CAIXв развитии доброкачественных и злокачественных опухолей ЩЖ, а также в распространении заболевания. Формирование метастазов в регионарных ЛУ опосредуется изменением экспрессии белка VHL и ростом экспрессии ангиогенных факторов.