Том 17, № 2 (2017)

Кратко рассмотрен метод масс-спектрометрического анализа, представлен обзор его применения в медицинских исследованиях и клинической диагностике. Обсуждается определение биомаркеров. Характеризуются области диагностики, в которых масс-спектрометрия играет значительную роль: анализ выдыхаемого воздуха, скрининг новорожденных, идентификация микроорганизмов, эндокринология, лекарственная терапия, маркерные пептиды и белки, масс-спектрометрическая визуализация.

Цель исследования: синтез гена, кодирующего сконструированный ранее искусственный белок анторекс - антагонист рецептора орексина ОхR1, изучение его экспрессии в клетках Escherichia coli и разработка метода очистки данного белка из лизатов бактериальных клеток. Использовались методы химико-ферментативного синтеза ДНК, генетической инженерии, селекции и хроматографической очистки белков. Результаты: синтезирован ген, кодирующий белок анторекс, последовательно получены содержащая данный ген плазмидная ДНК рЕТ-antorex и штамм бактерий Escherichia coli BL21(pЕT-аntorex) - стабильный продуцент рекомбинантного белка анторекс, разработаны методы культивирования штамма-продуцента и хроматографической очистки белка анторекс с помощью обратнофазной и ионообменной хроматографии. Произведено культивирование полученного штамма-продуцента в ферментере объемом 10 литров. Наработана опытная партия белка анторекс массой 480 мг с чистотой 97,5%. Заключение: разработанные методы продукции искусственного белка анторекс в бактериальных клетках и его очистки позволяют нарабатывать данный белок для проведения доклинических и клинических испытаний.

Цель исследования: уточнить клинико-морфологические критерии прогноза исходов лечения гастроэнтеропанкреатических нейроэндокринных опухолей. Изучены результаты лечения 190 больных, среди которых нейроэндокринные опухоли поджелудочной железы диагностированы у 84 (44,2%), различных отделов желудочно-кишечного тракта - у 89 (46,3%), метастатическое поражение печени без выявленной локализации первичной опухоли - у 17 (9,5%) больных. Установлено, что основными неблагоприятными прогностическими факторами течения заболевания являются: возраст пациента старше 60 лет, локализация опухоли в толстой кишке и поджелудочной железе, индекс пролиферативной активности (Ki-67) опухоли >10%, III-IV стадия онкологического процесса. Показано, что существенным фактором прогноза у больных генерализованными формами заболевания является возможность проведения комплексного лечения, позволившего увеличить медиану выживаемости больных нейроэндокринными опухолями в 2 раза и нейроэндокринными карциномами в 2,7 раза. Полученные данные свидетельствуют, что при наличии установленных клинико-морфологических критериев неблагоприятного прогноза нейроэндокринных опухолей целесообразно проведение более агрессивных вариантов лечения с целью улучшения отдаленных результатов лечения и качества жизни больных.

Одним из признаков развивающегося нейродегенеративного процесса является внутриядерная концентрация белков, имеющих в составе полипептидной цепи полиглутаминную последовательность. Целью настоящего исследования было выявление таких белков и определение характера их распределения в нейронах красного ядра у людей, не страдавших нейродегенеративными заболеваниями. В работе были использованы фрагменты среднего мозга человека (n=7). Полиглутаминную последовательность (poly-Q) выявляли иммуноцитохимически с помощью моноклональных мышиных антител (клон 1С2). Анализ полученных препаратов показал наличие слабой диффузной реакции структур клеточного ядра в большинстве клеток (как нервных, так и глиальных) красного ядра. При этом в крупных нейронах в двух из семи исследованных случаев реакция внутриядерных структур была диффузной, а в остальных пяти случаях в ядрах крупных нейронов определялись нечетко контурирующиеся иммунопозитивные скопления, которые всегда располагались вне ядрышка. Полученные данные свидетельствуют о том, что в ядрах нервных и глиальных клеток красного ядра может происходить накопление характерных для патологических структур полиглутамин-содержащих белков, не ассоциированное с нейродегенеративным процессом.

Целью исследования стало уточнение феноменологии электрофизиологического паттерна мигательного рефлекса. Мигательный рефлекс регистрировался с помощью электромиографа «Нейро-МВП» фирмы «Нейрософт» (г. Иваново): стандартной методике стимулировалась первая ветвь тройничного нерва электрическим импульсом длительностью 100 мкс силой тока 30-80 мА. При регистрации медленно-позитивной волны использовали функциональную пробу с открытием и закрытием глаз. Медленный дрейф изолинии при регистрации мигательного рефлекса отражает одну из сторон биоактивности круговой мышцы глаза. Изменчивость амплитуды МПВ иллюстрирует функциональную состоятельность надсегментарных модулирующих систем, экстрапирамидной в первую очередь. Целесообразно изучение изменчивости количественных характеристик МПВ при дезорганизации функциональной активности афферентной, вегетативной, экстрапирамидной систем головного мозга, также мышечного рецепторного аппарата.

Цель исследования: Целью настоящей работы явилось сравнительное исследование содержания ХЛП и TNF-α в нестабильных и стабильных атеросклеротических поражениях у человека и оценка их роли в процессе дестабилизации атеросклеротической бляшки. Материал и методы: Исследовали 50 образцов ткани аорты, полученных от мужчин 61±7 лет, умерших от ИБС. Верификацию нестабильных прогрессирующих атеросклеротических бляшек проводили, используя гистологическое окрашивание Oil Red O и гематоксилин Майера. ХЛП выявляли двумя методами: с использованием моноклональных антител против Chlamydia pneumoniae и по модифицированному методу Романовского-Гимзе. Определение TNF-α было осуществлено высокочувствительным двухступенчатым стрептавидин-биотиновым методом. Анализ результатов проводился с помощью светового микроскопа «Leica» DM 2500 и компьютерной программы «Leica Application Suit Version 3.4.0». Результаты: В нестабильных атеросклеротических поражениях в одних и тех же зонах и клеточных типах, составляющих воспалительные инфильтраты, а также в гладкомышечных клетках покрышки этих бляшек выявляются одновременно ХЛП и мощный провоспалительный цитокин TNF-α. В стабильных поражениях ни внутри-, ни внеклеточной экспрессии этого цитокина не наблюдалось. Заключение: На формирование нестабильной бляшки большое влияние может оказывать сочетанное действие ХЛП и TNF-α, способствуя развитию в сосудистой стенке иммуновоспалительного процесса. Потенциальный механизм усиливающего действия на тяжесть заболевания может быть связан с прямым или косвенным влиянием инфекции, как на повреждение сосудистой стенки, так и на усиление продукции провоспалительных цитокинов клетками, которые участвуют в дестабилизации покрышки бляшки.

Цель исследования: изучить клинико-эпидемиологические аспекты распространенности кардиоваскулярных факторов риска среди населения Новгородской области. На основании 1% проспективного выборочного исследования было отобрано 4578 респондентов (2606 мужчин и 1972 женщины). В качестве опросника использована стандартная анкета ГНИЦ ПМ (Бритов А.Н., 2003). Статистическая обработка данных проведена при помощи программы STATISTICA 10, Stat Soft. Лицензионный номер AGAR207F394525FA-6. Среди всех ФР статистически значимые различия выявлены по фактору соблюдения диеты при t=7,27 (р<0,0001) и t=-2,82 (р<0,0156) при оценке несоблюдения диеты. Величина интерквартильного размаха (interyuartile range - QR) по данным непараметрической статистики составила при оценке соблюдения диеты по Ме=28,8 (при 26,3-30,8) и Ме=70,7 (при 60,7-71,3) при оценке несоблюдения диеты. Установлено, что соблюдение диеты более характерно для женщин в пределах 30%. В то же время не соблюдает диету независимо от пола в пределах 60-70% респондентов. Данный факт в дальнейшем нашел отражение в частоте дислипидемии среди населения. Параметрический анализ выявил значительные различия в частоте табакокурения с учетом гендерных различий. Так, никогда не курили 62,4% респондентов при t=4,91 (р<0,0004). При оценке употребления водки в количестве 50-100 мл значимость различий составила при t=-3,56 (р<0,004). Наиболее высокая значимость гендерных различий отмечена при оценке мотивации к труду (желание работать). В данном случае 13,3% женщин отмечает отсутствие мотивации и наличие умеренной мотивации 34,5% (соответственно М=13,3 при SD=4,3±3,7 и М=34,5 при SD=15,0±12,1). Среди мужчин данный показатель равен соответственно М=12,4 при SD=2,9±1,9 и М=31,5 при SD=15,2±13,2. Таким образом, установлено, что отсутствие мотивации к труду у мужчин более выражена, чем у женщин. При оценке умеренной неудовлетворенности отношениями в семье выявлено гендерное различие при t=2,64 (р<0,0217). Среди женщин М=24,6% при SD=4,5±3,3; среди мужчин М=18,4% при SD=4,1±3,1. Таким образом, выявлен более высокий уровень умеренной неудовлетворенностью в семье у женщин. По остальным показателям статистически значимые гендерные различия отсутствуют. Проведенный анализ на базе критерия несогласия доказывает возможное влияние на развитие сердечно-сосудистой патологии у населения таких ФР как ожирение, табакокурение, злоупотребление алкоголем (на фоне омоложении данных ФР), семейный статус (особенно состояние вдовости), неудовлетворенность работой и стрессов. Однако, наличие высокого уровня образовательного ценза у населения позволяет активно использовать «школы гипертоников» для технологической интервенции в качестве базового средства первичной профилактики АГ и его осложнений.