Том 22, № 2 (2022)

В обзоре обсуждается комплексная роль кишечной микробиоты в патогенезе рассеянного склероза, обобщены данные исследований изменений состава кишечного микробиома у пациентов с рассеянным склерозом и приведены доказательства вовлечения кишечной микробиоты в развитие экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита у животных — общепринятой модели рассеянного склероза.

COVID-19 — острая респираторная вирусная инфекция, вызываемая коронавирусом SARS-CoV-2 (2019-nCoV). Подходы к лечению пациентов с COVID-19, или новой коронавирусной инфекцией, сводятся в основном к патогенетической и симптоматической терапии. Стратегии новых разработок лечения предполагают исследования в области поиска новых молекул-кандидатов, а также репозиционирование существующих лекарственных препаратов. В последнее время активно изучают демонстрирующие высокий уровень противовирусной и противовоспалительной активности лекарственные растения — как потенциальные кандидаты для лечения COVID-19. Настоящий обзор посвящен систематизации (на основе сведений мировой научной литературы) лекарственных растений, биологически активные вещества которых используются или могут быть использованы как для лечения, так и для поддерживающей лекарственной терапии новой коронавирусной инфекции.

Обоснование. В XIX столетии завершился процесс присоединения земель на северо-востоке Российской империи. Приток пришлого населения, политическая ссылка, уголовная каторга создавали предпосылки к обострению эпидемиологической ситуации на вновь присоединенных территориях, и заболеваемость населения стала приобретать эпидемический характер. В XIX в. сифилис и проказа поразили инородческие общины северных и восточных территорий Тихого океана, Охотского моря, Камчатского полуострова, а также их пришлое население.

Цель — систематизировать, а также выявить определенные тенденции распространенности и форм проявления сифилиса и проказы среди населения северо-восточных округов Восточной Сибири XIX в. по отчетным материалам врачей и органов власти того времени.

Материалы и методы. На основании архивных материалов рассматриваются пути завоза и распространения, а также клиническое течение и формы проявления сифилиса среди представителей отдельных инородческих общин, отмечается множественность путей проникновения сифилиса на окраины Восточной Сибири. В отчетах командированных врачей, посвященных осмотру населения и лечению больных, приводятся первые статистические сведения о заболеваемости мужчин, женщин, их принадлежности к той или иной народности, об исходах лечения.

Результаты. В статье освещена роль факторов, способствующих высокому уровню распространения сифилиса и проказы среди инородческих общин, описаны симптомы проявления прежде всего «застарелого сифилиса», отмечена роль антисанитарных условий проживания и обустройства быта в распространении болезней.

Заключение. Наблюдение клинических проявлений сифилиса позволило врачам уже в XIX в. выделить проказу как самостоятельную форму болезни, исследовать ее причины. Данные наблюдения положены в основу разработки мер, направленных на прекращение распространения болезни среди населения. Отмечено начало возникновения медико-полицейского надзора, направленного на выявление больных, их регистрацию и лечение.

Обоснование. Беспрецедентные противоэпидемические мероприятия и широкое применение вакцин против COVID-19 позволили снизить уровень госпитализации и смертности от заболевания, но не остановили пандемическое распространение коронавируса SARS-CoV-2. Именно поэтому актуальна разработка живых вакцин против COVID-19, способных обеспечить формирование длительного гуморального и клеточного иммунного ответа и перекрестную защиту от новых эпидемиологически значимых вариантов SARS-CoV-2. Ранее в НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова были получены холодоадаптированные (ca, cold-adapted) варианты коронавируса SARS-CoV-2.

Цель настоящей статьи — поиск методических подходов, позволяющих производить скрининговые исследования in vitro для оценки аттенуационного (att) фенотипа ca вариантов SARS-CoV-2.

Материалы и методы. Лабораторный штамм SARS-CoV-2 Dubrovka и его варианты культивировали в клетках Vero и Calu-3. Количественное определение вируса проводили путем титрования в клетках Vero и методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в режиме реального времени. Att-фенотип вариантов SARS-CoV-2 определяли на животной модели COVID-19 на сирийских хомяках.

Результаты. В опытах на сирийских хомяках установлено наличие у ca-вариантов вируса att-фенотипа. Животные, зараженные ca-вариантами вируса, достоверно меньше теряли в весе, имели меньшую вирусную нагрузку в легких и мозге и менее выраженные патологические изменения в легких по сравнению с заражением вирулентным штаммом. В экспериментах in vitro на клетках Vero и Calu-3 выявлены вероятные маркеры аттенуации са-вариантов вируса для сирийских хомяков: (1) способность размножаться при пониженной температуре (са-фенотип); (2) неспособность размножаться при 39 °C (ts-фенотип); (3) изменение видовой и тканевой специфичности вируса.

Заключение. Разработанные методические подходы к выявлению in vitro маркеров аттенуации SARS-CoV-2 — ценный инструмент контроля стабильности фенотипа кандидатных вакцинных штаммов.

Обоснование. Стремительное распространение коронавируса SARS-CoV-2, вызвавшего пандемию COVID-19, и быстрое появление коциркулирующих антигенно отличающихся вариантов вируса, обусловливают необходимость разработки и обновления тест-систем. Перспективное направление для их создания — протоколы на основе пиросеквенирования.

Цель исследования — разработка протоколов генотипирования наиболее распространенных вариантов коронавируса SARS-CoV-2 с применением полимеразной цепной реакции с последующим определением варианта вируса в пробе методом пиросеквенирования.

Материалы и методы. Разработка протоколов основывалась на выравнивании последовательностей SARS-CoV-2. Тестирование проводилось с использованием РНК вирусов SARS-CoV-2 линий альфа, бета, гамма, дельта, омикрон и референсного варианта. Пиросеквенирование и обработка данных выполнялись системой PyroMark Q24.

Результаты. Отработаны протоколы постановки полимеразной цепной реакции и пиросеквенирования, позволяющие определять последовательности фрагментов гена S, замены в которых характеризуют отдельные варианты SARS-CoV-2. Протоколы позволяют детектировать участки, кодирующие замены в аминокислотных позициях L18F, T19R, T20N; A67V, Δ69-70; G142D, Δ143-145; Δ156-157, R158G; Δ242-244; K417N/T; L452R; S477N, T478K, E484A/K/Q; H655Y; N679K, P681H/R. Проводилась также оценка специфичности системы в реакциях с отрицательным контрольным образцом (РНК, выделенная из соскоба эпителиальных клеток человека).

Заключение. Нами произведена разработка и первичная апробация протоколов для генотипирования вариантов коронавируса (альфа, бета, гамма, дельта, омикрон) на основе методики полимеразной цепной реакции с последующим определением вариантов методом пиросеквенирования c помощью PyroMark Q24. В протоколы заложена возможность гибкой подстройки под текущую эпидемиологическую обстановку за счет возможности оперативного увеличения количества детектируемых участков. Разработанные протоколы позволяют определить подтип вируса в образце, накопленном на культуре клеток.

Обоснование. Сирийские хомяки — наиболее адекватная модель для изучения патогенеза новой коронавирусной инфекции и тестирования профилактических и терапевтических препаратов от SARS-CoV-2, так как они отличаются высокой чувствительностью к заражению этим вирусом. Таким образом, анализ корреляции тяжести заболевания с патоморфологическими признаками поражения тканей животных открывает новые возможности для оценки лекарственных средств в доклинической практике.

Цель статьи — комплексная оценка патогенности вирусов SARS-CoV-2 линий В.1 и В.1.167.2 на модели сирийских хомяков для выявления наиболее чувствительных критериев, коррелирующих с клинической картиной заболевания.

Материалы и методы. Интраназальное заражение животных вирусами с последующей оценкой клинической картины заболевания и детальным патоморфологическим исследованием различных органов, извлеченных на 5-е сутки после заражения.

Результаты. Показано, что вирус SARS-CoV-2 варианта Дельта (В.1.617.2) отличается меньшей патогенностью по сравнению с исходным штаммом В.1 первой волны пандемии COVID-19. Комплексное морфометрическое и гистологическое исследование тканей легких зараженных животных выявило наиболее чувствительный морфометрический показатель, отражающий степень выраженности SARS-CoV-2-индуцированной патологии — толщину межальвеолярных перегородок.

Заключение. Изменение толщины межальвеолярных перегородок позволяет определить даже незначительные различия в степени выраженности вирусиндуцированной патологии у сирийских хомяков, что может оказаться критическим при доклиническом исследовании препаратов от COVID-19.

Обоснование. Муковисцидоз — одно из наиболее частых моногенных заболеваний человека, при котором кроме лечебных процедур большое значение имеют действия по профилактике инфекционного процесса в легких. Такие профилактические действия можно обеспечить четкой организацией работы любого лечебного учреждения, где больные наблюдаются и где проводятся лечебные и реабилитационные мероприятия.

Цель статьи — представить анализ и методологию опыта организации работы Городского детского центра муковисцидоза при Детской городской больнице Святой Ольги в Санкт-Петербурге.

Материалы и методы. Принятые меры включали систему мониторинга и динамического контроля высеваемой патогенной микрофлоры со строгим разделением пациентов, с муковисцидозом, имеющих выделение и носительство разных патогенов. Система предусматривала разделение потоков больных муковисцидозом и предупреждение перекрестного инфицирования, а также ряд мероприятий, связанных с дезинфекцией оборудования.

Результаты. Принятые и внедренные в практику методы обеспечили профилактику перекрестного инфицирования пациентов с муковисцидозом, выделяющих разные патогенные бактерии из мокроты. Система ведения больных позволила в 2 раза снизить число госпитализаций пациентов с синегнойной инфекцией на одного больного муковисцидозом в год: с 1,3 в 2001 г. до 0,6 — в 2021, уменьшить риск перекрестной инфекции, снизить число рецидивов, госпитализаций и среднего срока нахождения пациента в стационаре.

Заключение. Разработанная система оказания помощи показала свою эффективность и может быть внедрена в том или ином виде в работу центров лечения муковисцидоза в Российской Федерации.

Обоснование. При COVID-19 происходит активация иммунокомпетентных клеток, однако мало что известно об активационном маркере CD38 на Т- и NK-клетках и его связи со степенью тяжести течения COVID-19.

Цель статьи — проанализировать распределение поверхностного маркера CD38 в подмножествах T- и NK-клеток на разных стадиях дифференцировки в группах пациентов с COVID-19 и после перенесенной инфекции; установить взаимосвязь уровня экспрессии CD38 в субпопуляциях T- и NK-клеток со степенью тяжести течения COVID-19.

Материалы и методы. Мононуклеарные клетки периферической крови пациентов и здоровых доноров выделяли на градиенте плотности фиколла с последующим цитофлуориметрическим анализом маркеров CD3, CD56, CD38.

Результаты. В каждом образце мононуклеарных клеток периферической крови анализировали уровень экспрессии CD38 в регионах NK-клеток (CD3^–CD56⁺), в том числе в подмножествах CD56^bright и CD56^dim, а также Т-лимфоцитов, дифференцируя традиционные CD56^– (CD3⁺CD56^–) и NKT-подобные (CD3⁺CD56⁺) клетки. Среди CD56^– Т-клеток и NKT-подобных клеток наибольший уровень экспрессии CD38 зарегистрирован в группах пациентов средней тяжести и реконвалесцентов, а сниженный — в группе пациентов отделения реанимации и интенсивной терапии.

Заключение. Полученные данные позволяют сделать предположение, что оценка уровня CD38⁺ T-клеток при СOVID-19 может иметь диагностическое значение.

Обоснование. Оценка специфической активности (иммуногенности) методом реакции нейтрализации живого вируса SARS-CoV-2 II группы патогенности сыворотками иммунизированных животных — один из основных анализов при выпускающем контроле инактивированной вакцины против коронавирусной инфекции. Но при этом необходимо соблюдать определенные ограничения для лаборатории — наличие зоны биологической безопасности. Разработка аналога реакции нейтрализации на основе иммуноферментного анализа позволяет контролировать вакцину в более короткие сроки в условиях, не требующих высокого класса биологической безопасности.

Цель исследования — разработка платформы на основе иммуноферментного анализа, способной достоверно оценить появление нейтрализующих антител при иммунизации животных вакцинным препаратом против коронавирусной инфекции.

Материалы и методы. В клетках Escherichia coli осуществляли гетерологическую экспрессию гена рекомбинантного рецепторсвязывающего домена, слитого с С-концевой гексагистидиновой последовательностью, после чего целевой продукт выделяли и очищали на металл-аффинном сорбенте WorkBeads NiMAC (Bio-Works). Полученный белок в иммуноферментной тест-системе служил антигеном для сорбции. Сыворотки мышей, иммунизированных вакцинным препаратом, проверяли на нейтрализующую активность против вируса SARS-CoV-2, кроме того, оценивали взаимодействие молекул в разработанном иммуноферментном анализе.

Результаты. В иммуноферментном анализе сыворотки с высоким нейтрализующим титром показали высокую степень сцепления с рекомбинантным рецепторсвязывающим доменом, слитым с С-концевой гексагистидиновой последовательностью, тогда как сыворотки не иммунизированных животных или с титром в реакции нейтрализации меньше чем 1 : 8 не детектировались. Коэффициенты корреляции Спирмена и Пирсона титров вируснейтрализующих антител и значений оптической плотности раствора в иммуноферментном анализе составили 0,759 и 0,76 соответственно. Разработанная платформа может применяться как полуколичественный метод оценки иммуногенности вакцинного препарата против коронавирусной инфекции.

Заключение. Разработанная нами платформа позволяет достоверно оценивать иммуногенность инактивированной коронавирусной вакцины в условиях, не требующих высокого класса биологической безопасности.

Обоснование. Один из подходов, позволяющий разрабатывать вакцины относительно быстро и недорого, — ДНК-вакцинные конструкции. Они особенно интересны для профилактики COVID-19, так как индуцируют оба типа иммунного ответа — гуморальный и Т-клеточный. Ранее нами были созданы две ДНК-вакцины на основе вектора pVAX: одна кодирует полный ген S-белка вируса SARS-CoV-2, вторая — только рецепторсвязывающий домен (RBD) белка S вируса SARS-CoV-2. Далее «голая» ДНК была обернута в поликатионный комплекс полиглюкин-спермидина, конъюгированного с белком RBD. Полученные комбинированные ДНК-белковые конструкции названы CCV-RBD и CCV-S соответственно.

Цель — исследовать на животной модели Т-клеточный иммунный ответ разработанных комбинированных ДНК-белковых кандидатных вакцин.

Материалы и методы. Мышей линии BALB/c иммунизировали конструкциями CCV-RBD и CCV-S, затем у них извлекали селезенки, из которых выделяли спленоциты. Клеточный ответ оценивали по способности спленоцитов секретировать цитокины в ответ на стимуляцию вирусными пептидами. Интенсивность ответа регистрировали с помощью метода внутриклеточного окрашивая цитокинов (ICS) с использованием проточной цитометрии.

Результаты. Мыши BALB/c (по 8 особей в группе) были иммунизированы дважды с интервалом три недели дозой 100 мкг ДНК: 1) CCV-RBD; 2) CCV-S; 3) интактные животные. Показано, что как хелперные Т-лимфоциты (CD4⁺), так и цитотоксические Т-лимфоциты (CD8⁺) животных, иммунизированных CCV-S и CCV-RBD, отвечают выбросом цитокинов в ответ на стимуляцию вирусными пептидами.

Заключение. В случае CCV-RBD наблюдали тенденцию к более высокому (по сравнению с группой CCV-S) ответу — как у CD4⁺ Т-хелперов, так и у CD8⁺ Т-киллеров. Возможно, это различие может быть связано с более эффективным синтезом белка RBD, чем белка S, обеспечиваемым ДНК-вакциной.

Обоснование. Средства профилактики на основе нуклеиновых кислот — многообещающая платформа для создания вакцин, в том числе против COVID-19. Ранее мы разработали ДНК-вакцину рVAXrbd, кодирующую RBD — рецепторсвязывающий домен SARS-CoV-2, индуцирующую при внутримышечном введении животным относительно слабый иммунный ответ. Следующая ступень исследования — усиление этого ответа, в частности электропорацией, одним из методов повышения иммуногенности ДНК-вакцин.

Цель статьи — оценить иммунный ответ с использованием электропорации у мышей после иммунизации pVAXrbd.

Материалы и методы. Мышей линии BALB/c иммунизировали pVAXrbd электропорацией постоянным током прямоугольной формы прямой и обратной полярности тремя импульсами с напряжением 12 В в течение 30 мс и интервалом 950 мл с ограничением по силе тока 45 мА.

Результаты. Мыши BALB/c иммунизированы дважды с интервалом в три недели дозой 100 мкг ДНК. Полученные с помощью иммуноферментного анализа крови титры RBD-специфических антител в группе животных, иммунизированных рVAXrbd с применением электропорации, составили 1 : 109 350, что в 16,2 раз выше, чем в группе животных, получавших ДНК-вакцину только внутримышечно (титры 1 : 6750). Анализ IFNγ ELISpot показал, что наибольшее количество клеток (2434 спотов/спленоциты, млн), продуцирующих IFNγ в ответ на стимуляцию пептидами из белка RBD, зарегистрировано в группе животных, иммунизированных рVAXrbd с применением электропорации. Для сравнения: в контрольной группе количество клеток в 6,5 раз ниже (380 спотов/спленоциты, млн).

Заключение. Введение ДНК-вакцины рVAXrbd лабораторным животным электропорацией значительно усиливает как гуморальный, так и клеточный специфический иммунный ответ в сравнении с внутримышечным введением «голой» ДНК-вакцины.

Обоснование. Рукокрылые — своего рода резервуар большого количества вирусов, включая коронавирусы. Именно поэтому мониторинг коронавирусов в летучих мышах — актуальная на сегодняшний день задача.

Цель исследования — поиск новых вирусов семейств Coronaviridae, носители которых — летучие мыши, обитающие на территории Европейской части России.

Материалы и методы. Для поиска вирусов в фекалиях летучих мышей, пойманных в Москве, Московской области (Солнечногорск, Видное, Троицк, Мытищи), Калуге, Ростове-на-Дону, Йошкар-Оле в 2021 г., применяли методику выявления вирусов с помощью амплификации фрагментов геномов вирусов (участка RdRp, кодирующего репликазу), с последующим проведением высокопроизводительного секвенирования этих фрагментов на платформе Illumina (MiSeq, USA).

Результаты. Установлены последовательности фрагментов генов RdRp как минимум двух разных коронавирусов в четырех особях летучих мышей трех разных видов.

Заключение. Наши результаты демонстрируют наличие вирусов рода Alphacoronavirus в четырех из 17 особей. Положительные на коронавирус четыре летучие мыши, пойманные в 2021 г. на территории Москвы, Московской области и Ростова-на-Дону, оказались носителями разных изолятов одного альфакоронавируса, что позволяет предположить возможность передачи этого вируса между животными разных видов. В одной особи обнаружены фрагменты генома двух разных альфакоронавирусов.

Обоснование. Пандемия, вызванная появлением вируса SARS-CoV-2 в конце 2019 г., все еще остается серьезной проблемой здравоохранения. Ввиду постоянного антигенного дрейфа возбудителя, приводящего к снижению эффективности лицензированных вакцин от COVID-19, актуальна разработка вакцин широкого спектра действия, эффективных в отношении эволюционно удаленных вариантов коронавируса. В отличие от вирусспецифических антител c достаточно узким диапазоном действия, Т-клеточное звено иммунитета обладает более широким кросс-протективным потенциалом. Сирийские хомячки — адекватная модель для доклинической оценки новых вакцинных кандидатов, поскольку эти животные не только чувствительны к новой коронавирусной инфекции, но и способны проявлять клинические симптомы заболевания. Однако тестирование Т-клеточных вакцин на хомяках осложняется отсутствием доступных реагентов и тест-систем, позволяющих адекватно оценивать уровни вирусспецифического клеточного иммунитета на вакцинацию.

Цель работы — оптимизация условий стимуляции иммунных клеток сирийских хомячков живым вирусом SARS-CoV-2 для оценки уровней вирусспецифического Т-клеточного иммунного ответа.

Материалы и методы. Интраназальное заражение животных вирусом SARS-CoV-2 с последующей стимуляцией иммунных клеток различными дозами цельного живого коронавируса и подсчетом IFNγ-продуцирующих клеток методом ELISpot.

Результаты. Показано, что стимуляция клеток селезенок и легких хомяков вирусом в дозе 0,1 ТЦИД₅₀/клетку оптимальна для определения максимальных уровней цитокин-продуцирующих клеток у животных, зараженных SARS-CoV-2. Кроме того, стимуляция клеток цельным вирусом показала большее количество вирусспецифических клеток по сравнению с пулом перекрывающихся пептидов, соответствующих белкам S и N коронавируса.

Заключение. В целом новая методика позволит более точно оценивать иммуногенность Т-клеточных вакцин от COVID-19 в доклинических исследованиях на модели сирийских хомячков.

Обоснование. Пандемия привела к широкому распространению разнообразных иммунологических осложнений COVID-19, таких как синдром хронической усталости и фибромиалгия. Эти синдромы, часто возникающие на фоне аутоиммунных заболеваний, могут сопровождаться вовлечением в патологический процесс вестибулярной функции.

Цель статьи — оценить и сопоставить (со здоровыми добровольцами) состояние вестибулярной функции у пациентов с аутоиммунными заболеваниями, сопровождающимися синдромом хронической усталости и фибромиалгией, перенесших COVID-19 и без COVID-19 в анамнезе.

Материалы и методы. Функциональное исследование вестибулярного аппарата, заполнение «вестибулярного паспорта» и сбор анамнеза по стандартному опросному листу выполнены для пациентов с предполагаемой аутоиммунной дисфункцией и наличием синдромов хронической усталости, фибромиалгии и/или постуральной ортостатической тахикардии, а также для контрольной группы здоровых испытуемых.

Результаты. В группе пациентов, переболевших COVID-19, выявлен достоверно больший процент случаев вестибулопатии, чем у здоровых добровольцев (33 и 6 % соответственно, p < 0,05). У пациентов без COVID-19 в анамнезе доля лиц с вестибулопатией достоверно не отличалась от таковой среди здоровых добровольцев — 14 и 6 % соответственно, p = 0,26. Жалобы пациентов, которые предполагают вестибулярную патологию, подтвердились в 2/3 случаев.

Заключение. Пациенты с синдромом хронической усталости и фибромиалгией, переболевшие COVID-19, более склонны к развитию вестибулопатий, чем пациенты без COVID-19 в анамнезе, чьи вестибулярные показатели не отличаются от таковых у здоровых добровольцев. Полученные данные носят предварительный характер.

Обоснование. RBD, рецепторсвязывающий домен, — ключевой участок поверхностного гликопротеина SARS-CoV-2 для связывания вируса с рецепторами клетки-хозяина и одна из мишеней вируснейтрализующих антител. Именно поэтому RBD считается перспективным иммуногеном для разработки вакцин, способных обеспечить защиту от COVID-19. мРНК-вакцины, одна из новых и быстро развивающихся вакцинных платформ, а система доставки — очень важный ее компонент.

Цель статьи — представить результаты исследования антигенных свойств мРНК, кодирующей рецепторсвязывающийся домен SARS-CoV-2, при введении ее в комплексе с поликатионным носителем.

Материалы и методы. C помощью динамического и электрофоретического рассеяния света дана характеристика комплексов мРНК с конъюгатом полиглюкина со спермидином. Для оценки иммуногенности мРНК проведена иммунизация мышей линии BALB/c. Специфическую активность сывороток оценивали с помощью иммуноферментного анализа.

Результаты. Определены размеры и поверхностный заряд комплексов мРНК, кодирующей RBD, с конъюгатом полиглюкина со спермидином. Показано, что упаковка мРНК в оболочку конъюгата полиглюкина со спермидином приводит к увеличению индукции специфических к RBD антител у мышей BALB/c в отличие от «голой» мРНК.

Заключение. Получена мРНК, кодирующая рецепторсвязывающий домен SARS-CoV-2. Показано, что упаковка мРНК в оболочку конъюгата полиглюкина со спермидином приводит к увеличению иммуногенных свойств.

Обоснование. Физиологические особенности организма беременной включают ее в группу риска по более тяжелому течению заболевания, поэтому ведение и лечение таких пациенток требует наиболее тщательного контроля, а также слаженной работы гинеколога и инфекциониста.

Цель статьи — оценить варианты течения заболевания у беременных с подтвержденной коронавирусной инфекцией.

Материалы и методы. Проанализированы истории болезни пациенток, находившихся на лечении в инфекционном отделении ОГБУЗ «Клиническая больница № 1» Смоленска с мая 2020 г. по сентябрь 2021 г., необходимые данные внесены в протоколы нашего исследования. Оценивали такие показатели, как основной диагноз и тяжесть течения заболевания, жалобы при поступлении, наличие и стадии лихорадки, возраст, сроки гестации, наличие сопутствующей патологии и осложненного акушерско-гинекологического анамнеза.

Результаты. Анализ течения заболевания по историям болезни показал: у беременных преобладает среднетяжелая форма новой коронавирусной инфекции.

Заключение. Установлена тенденция к среднетяжелому течению новой коронавирусной инфекции COVID-19. Вероятно, это связано с наличием у большинства пациенток в анамнезе заболеваний сердечно-сосудистой системы, почек, печени, а также сахарного диабета, ожирения, анемии.

Обоснование. Появление в конце 2020 г. новых вариантов вируса SARS-CoV-2, ставших источником повышенного риска для глобального общественного здравоохранения, стимулировало исследования их молекулярно-биологических особенностей и патогенного действия. Известно, что одна из причин патогенного действия вирусов — их взаимодействие с защитными механизмами клетки: Ire1 (inositol-requiring enzyme 1)-опосредованный сплайсинг мРНК Xbp1 (X-box binding protein 1) — защитный механизм, активирующийся в ответ на накопление неправильно свернутых белков в клетке, в ситуации, возникающей из-за неконтролируемого синтеза вирусных белков при инфекции. Изучение взаимодействия различных вариантов вируса SARS-CoV-2 с этим защитным механизмом поможет пролить свет на различные аспекты патогенеза новой коронавирусной инфекции.

Цель — изучить активацию и модуляцию Ire1-Xbp1 защитного механизма в клетках Vero, инфицированных различными вариантами вируса SARS-CoV-2.

Материалы и методы. Активацию Ire1 в зараженных различными вариантами вируса SARS-CoV-2 клетках Vero исследовали с помощью вестерн-блота и антител к фосфорилированной и нативной форме этого белка. Активацию сплайсинга мРНК Xbp1 в условиях инфекции различными вариантами вируса SARS-CoV-2 анализировали в реакции полимеразной цепной реакции со специфическими праймерами.

Результаты. В клетках Vero при инфицировании вирусом SARS-CoV-2 репродукция штамма B.1.1.529 (Omicron) происходит медленнее (48 ч), чем у штаммов B.1.1.7 (Alpha), B.1.617.2 (Delta).

При инфицировании клеток Vero вариантами вируса SARS-CoV-2 активируется Ire1-зависимый защитный механизм. В частности, было показано, что через 12 ч после инфекции Ire1 фосфорилируется. Несмотря на активацию Ire1, сплайсинга мРНК Xbp1 в зараженных SARS-CoV-2 клетках нет. Ингибирование сплайсинга мРНК Xbp1 происходит медленнее в клетках Vero, зараженных вариантом B.1.1.529 Omicron.

Выводы. Описано размножение различных вариантов вируса SARS-CoV-2 в культуре клеток Vero и активация Ire1-Xbp1 защитного механизма при инфекции. При SARS-CoV-2 инфекции Ire1 эндонуклеаза фосфорилируется, однако сплайсинг мРНК транскрипционного фактора Xbp1 нарушен. Снижение скорости ингибирования Ire1-Xbp1 защитного механизма у варианта Omicron (B.1.1.529) вируса SARS-CoV-2 по сравнению с вариантами B.1.1.7 (Alpha) и B.1.617.2 (Delta) может быть причиной его меньшей патогенности, описанной в различных исследованиях.